2.2. Quantification of indicator ba

2.2. Quantification of indicator bacteria

E. coli and total coliforms were enumerated for all water samples using filter units (37 mm MONITOR UNIT, 37 mm diameter, 0.45 μm pore size, ADVANTEC) wetted with m-ColiBlue24® Broth (HACH), a selective chromogenic culture media. Within 6 h of sample collection, a volume of 1–50 mL of the samples (depending on the sampling location) was passed through the filters units to capture the bacteria on the filter surface, after which a premeasured ampoule of the culture medium was added to the filter unit. The filters were incubated at 37 °C overnight and then enumerated for E. coli (appearing as blue colonies) and total coliforms (the sum of red and blue colonies).

2.3. Concentration of viruses in water samples

Viruses in the water samples were concentrated within 24 h of collection by one of two adsorption-elution methods using electronegative membrane filters, depending on the sample volume. Raw water samples were concentrated based on the method described by Katayama et al., 2002a and Katayama et al., 2002b with slight modification. Briefly, 2.5 mol/L of MgCl2 was added to the samples to obtain a final concentration of 25 mmol/L and the samples were passed through an electronegative membrane filter (45 mm diameter, 0.45 μm pore size; Merck Millipore). After the binding of viruses and magnesium to the filter, an acid rinse was performed by passing 200 mL of 0.5 mmol/L H2SO4 (pH 3.0) through the filter, which dissolves and removes the bound magnesium from the filter. Finally, the captured viruses were eluted with 10 mL of 1.0 mmol/L NaOH (pH 10.8). The eluate was recovered in a tube containing 50 μL of 100 mmol/L H2SO4 (pH 1.0) and 100 μL of 100 × Tris-EDTA buffer (pH 8.0) for neutralization. The eluates were further concentrated using a Centriprep YM-50 filter unit (Merck Millipore) to obtain a final volume of approximately 700 μL, according to the manufacturer's protocol.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. นับจำนวนแบคทีเรียตัวบ่งชี้รวม coliforms และ e. coli ระบุค่าสำหรับตัวอย่างน้ำทั้งหมดที่ใช้หน่วยกรอง (37 มม.จอภาพหน่วย เส้นผ่านศูนย์กลาง 37 มม. ขนาดของรูพรุน 0.45 ไมครอน ADVANTEC) เปียกกับ m ColiBlue24 ® ซุป (HACH), สื่อวัฒนธรรม chromogenic เลือก ภายใน 6 ชม.การเก็บตัวอย่าง ปริมาตรของ 1 – 50 mL ของตัวอย่าง (ขึ้นอยู่กับตำแหน่งสุ่มตัวอย่าง) ถูกส่งผ่านผ่านหน่วยกรองจับแบคทีเรียบนพื้นผิวตัวกรอง หลังจากที่หลอดเป็น premeasured ของสื่อวัฒนธรรมถูกหน่วยกรอง ตัวกรองได้รับการกกที่ 37 ° C ค้างคืน และจากนั้น ระบุสำหรับ E. coli (ปรากฏเป็นสีน้ำเงินอาณานิคม) และรวม coliforms (ผลรวมของโคโลนีสีแดง และสีน้ำเงิน)2.3. ความเข้มข้นของไวรัสในตัวอย่างน้ำไวรัสในตัวอย่างน้ำมีความเข้มข้นภายใน 24 ชั่วโมงของคอลเลกชัน โดยหนึ่งสองชะดูดซับวิธีการใช้ตัวกรองเมมเบรน electronegative ขึ้นอยู่กับปริมาณตัวอย่าง ตัวอย่างน้ำดิบได้เข้มข้นตามวิธีอธิบาย โดยคาตายามะ et al. 2002a และคาตายามะ et al. 2002b มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สั้น ๆ ตัวอย่างการขอรับความเข้มข้นสุดท้าย 25 mmol/l ถูก 2.5 mol/L ของ MgCl2 และตัวอย่างถูกส่งผ่านตัวกรองเมมเบรน electronegative (เส้นผ่าศูนย์กลาง 45 มม. 0.45 ไมครอนขนาดรูขุมขน เมอร์คมิลลิพอร์) หลังจากการรวมของไวรัสและแมกนีเซียมตัวกรอง การล้างกรดได้ดำเนินการ โดยผ่านตัวกรอง ซึ่งละลาย และเอาแมกนีเซียมผูกจากตัวกรอง ขนาด 200 มล. 0.5 mmol/l H2SO4 (pH 3.0) ในที่สุด ไวรัสยึดได้ถูก eluted กับ 10 mL 1.0 mmol/l NaOH (pH 10.8) Eluate การกู้คืนในหลอดที่ประกอบด้วย μL 50 100 mmol/l H2SO4 (pH 1.0) และ μL 100 100 ×ทริสเรทติ้ง EDTA บัฟเฟอร์ (pH 8.0) สำหรับวางตัวเป็นกลาง Eluates ถูกเพิ่มเติม เข้มข้นโดยใช้หน่วยกรอง Centriprep YM-50 (เอาใจใส่) จะได้รับปริมาณสุดท้ายของ μL ประมาณ 700 ตามโพรโทคอลผู้ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 ปริมาณของเชื้อแบคทีเรียตัวบ่งชี้

