Neuronal induction of mouse mesench

Neuronal induction of mouse mesenchymal stem cells (mouse MSCs) using growth factors.
Before seeding cells, plates were coated overnight with a 10 μg/ml poly-lysine (Sigma) solution in steriled distilled water (see appendix B). After that Neuro2a cells and mouse MSCs were isolated and cultured as previously described. Cells were recovered from subconfluent culture by trypsinization (trypsine/EDTA solution from GIBCO), counted and plate to a 3,000 cells/cm2 density on poly-lysine (Sigma) coated plates. Cells were subsequently incubated with Neurobasal medium (GIBCO) containing B27 supplement, 2 mM L-glutamine, 1% penicillin/streptomycin, 20 ng/ml rhFGF-basic, 20 ng/ml EGF. Medium was replaced every 3 to 4 days for 7 days. Then 0.5 μM all-trans-retinoic acid (RA; Sigma) and 20 ng/ml beta-nerve growth factor (β-NGF; R&D Systems) were added to the medium and cells were cultured for 5 days, with medium changes every 2 to 3 days.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เหนี่ยวนำเส้นประสาทของเซลล์ต้นกำเนิด mesenchymal เมาส์ (เมาส์ MSCs) โดยใช้ปัจจัยการเจริญเติบโต.
ก่อนที่เซลล์เพาะแผ่นเคลือบค้างคืนกับ 10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรโพลีไลซีน (Sigma) สารละลายในน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ (ดูภาคผนวก B) หลังจากนั้นเซลล์ Neuro2a และ MSCs เมาส์ถูกแยกและเพาะเลี้ยงตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ เซลล์ที่ถูกกู้คืนจากการเพาะเลี้ยง subconfluent โดย trypsinization (trypsine / แก้ปัญหา EDTA จาก Gibco) นับและแผ่นจะมีความหนาแน่น 3,000 เซลล์ / cm2 ในโพลีไลซีน (Sigma) แผ่นเคลือบ เซลล์ที่ถูกบ่มต่อมาที่มีขนาดกลาง Neurobasal (Gibco) ที่มีอาหารเสริม B27, 2 มิลลิ L-glutamine, ยาปฏิชีวนะ% 1 / streptomycin, 20 ng / มล rhFGF ขั้นพื้นฐาน, 20 ng / มล EGF กลางถูกแทนที่ทุก 3-4 วันเป็นเวลา 7 วัน แล้ว 0.5 ไมครอนกรดทุกทรานส์ retinoic (RA; Sigma) และ 20 ng / มลปัจจัยการเจริญเติบโตเบต้าประสาท (β-NGF; R & D Systems) มีการเพิ่มขนาดกลางและเซลล์เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 5 วันมีการเปลี่ยนแปลงขนาดกลางทุก 2 ถึง 3 วัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเหนี่ยวนำการเมาส์มีเซนไคมอลสเต็มเซลล์ ( MSCS เมาส์ ) โดยใช้ปัจจัยการเจริญเติบโต .
ก่อนเพาะเซลล์ แผ่นเคลือบอยู่ค้างคืนกับ 10 μ g / ml โพลีไลซีน ( Sigma ) โซลูชั่นในการน้ำกลั่น ( ดูภาคผนวก B ) หลังจากนั้นเซลล์ neuro2a งานเมาส์และแยกและเพาะเลี้ยงตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้เซลล์ที่พบจากวัฒนธรรม subconfluent โดย trypsinization ( โซลูชั่น / EDTA trypsine จาก gibco ) , นับจานเพื่อ 3000 เซลล์ / cm2 ความหนาแน่นบนโพลี ไลซีน ( Sigma ) แผ่นเคลือบ เซลล์ จัดการแยก neurobasal ขนาดกลาง ( gibco ) ที่มี b27 เสริม 2 มม. , Glutamine , 1% เพนนิซิลลิน / ยาสเตรปโตมัยซิน 20 ng / ml rhfgf พื้นฐาน 20 ng / ml ( 1 ) .) เปลี่ยนทุกๆ 3 วัน เป็นเวลา 7 วัน แล้วμ 0.5 M ทั้งหมดทรานส์ retinoic acid ( รา ; Sigma ) และ 20 ng / ml เบต้าประสาทปัจจัยการเจริญเติบโต ( บีตา - ngf ; R & D ระบบ ) ถูกเพิ่มไปยังเซลล์ปานกลาง และเพาะเลี้ยง 5 วันกับสื่อการเปลี่ยนแปลงทุก 2 ถึง 3 วัน