Abstract
Background: Lantibiotics are small microbial peptide antibiotics that are characterized by the presence of the thioether
amino acids lanthionine and methyllanthionine. Lantibiotics possess structural genes which encode inactive prepeptides.
During maturation, the prepeptide undergoes posttranslational modifications including the introduction of rare amino acids
as lanthionine and methyllanthione as well as the proteolytic removal of the leader. The structural gene (lanA) as well as the
other genes which are involved in lantibiotic modification (lanM, lanB, lanC, lanP), regulation (lanR, lanK), export (lanT(P))
and immunity (lanEFG) are organized in biosynthetic gene clusters.
Methodology/Principal Findings: Sequence comparisons in the NCBI database showed that Bacillus licheniformis DSM 13
harbours a putative lantibiotic gene cluster which comprises two structural genes (licA1, licA2) and two modification
enzymes (licM1, licM2) in addition to 10 ORFs that show sequence similarities to proteins involved in lantibiotic production.
A heat labile antimicrobial activity was detected in the culture supernatant and a heat stabile activity was present in the
isopropanol cell wash extract of this strain. In agar well diffusion assays both fractions exhibited slightly different activity
spectra against Gram-positive bacteria. In order to demonstrate the connection between the lantibiotic gene cluster and
one of the antibacterial activities, two Bacillus licheniformis DSM 13 mutant strains harbouring insertions in the structural
genes of the modification enzymes licM1 and licM2 were constructed. These strains were characterized by a loss of activity
in the isopropanol extract and substractive MALDI-TOF predicted masses of 3020.6 Da and 3250.6 Da for the active
peptides.
Conclusions/Significance: In conclusion, B. licheniformis DSM 13 produces an antimicrobial substance that represents the
two-peptide lantibiotic lichenicidin and that shows activity against a wide range of Gram-positive bacteria including
methicillin resistant Staphylococcus aureus strains.
บทคัดย่อพื้นหลัง: Lantibiotics มีราคายาปฏิชีวนะเพปไทด์จุลินทรีย์ขนาดเล็กที่มีลักษณะของการ thioetherกรดอะมิโน lanthionine และ methyllanthionine Lantibiotics มียีนโครงสร้างที่เข้า prepeptides ไม่ได้ใช้งานระหว่างพ่อแม่ prepeptide ที่ผ่าน posttranslational แก้ไขรวมทั้งแนะนำกรดอะมิโนที่หายากเป็น lanthionine และ methyllanthione ตลอดจนการกำจัด proteolytic ของผู้นำ ยีนโครงสร้าง (ล้าน) รวมทั้งยีนอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องในการส่งออก (lanT(P)) ระเบียบ (lanR, lanK) แก้ไข lantibiotic (lanM, lanB, lanC, lanP)และภูมิคุ้มกัน (lanEFG) มีการจัดระเบียบในกลุ่มยีน biosyntheticค้นพบวิธีการ/หลัก: licheniformis คัดที่ DSM 13 แสดงให้เห็นลำดับการเปรียบเทียบในฐานข้อมูล NCBIharbours คลัสเตอร์ยีน putative lantibiotic ซึ่งประกอบไปด้วยสองยีนโครงสร้าง (licA1, licA2) และปรับเปลี่ยนสองเอนไซม์ (licM1, licM2) นอกจาก ORFs 10 ที่แสดงลำดับความคล้ายคลึงกับโปรตีนที่เกี่ยวข้องในการผลิต lantibioticพบกับกิจกรรมจุลินทรีย์ labile ร้อนใน supernatant และกิจกรรมอคือความร้อนที่มีในการล้างเซลล์ isopropanol ดึงข้อมูลนี้ต้องใช้ ใน agar แพร่ดี assays ทั้งเศษส่วนจัดแสดงกิจกรรมที่แตกต่างกันเล็กน้อยแรมสเป็คตรากับแบคทีเรีย เพื่อแสดงให้เห็นถึงการเชื่อมต่อระหว่างคลัสเตอร์ยีน lantibiotic และหนึ่งในกิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรีย สองคัด licheniformis DSM 13 กลายพันธุ์สายพันธุ์ harbouring แทรกในโครงสร้างยีนเปลี่ยนแปลงเอนไซม์ licM1 และ licM2 ถูกสร้างขึ้น สายพันธุ์เหล่านี้มีลักษณะการขาดทุนของกิจกรรมในสารสกัด isopropanol และ substractive MALDI TOF คาดว่า ฝูงของดา 3020.6 ดา 3250.6 สำหรับการใช้งานเปปไทด์บทสรุป/สำคัญ: เบียดเบียน licheniformis เกิด DSM 13 ผลิตเป็นสารยับยั้งจุลินทรีย์ที่แสดงถึงการlichenicidin lantibiotic 2 เพปไทด์และแสดงกิจกรรมตามความหลากหลายของแบคทีเรียรวมทั้งสายพันธุ์ทนทานต่อ methicillin Staphylococcus หมอเทศข้างลาย
การแปล กรุณารอสักครู่..