อี coli และโคลิฟอร์มทั้งหมดถูกแจกแจงสำหรับตัวอย่างน้ำทั้งหมดที่ใช้หน่วยกรอง (37 มม MONITOR UNIT ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 37 มิลลิเมตร 0.45 ไมครอนขนาดรูขุมขน, ADVANTEC) เปียกด้วย M-ColiBlue24®น้ำซุป (HACH) ซึ่งเป็นสื่อเลือกวัฒนธรรมวิทยา ภายใน 6 ชั่วโมงของการเก็บตัวอย่างปริมาณของ 1-50 มิลลิลิตรของกลุ่มตัวอย่าง (ขึ้นอยู่กับสถานที่ตั้งของการสุ่มตัวอย่าง) คือการผ่านหน่วยกรองเพื่อจับแบคทีเรียบนพื้นผิวตัวกรองหลังจากที่หลอด premeasured ของกลางวัฒนธรรมที่ถูกเพิ่ม ไปยังหน่วยกรอง ฟิลเตอร์ที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืนแล้วแจกแจงสำหรับเชื้อ E. coli (ปรากฏอาณานิคมเป็นสีฟ้า) และโคลิฟอร์มทั้งหมด (ผลรวมของสีแดงและสีฟ้าอาณานิคม).

2.3 ความเข้มข้นของไวรัสในตัวอย่างน้ำ

ไวรัสในตัวอย่างน้ำมีความเข้มข้นภายใน 24 ชั่วโมงของการเก็บรวบรวมโดยหนึ่งในสองวิธีดูดซับชะใช้ตัวกรองเมมเบรนขั้วลบขึ้นอยู่กับปริมาณของกลุ่มตัวอย่าง ตัวอย่างน้ำดิบมีความเข้มข้นขึ้นอยู่กับวิธีการอธิบายโดย Katayama et al., 2002a และ Katayama et al., 2002b มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สั้น ๆ , 2.5 โมล / ลิตร MgCl2 ถูกบันทึกอยู่ในตัวอย่างเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายของ 25 มิลลิโมล / ลิตรและกลุ่มตัวอย่างที่ถูกส่งผ่านตัวกรองเมมเบรนขั้วลบ (45 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.45 ไมครอนขนาดรูขุมขน; เมอร์ค) หลังจากที่มีผลผูกพันของไวรัสและแมกนีเซียมกรองการล้างกรดได้ดำเนินการโดยผ่าน 200 มล 0.5 มิลลิโมล / ลิตร H2SO4 (pH 3.0) ผ่านตัวกรองซึ่งละลายและลบแมกนีเซียมผูกพันจากตัวกรอง สุดท้ายจับไวรัสที่ถูกชะ 10 มล 1.0 มิลลิโมล / ลิตร NaOH (pH 10.8) eluate หายในหลอดที่มี 50 ไมโครลิตร 100 มิลลิโมล / ลิตร H2SO4 (pH 1.0) และ 100 ไมโครลิตร 100 × Tris-EDTA บัฟเฟอร์ (pH 8.0) สำหรับการวางตัวเป็นกลาง eluates มีความเข้มข้นต่อไปโดยใช้ตัวกรอง Centriprep YM-50 หน่วย (เมอร์ค) เพื่อให้ได้ปริมาณสุดท้ายประมาณ 700 