CONTENTSPageACKNOWLEDGEMENTS iiiABS

CONTENTS
Page
ACKNOWLEDGEMENTS iii
ABSTRACT iv
LIST OF TABLES ix
LIST OF FIGURES xi
LIST OF ABBREVIATIONS xiii
CHAPTER I INTRODUCTION 1
CHAPTER II LITERATURE REVIEW 4
1. Background of jackfruit 4
1.1 The characteristics of jackfruit 4
1.2 Artocarpus heterophyllus var. ‘Paisal Thaksin’ and var. 6
‘Thong Prasert’
2. Plant conservation 7
2.1 In situ conservation 7
2.2 Ex situ conservation 7
3. Cryopreservation 9
3.1 Principle of cryopreservation 9
3.2 Cryopreservation technique for plant conservation 10
3.2.1 Conventional cryopreservation techniques 10
3.2.2 New cryopreservation techniques 13
3.2.2.1 Principle of new cryopreservation techniques 13
3.2.2.2 Vitrification method 13
3.2.2.3 Encapsulation method 16
4. Cryopreservation injury 18
4.1 The effect of solutes (cryoprotectants) 18
4.2 Formation of ice crystals 18
4.3 Exposure to low temperature 19
vii
CONTENTS (Continued)
Page
4.4 Severe dehydration 19
4.5 Formation of free radicals 19
5. Factors of successful cryopreservation 20
5.1 Starting materials 20
5.2 Pretreatment 20
5.3 Cryopreservation procedure 23
5.4 Thawing 23
5.5 Recovery 23
CHAPTER III MATERIALS AND METHODS 24
1. Chemicals and reagents 24
2. Cryopreservation of shoot tips 24
2.1 Plant materials 24
2.2 Sucrose pretreatment 24
2.3 Cryopreservation by desiccation 25
2.4 Cryopreservation by vitrification 25
2.5 Cryopreservation by encapsulation/dehydration 25
2.6 Cryopreservation by encapsulation/vitrification 26
3. Cryopreservation of embryonic axes 31
3.1 Plant materials 31
3.2 Sucrose pretreatment 31
3.3 Cryopreservation by desiccation 31
3.4 Cryopreservation by vitrification 32
3.5 Cryopreservation by encapsulation/dehydration 32
3.6 Cryopreservation by encapsulation/vitrification 32
4. Recovery of cryopreserved materials 32
5. Determination of water content 33
6. Triphenyl tetrazolium chloride (TTC test) 33
7. Experimental design and statistical analyses 33
8. DNA isolation by DNA E-ZI kit 38
viii
CONTENTS (Continued)
Page
9. AFLP reaction 38
9.1 Digestion 38
9.2 Ligation 38
9.3 Pre-amplification (PCR I) 39
9.4 Amplification (PCR II) 39
CHAPTER IV RESULTS 41
1. Characteristics of jackfruit seeds 41
2. Cryopreservation of shoot tips 42
2.1 By desiccation 42
2.2 By vitrification 43
2.3 By encapsulation/dehydration 45
2.4 By encapsulation/vitrification 46
2.5 Effect of method of cryopreservation of shoot tips 48
3. Cryopreservation of embryonic axes 50
2.1 By desiccation 50
2.2 By vitrification 51
2.3 By encapsulation/dehydration 55
2.4 By encapsulation/vitrification 56
2.5 Effect of method of cryopreservation of embryonic axes 59
4. Effect of preculture and loading treatment 60
5. AFLP analysis 61
CHAPTER V DISCUSSION 64
1. Cryopreservation of shoot tips 64
2. Cryopreservation of embryonic axes 66
3. Molecular marker 68
CHAPTER VI CONCLUSIONS 69
REFERENCES 71
APPENDIX 79
BIOGRAPHY 85

