Molecular Weight DistributionThe mo

Molecular Weight Distribution
The molecular weight distribution for the protein hydrolysates
was determined using sodium dodecyl sulfate (SDS) polyacrylamide
gel electrophoresis [14]. Electrophoresis was performed
using a MiniProtean III (Bio-Rad Laboratories
Chemical, Hercules, CA, USA) vertical electrophoresis device.
The stacking and separating gels were prepared using
4 % and 12 % acrylamide, respectively. We loaded 12 μg
aliquots of the giant squid hydrolysate protein extract onto the
gel, and electrophoresis was performed at 4 °C and 120 volts.
The protein bands were stained with 0.1 % Coomassie brilliant
blue R250 and destained with 10 % acetic acid. The
separated protein bands were identified by comparing the
bands with broad-range molecular weight standards (Sigma
Chemical Company, St. Louis, MO, USA), namely myosin
(205 kDa), β-galactosidase (116 kDa), phosphorylase-b
(97.4 kDa), bovine serum albumin (66 kDa), ovalbumin
(45 kDa), and carbonic anhydrase (29 kDa). The gels were
analyzed using a Bio-Rad Molecular Imager Universal Hood
II – S.N. 76S/02460 Gel Doc XR System.
Amino Acid Composition
The amino acid content was determined through reversedphase
high-performance liquid chromatography (HPLC)
using a Hewlett-Packard 1100 series HPLC system
(Waldbronn, Germany) [15]. Briefly, the samples were hydrolyzed
using 6 M HCl in evacuated, sealed tubes at 150 °C for
6 h. The hydrolysates were diluted with 0.4 M sodium borate
buffer, derivatized with 4-chloro-7-nitro-2,1,3-
benzoxadiazole, and heated to 60 °C for 5 min. The chromatograms
were recorded, and the integrations were calculated
using ChemStation software (Agilent Technologies Inc.,
Palo Alto, CA, USA).
The fluorescence emission was continuously monitored at
330 and 418 nm.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การกระจายน้ำหนักโมเลกุลการแจกแจงน้ำหนักโมเลกุล hydrolysates โปรตีนกำหนดใช้ polyacrylamide โซเดียม dodecyl ซัลเฟต (SDS)อิเจ [14] ทำอิใช้ III MiniProtean (เชื้อสารเคมี เฮอร์คิวลิส CA, USA) อุปกรณ์อิแนวตั้งเจซ้อน และแยกมีเตรียมใช้4% และ 12% อะคริลาไมด์ ตามลำดับ เราโหลด 12 ไมโครกรัมaliquots โปรตีนด้วยปลาหมึกยักษ์ดึงลงการถูกทำเจล และอิที่ 4 ° C และ 120 โวลต์แถบโปรตีนถูกย้อม ด้วย 0.1% Coomassie ใสสีฟ้า R250 และ destained กับกรดอะซิติก 10% การแถบโปรตีนที่แยกได้โดยเปรียบเทียบการแถบ มีน้ำหนักโมเลกุลช่วงกว้างมาตรฐาน (Sigmaบริษัทเคมีภัณฑ์ St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา), คือไมโอซิน(205 kDa), β-galactosidase (116 kDa) phosphorylase-b(97.4 kDa), วัว serum albumin (66 kDa) ovalbumin(45 kDa), และ carbonic anhydrase (29 kDa) เจลถูกวิเคราะห์โดยใช้ฮูดสากลระดับโมเลกุลแบบ Bio RadII – ส่วน 76S/02460 เจระบบ XR Docองค์ประกอบของกรดอะมิโนกรดอะมิโนถูกกำหนดผ่าน reversedphaseประสิทธิภาพของเหลว chromatography (HPLC)ใช้ชุด Hewlett-Packard 1100 ระบบ HPLC(Waldbronn เยอรมนี) [15] สั้น ๆ ตัวอย่างถูก hydrolyzedใช้ 6 M HCl ในหลอดสุญญากาศ ปิดผนึกที่อุณหภูมิ 150 ° C สำหรับ6 ชม Hydrolysates ถูกเจือจาง ด้วย 0.4 M borate โซเดียมบัฟเฟอร์ derivatized 4-chloro-7-ไนโตร-2,1,3 -benzoxadiazole และทำให้ร้อนที่อุณหภูมิ 60 ° C 5 นาที Chromatograms การมีบันทึก และคำนวณการรวมโดยใช้ซอฟต์แวร์ ChemStation (Agilent เทคโนโลยี อิงค์พาโลอัลโต CA สหรัฐอเมริกา)ปล่อยสารเรืองแสงได้รับการดูแลที่418 และ 330 