ไมโครลิตรตามโปรโตคอลของผู้ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . ตัวบ่งชี้ปริมาณของแบคทีเรียเชื้ออีโคไลและโคลิฟอร์มทั้งหมดถูกระบุสำหรับน้ำตัวอย่างโดยใช้หน่วยกรอง ( 37 มม. จอแสดงผลหน่วย ขนาด 37 มม. ขนาดรูพรุน 0.45 μ M , เปียก m-coliblue24 ADVANTEC ) กับน้ำซุป® ( HACH ) , เลือกการสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันทีวัฒนธรรมสื่อ ภายใน 6 ชั่วโมงของการเก็บตัวอย่าง , เสียง 1 – 50 ml ของตัวอย่าง ( ขึ้นอยู่กับตำแหน่ง ) ) ผ่านตัวกรองหน่วยจับแบคทีเรียบนพื้นผิวตัวกรอง หลังจากที่ premeasured ampoule ของวัฒนธรรมอาหารเพิ่มหน่วยกรอง ตัวกรองที่ถูกบ่มที่ 37 ° C ในชั่วข้ามคืนและจากนั้นระบุสำหรับ E . coli ( ปรากฏเป็นอาณานิคมสีฟ้า ) และโคลิฟอร์มทั้งหมด ( ผลรวมของสีแดงและสีน้ำเงินอาณานิคม )2.3 ความเข้มข้นของไวรัสในตัวอย่างน้ำไวรัสในตัวอย่างน้ำมีความเข้มข้นภายใน 24 ชั่วโมงของคอลเลกชันโดยหนึ่งในสองวิธีการดูดซับ ( โดยใช้ตัวกรองเมมเบรนซึ่งประกอบด้วยประจุไฟฟ้าลบ ขึ้นอยู่กับจำนวนปริมาณ ตัวอย่างน้ำเสียมีความเข้มข้นขึ้นอยู่กับวิธีที่อธิบายไว้ตามนี้ และนี้ 2002a et al . , et al . , 2002b กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สั้น ๆ , 2.5 mol / L ของไอโซโทปคือเพิ่มจำนวนเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้าย 25 มิลลิโมล / ลิตร และตัวอย่างที่ผ่านตัวกรองเมมเบรนซึ่งประกอบด้วยประจุไฟฟ้าลบ ( 45 มม. เส้นผ่าศูนย์กลาง 0.45 μ M ขนาดรูพรุน ; เมอร์คมิลลิพอร์ ) หลังจากการจับของไวรัสและแมกนีเซียมเพื่อกรองกรดล้างได้โดยผ่าน 200 ml 0.5 มิลลิโมล / ลิตรกรดซัลฟิวริก ( pH 3.0 ) ผ่านตัวกรอง ซึ่งละลายและขจัดจำกัดแมกนีเซียมจากเครื่องกรอง สุดท้าย จับไวรัสตัวอย่าง 10 มิลลิลิตร 1.0 มิลลิโมล / ลิตร NaOH ( pH 10.8 ) ในสารละลาย ( eluate ) ถูกค้นพบในหลอดบรรจุ 50 μ L 100 มิลลิโมล / ลิตรกรดซัลฟิวริก ( พีเอช 1.0 ) และ 100 μ L 100 ×ทริส EDTA บัฟเฟอร์ pH 8.0 ) สำหรับการ . การ eluates ได้เข้มข้น ใช้กรอง ym-50 centriprep หน่วย ( เมอร์คมิลลิพอร์ ) เพื่อให้ได้ปริมาณสุดท้ายประมาณ 700 μลิตร ตามขั้นตอนของผู้ผลิต