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สารบัญ
หน้า
กิตติกรรมประกาศ iii
บทคัดย่อ iv
ของตาราง ix
ของตัวเลขจิ
รายการย่อสิบสาม
บทที่ 1 บทนำ
บทที่สองทบทวนวรรณกรรม 4
1. ความเป็นมาของขนุน 4
1.1 ลักษณะของขนุน 4
1.2 Artocarpus heterophyllus var 'ไพศาลทักษิณและ var 6
'ทองประเสริฐ'
2 การอนุรักษ์พืช 7
2.1 ในการอนุรักษ์แหล่งกำเนิด 7
2.2 Ex แหล่งกำเนิดอนุรักษ์ 7
3. Cryopreservation 9
3.1 หลักการของการเก็บรักษา 9
3.2 Cryopreservation เทคนิคเพื่อการอนุรักษ์พืช 10
3.2.1 เทคนิคการเก็บรักษาแบบธรรมดา 10
3.2.2 ใหม่เทคนิคการเก็บรักษา 13
3.2.2.1 หลักการของการเก็บรักษาใหม่ เทคนิค 13
3.2.2.2 วิธี Vitrification 13
3.2.2.3 วิธี Encapsulation 16
4. Cryopreservation ได้รับบาดเจ็บ 18
4.1 ผลของตัวถูกละลาย (cryoprotectants) 18
4.2 การก่อตัวของผลึกน้ำแข็ง 18
4.3 การสัมผัสกับอุณหภูมิต่ำ 19
vii
สารบัญ (ต่อ)
หน้า
4.4 การขาดน้ำอย่างรุนแรง 19
4.5 การก่อตัวของอนุมูลอิสระ 19
5. ปัจจัยที่ประสบความสำเร็จของการเก็บรักษา 20
5.1 วัสดุเริ่มต้น 20
5.2 ปรับสภาพ 20
5.3 Cryopreservation 23 ขั้นตอนการ
ละลาย 5.4 23
5.5 23 การกู้คืน
บทที่สามวัสดุและวิธีการ 24
1. สารเคมีและสารเคมี 24
2. การแช่แข็งปลายยอด 24
2.1 วัสดุพืช 24
2.2 การปรับสภาพซูโครส 24
2.3 Cryopreservation โดยผึ่งให้แห้ง 25
2.4 Cryopreservation โดยการแช่แข็ง 25
2.5 Cryopreservation โดยการห่อหุ้ม / การคายน้ำ 25
2.6 Cryopreservation โดยการห่อหุ้ม / แช่แข็ง 26
3. การแช่แข็งแกนตัวอ่อน 31
3.1 วัสดุพืช 31
3.2 การปรับสภาพซูโครส 31
3.3 Cryopreservation โดยผึ่งให้แห้ง 31
3.4 Cryopreservation โดยการแช่แข็ง 32
3.5 Cryopreservation โดยการห่อหุ้ม / การคายน้ำ 32
3.6 Cryopreservation โดยการห่อหุ้ม / แช่แข็ง 32
4. การกู้คืนวัสดุแช่แข็ง 32
5. การหาปริมาณน้ำ 33
6. triphenyl tetrazolium คลอไรด์ (TTC ทดสอบ) 33
7. การออกแบบการทดลองและสถิติ วิเคราะห์ 33
8. การแยกดีเอ็นเอดีเอ็นเอโดยชุด E-ZI 38
viii
สารบัญ (ต่อ)
หน้า
9 AFLP ปฏิกิริยา 38
9.1 การย่อยอาหาร 38
Ligation 9.2 38
9.3 การขยาย Pre-(PCR I) 39
9.4 ขยาย (PCR II) 39
บทที่ IV ผล 41
1. ลักษณะของเมล็ดขนุน 41
2. การแช่แข็งปลายยอด 42
2.1 โดยผึ่งให้แห้ง 42
2.2 โดยการแช่แข็ง 43
โดยการห่อหุ้ม 2.3 / 45 การคายน้ำ
โดยการห่อหุ้ม 2.4 / แช่แข็ง 46
2.5 ผลของวิธีการในการเก็บรักษาของเคล็ดลับการถ่ายภาพ 48
3. ตัวอ่อนแช่แข็งแกน 50
2.1 50 โดยผึ่งให้แห้ง
โดยการแช่แข็ง 2.2 51
2.3 โดยการห่อหุ้ม / การคายน้ำ 55
2.4 โดยการห่อหุ้ม / แช่แข็ง 56
2.5 ผลของวิธีการในการเก็บรักษาตัวอ่อนของแกน 59
4. ผลของการ preculture โหลดและการรักษา 60
5. การวิเคราะห์ AFLP 61
บทอภิปราย V 64
1. การแช่แข็งปลายยอด 64
2. การแช่แข็งของตัวอ่อนแกน 66
3. เครื่องหมายโมเลกุล 68
บทสรุปที่หก 69
อ้างอิง 71
ภาคผนวก 79
ชีวประวัติ 85