บทคัดย่อ
พื้นหลัง: Lantibiotics เป็นยาปฏิชีวนะจุลินทรีย์เปปไทด์ขนาดเล็กที่มีความโดดเด่นด้วยการปรากฏตัวของ thioether
กรดอะมิโนและ lanthionine methyllanthionine Lantibiotics มียีนโครงสร้างที่เข้ารหัส prepeptides ใช้งาน.
ในช่วงการเจริญเติบโต, prepeptide ผ่านการปรับเปลี่ยน posttranslational รวมถึงการแนะนำของกรดอะมิโนที่หายาก
และเป็น lanthionine methyllanthione เช่นเดียวกับการกำจัดโปรตีนของผู้นำ ยีนโครงสร้าง (LANA) เช่นเดียวกับ
ยีนอื่น ๆ ที่มีส่วนร่วมในการปรับเปลี่ยน lantibiotic (lanM, lanB, Lanc, lanP) ระเบียบ (lanR, Länk) การส่งออก (lant (P))
และภูมิคุ้มกัน (lanEFG) ถูกจัดอยู่ใน กลุ่มยีนสังเคราะห์.
วิธีการ / ผลการวิจัยเงินต้น: การเปรียบเทียบลำดับในฐานข้อมูล NCBI แสดงให้เห็นว่า Bacillus licheniformis DSM 13
ท่าเรือคลัสเตอร์ยีน lantibiotic สมมุติซึ่งประกอบด้วยสองยีนโครงสร้าง (licA1, licA2) และสองการปรับเปลี่ยน
เอนไซม์ (licM1, licM2) นอกเหนือไปจาก 10 ORFs ที่แสดงให้เห็นความคล้ายคลึงกันลำดับโปรตีนมีส่วนร่วมในการผลิต lantibiotic.
ความร้อนฤทธิ์ต้านจุลชีพ labile ถูกตรวจพบในสารละลายวัฒนธรรมและกิจกรรมความร้อนค่อนข้างทรงตัวในปัจจุบันคือ
สารสกัดจากเซลล์ isopropanol ล้างของสายพันธุ์นี้ ในการตรวจการแพร่กระจายได้ดีวุ้นเศษส่วนทั้งการจัดแสดงกิจกรรมที่แตกต่างกันเล็กน้อย
สเปกตรัมต่อต้านแบคทีเรียแกรมบวก เพื่อที่จะแสดงให้เห็นถึงความเชื่อมโยงระหว่างกลุ่มยีน lantibiotic และ
หนึ่งในกิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรีย, Bacillus licheniformis สอง DSM 13 สายพันธุ์ที่กลายพันธุ์เยิ้มแทรกในโครงสร้าง
ยีนของเอนไซม์ดัดแปลง licM1 และ licM2 ถูกสร้างขึ้น สายพันธุ์เหล่านี้เป็นที่โดดเด่นด้วยการสูญเสียของกิจกรรม
ในสารสกัดจาก isopropanol และ substractive MALDI-TOF คาดการณ์ฝูงของ 3,020.6 3,250.6 ดาและดาสำหรับการใช้งาน
เปปไทด์.
