ResultsDevelopment and optimisation

Results
Development and optimisation of an automated DNA extraction procedure
Initially, we isolated DNA by using the Maxwell 16 LEV Blood DNA Kit (AS1290) according to the manufacturer’s instructions, which resulted in a DNA yield below 10 ng lL-1 and an insufficient DNA purity. Therefore, we tried the same extraction protocol with maize seed and also with a different kit (Maxwell 16 Tissue LEV Total RNA puritifaction Kit, AS1220, Promega, Mannheim, Germany). The obtained DNA yield was slightly higher (AS1290[AS1220), but DNA purity was still insufficient. As CTAB buffer-based DNA extraction is most common and results in high yields, we wanted to combine a CTAB buffer extraction with the automated DNA extraction. After incubation of ground maize seed samples in CTAB buffer,

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผล
การพัฒนาและการเพิ่มประสิทธิภาพของขั้นตอนการสกัดดีเอ็นเอโดยอัตโนมัติ
ในขั้นต้นเราแยกดีเอ็นเอโดยใช้แมกซ์เวล 16 LEV เลือดดีเอ็นเอ Kit (AS1290) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตซึ่งส่งผลให้อัตราผลตอบแทนดีเอ็นเอต่ำกว่า 10 นาโนกรัม LL-1 และสาย insuf บริสุทธิ์ดีเอ็นเอเพียงพอ . ดังนั้นเราจึงพยายามสกัดโปรโตคอลเดียวกันกับเมล็ดพันธุ์ข้าวโพดเลี้ยงสัตว์และยังมีชุดที่แตกต่างกัน (แมกซ์เวล 16 เนื้อเยื่อ LEV รวม RNA puritifaction ชุด AS1220, Promega, ไฮม์, เยอรมนี) ผลผลิตดีเอ็นเอที่ได้รับเพิ่มขึ้นเล็กน้อย (AS1290 [AS1220) แต่ความบริสุทธิ์ดีเอ็นเอยังคงเพียงพอไฟ insuf ขณะที่การสกัดดีเอ็นเอบัฟเฟอร์ตาม CTAB เป็นที่พบมากที่สุดและส่งผลให้อัตราผลตอบแทนสูงเราต้องการที่จะรวมการสกัดบัฟเฟอร์ CTAB กับการสกัดดีเอ็นเออัตโนมัติ หลังจากการบ่มจากพื้นดินตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ในบัฟเฟอร์ CTAB,

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลการพัฒนาและการเพิ่มประสิทธิภาพของการสกัดดีเอ็นเออัตโนมัติกระบวนการ
ตอนแรกเราแยกดีเอ็นเอโดยใช้เวล 16 เลฟเลือดดีเอ็นเอ Kit ( as1290 ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ซึ่งทำให้ผลผลิตดีเอ็นเอด้านล่าง 10 ng ll-1 และ insuf จึง cient ดีเอ็นเอบริสุทธิ์ ดังนั้นเราพยายามขั้นตอนการสกัดเดียวกันกับเมล็ด ข้าวโพด และยังมีชุดต่าง ๆ ( เวล 16 เนื้อเยื่อเลฟทั้งหมด RNA puritifaction ชุด as1220 promega , Mannheim , เยอรมัน ) การวิเคราะห์ดีเอ็นเอผลผลิตได้สูงกว่าเล็กน้อย ( as1290 [ as1220 ) แต่ความบริสุทธิ์ดีเอ็นเอยัง insuf จึง cient . เป็นบัฟเฟอร์ ctab การสกัดดีเอ็นเอจากเป็นที่พบมากที่สุดและผลในอัตราผลตอบแทนสูงเราต้องการที่จะรวมบัฟเฟอร์แบบอัตโนมัติ ctab การสกัดการสกัดดีเอ็นเอ . หลังจากบ่มดินข้าวโพดเมล็ด ctab

ตัวอย่างในบัฟเฟอร์