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เนื้อหา

3
4 หน้ากิตติกรรมประกาศบทคัดย่อสารบัญตาราง 9

รายชื่อร่างของซี
รายชื่ออักษรย่อ XIII
บทที่ 1 บทที่ 2 ทบทวนวรรณกรรมเบื้องต้น
4
1 พื้นหลังของขนุน 4
1.1 ลักษณะของขนุน 4
1.2 ขนุนไพศาลทักษิณ heterophyllus var . ' ' var . 6
' ทองประเสริฐ '
2 การอนุรักษ์พืช
7 2.1 ในการอนุรักษ์ 7
22 . การอนุรักษ์ 7
3 3.1 หลักการการเก็บรักษาเชื้อ 9
9
3.2 เทคนิคเทคนิคการเก็บรักษา 10

3.2.2.1 13 3.2.2 เทคนิคใหม่เนื่องจากหลักการของเทคนิคใหม่ เนื่องจากการ 3.2.2.2 13

3.2.2.3 วิธี 13 วิธี encapsulation 16
4 การอนุรักษ์พืช 10
ดำเนินงานปกติเชื้อ การบาดเจ็บเนื่องจาก 18
41 ผลของสารละลาย ( สารป้องกันโปรตีนเสียสภาพเนื่องจาก ) 18
4.2 การสร้างผลึกน้ำแข็ง 18
4.3 การใช้อุณหภูมิต่ำ 19
7
สารบัญ ( ต่อ ) หน้า

4.4 รุนแรง dehydration 19
4.5 การก่อตัวของอนุมูลอิสระ 19
5 ปัจจัยแห่งความสำเร็จการเก็บรักษาวัตถุดิบเริ่มต้น 20
20
5.1 5.2 5.3 ขั้นตอนการบำบัด 20

5.4 ละลายก่อน 23 23 23

5.5 การกู้คืนบทที่ 3 วัสดุและวิธีการ 24
1 เคมีและสารเคมี 24
2 เคล็ดลับการเก็บรักษา 24
2.1 พืช 24
2.2 ซูโครสโดย 24
2.3 การเก็บรักษาโดยการผึ่งให้แห้ง 25
2.4 ก่อนโดยการ 25
2.5 ก่อน โดยสรุป / dehydration 25
2.6 เชื้อโดยการ / 8 26
3 ยิง เนื่องจากแกนของตัวอ่อน 31
33.2 วัสดุ 31

31 โดยการบำบัด 3.3 การเก็บรักษาโดยการผึ่งให้แห้งก่อน โดยการ 31
3
3.5 การเก็บรักษาโดยการ 32 / 32 โดย encapsulation dehydration 3.6 ก่อน
8
4 / 32 1 โรงงาน การกู้คืนตรวจสอบคุณภาพวัสดุ 32
5 การหาปริมาณน้ำ 33
6 ไตรฟีนิล tetrazolium คลอไรด์ ( ทดสอบ TTC ) 33
7การออกแบบการทดลองและการวิเคราะห์สถิติ 33
8 การสกัดดีเอ็นเอจากดีเอ็นเอ e-zi ชุด 38
8


สารบัญ ( ต่อ ) หน้า 9 ปฏิกิริยาการย่อย 38

พี 38 9.1 9.2 9.3 Ligation 38
ก่อนขยาย ( PCR ) 39
9.4 แบบ PCR ( 2 ) 39 41

บทที่ 4 ผล 1 ลักษณะของเมล็ด 41
2 ลูกขนุน การเก็บรักษาโดยการยิงเคล็ดลับ 42
2.1 2.2 โดยการผึ่งให้แห้ง 42 43

23 โดย encapsulation dehydration 45
/ 2.4 โดย encapsulation / 8 46
2.5 ผลของวิธีการในการเก็บรักษาเคล็ดลับ 48
3 ยิง การเก็บรักษาของแกน 50

ส่วน 2.1 โดย 50 2.2 โดยการ 51
2.3 โดย encapsulation dehydration 55
/ 2.4 โดยสรุป / การ 56
2.5 ผลของวิธีการของการเก็บรักษาแบบแกน 59
4ผลของพันธุ์และการรักษา 60
5 บทที่ 5 การวิเคราะห์ 61

1 การสนทนา 64 เอเอฟ . การเก็บรักษายิงเคล็ดลับ 64
2 การเก็บรักษาของแกน 66
3 เครื่องหมายโมเลกุล 68
บทที่ 6 บทสรุป 69 71

อ้างอิงภาคผนวก 79
ชีวประวัติ 85