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การกระจายน้ำหนักโมเลกุลการกระจายน้ำหนักโมเลกุลสำหรับโปรตีนไฮโดรไลเซถูกกำหนดโดยใช้โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต(SDS) polyacrylamide ข่าวคราว [14] electrophoresis ได้ดำเนินการโดยใช้MiniProtean iii (Bio-Rad ห้องปฏิบัติการเคมี, ดาว, CA, USA) อุปกรณ์อิเล็กแนวตั้ง. ซ้อนและแยกเจลได้จัดทำขึ้นโดยใช้4% และริลาไมด์ 12% ตามลำดับ เราโหลด 12 ไมโครกรัมaliquots ของสารสกัดจากโปรตีนไฮโดรไลปลาหมึกยักษ์บนเจลและอิเล็กได้รับการดำเนินการใน4 ° C และ 120 โวลต์. วงโปรตีนที่ถูกย้อมด้วยสี 0.1% Coomassie สดใสR250 สีฟ้าและ destained 10% กรดอะซิติก วงดนตรีที่แยกโปรตีนที่ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบวงดนตรีที่มีช่วงกว้างมาตรฐานน้ำหนักโมเลกุล (Sigma เคมี บริษัท เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) คือ myosin (205 กิโลดาลตัน) β-galactosidase (116 กิโลดาลตัน) phosphorylase-B ( 97.4 กิโลดาลตัน) ซีรั่มอัลบูมิวัว (66 กิโลดาลตัน) ovalbumin (45 กิโลดาลตัน) และคาร์บอ anhydrase (29 กิโลดาลตัน) เจลได้รับการวิเคราะห์โดยใช้ Bio-Rad โมเลกุล Imager ยูนิเวอร์แซฮู II - SN 76S / 02460 เจหมอ XR ระบบ. กรดอะมิโนองค์ประกอบเนื้อหากรดอะมิโนที่ได้รับการพิจารณาผ่าน reversedphase ของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงโค (HPLC) โดยใช้ Hewlett-Packard 1,100 ชุด ระบบ HPLC (Waldbronn, เยอรมนี) [15] สั้น ๆ , ตัวอย่างถูกไฮโดรไลซ์โดยใช้6 M HCl อพยพในหลอดปิดผนึกที่ 150 องศาเซลเซียสเป็นเวลา6 ชั่วโมง ไฮโดรไลเซถูกเจือจางด้วย 0.4 M โซเดียมบอเรตบัฟเฟอร์derivatized 4-chloro-7-ไนโตร 2,1,3- benzoxadiazole และความร้อนถึง 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที chromatograms ถูกบันทึกและการผนวกรวมที่ถูกคำนวณโดยใช้ซอฟแวร์ ChemStation (Agilent Technologies, Inc, Palo Alto, CA, USA). การปล่อยแสงที่ได้รับการตรวจสอบอย่างต่อเนื่องที่330 และ 418 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การกระจายน้ำหนักโมเลกุลการกระจายน้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนสำหรับใช้วิเคราะห์สารโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต ( SDS )วิธีเจล [ 14 ] วิธีแสดงใช้ miniprotean III ( ห้องปฏิบัติการราดไบโอเคมี , Hercules , CA , USA ) อุปกรณ์อิเล็กแนวตั้งซ้อนและแยกเตรียมการใช้เจล4 % และ 12 % อะคริลาไมด์ ตามลำดับ เราโหลดμ 12 กรัมเฉยๆของหมึกยักษ์จากโปรตีนที่สกัดจากบนเจล และวิธีดำเนินการโดย 4 ° C และ 120 โวลต์โปรตีนเหล่านี้น่าจะเป็นวงถูกย้อมด้วยสี 0.1% ยอดเยี่ยมr250 สีฟ้าและ destained 10% กรดอะซิติก ที่แยกแถบโปรตีนที่ถูกระบุว่าวงกว้างช่วงน้ำหนักโมเลกุลมาตรฐาน ( ซิกม่าบริษัทเคมี , St . Louis , MO , USA ) คือ ไมโอซิน( 205 ) ) , บีตา - galactosidase ( 116 kDa ) , phosphorylase-b( 97.4 kDa ) , อัลบูมิน ( 66 kDa ) , โอวัลบูมิน( 45 kDa ) และฉะนี้แล ( 29 กิโลดาลตัน ) เจลคือวิเคราะห์การใช้ไบโอ ราดโมเลกุล ) สากล เครื่องดูดควัน2 ) เลือก 76s / 02460 เจลหมอ 9000 ระบบองค์ประกอบของกรดอะมิโนเนื้อหากรดอะมิโนถูกกำหนดผ่าน reversedphaseวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC )ใช้ Hewlett Packard 1100 ชุด 2 ระบบ( waldbronn , เยอรมัน ) [ 15 ] สั้นจำนวนไฮโดรไลซ์6 M HCl ใช้ในการอพยพปิดผนึกท่อ 150 ° C สำหรับ6 ชั่วโมงของถูกเจือจางด้วย 0.4 M โซเดียมบอเรตderivatized กับ 4-chloro-7-nitro-2,1,3 - บัฟเฟอร์benzoxadiazole และความร้อนถึง 60 ° C เป็นเวลา 5 นาทีกลิ่นที่ถูกบันทึกไว้ และการผนวกรวมคำนวณการใช้ซอฟต์แวร์ chemstation ( Agilent Technologies Incพาโล อัลโต แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา )การตรวจสอบอย่างต่อเนื่องที่เรืองแสงคือและ 405 nm .