สรุปผลการวิจัย / สำคัญ: โดยสรุป B. licheniformis DSM 13 ผลิตสารต้านจุลชีพที่แสดงถึง
สองเปปไทด์ lantibiotic lichenicidin และแสดงให้เห็นว่ากิจกรรมกับความหลากหลายของแบคทีเรียแกรมบวกรวมทั้ง
สายพันธุ์เชื้อ Staphylococcus aureus methicillin ทน
การแปล กรุณารอสักครู่..
พื้นหลังนามธรรม
: lantibiotics เล็กยาปฏิชีวนะเปปไทด์จุลินทรีย์ที่มีลักษณะ โดยการแสดงตนของไทโออีเทอร์
กรดอะมิโนแลนไทโ ีน และ methyllanthionine . lantibiotics มีโครงสร้างยีนที่เข้ารหัสที่ prepeptides .
ในระหว่างการเจริญเติบโต การ prepeptide ทนี้ปรับเปลี่ยน posttranslational รวมทั้งแนะนำ หายาก
กรดอะมิโนเป็นแลนไทโ ีน และ methyllanthione เช่นเดียวกับการกำจัดโปรตีนของผู้นำ ยีนโครงสร้าง ( ลานนา ) เช่นเดียวกับ
ยีนอื่น ๆที่เกี่ยวข้องในการปรับเปลี่ยน lantibiotic ( lanm lanb lanc , , , ( lanr lanp ) , ระเบียบ , ส่งออก ( เล้ง ) เลนท์ ( P )
และภูมิคุ้มกัน ( lanefg ) จัดอยู่ในกลุ่มยีนของการค้นพบวิธีการหลัก :
.การเปรียบเทียบลำดับใน ncbi ฐานข้อมูลพบว่า Bacillus licheniformis DSM 13
ท่าเรือเป็น lantibiotic การแสดงออกยีนกลุ่มซึ่งประกอบด้วยสองโครงสร้างยีน ( lica1 lica2 , ) และสองการปรับเปลี่ยน
เอนไซม์ ( licm1 licm2 , ) นอกเหนือไปจาก 10 orfs ที่แสดงลำดับความคล้ายคลึงกันของโปรตีนที่เกี่ยวข้องในการผลิต lantibiotic .
มีกิจกรรมการยับยั้งความร้อนที่ตรวจพบในวัฒนธรรมและกิจกรรมที่นำความร้อนมั่นคงอยู่ในเซลล์ของโพรพานอล
ล้างสกัดสายพันธุ์นี้ ในวุ้นก็ใช้เศษส่วน มีกิจกรรมทั้งกระจายสเปกตรัม
แตกต่างกันเล็กน้อยกับแบคทีเรียกรัมบวก เพื่อแสดงถึงการเชื่อมต่อระหว่างกลุ่มยีนและ
lantibioticหนึ่งในกิจกรรมของแบคทีเรีย Bacillus licheniformis สองสายพันธุ์ใหม่กับ DSM 13 กลายพันธุ์ในยีนโครงสร้างของเอนไซม์และการ licm1
licm2 ได้ถูกสร้างขึ้น สายพันธุ์เหล่านี้มีลักษณะการสูญเสียจากกิจกรรม
ในไอโซโพรพานอลและสารสกัดจาก substractive maldi-tof ทำนายมวลของ 3020.6 และดาดา 3250.6 สำหรับเปปไทด์ปราดเปรียว
.
สรุป / โดย :สรุป B . licheniformis DSM 13 ผลิตสารต้านจุลชีพที่เป็น
2 เปปไทด์ lantibiotic lichenicidin และแสดงกิจกรรมต่อต้านหลากหลายของแบคทีเรียแกรมบวกรวมทั้ง
เมทิซิลลินทน Staphylococcus aureus สายพันธุ์
การแปล กรุณารอสักครู่..