The precipitated enzyme solution wa

The precipitated enzyme solution was loaded at a flow rate of 0.2 mL min-1 to (2x7 cm), pre-equilibrated with 1 mM Tris-HCl buffer of pH 8.0 and the eluted fractions (1 mL each) were collected. After loading the sample, column was washed with the same buffer until the reading of the eluted buffer at 280 nm was zero. The bound proteins were then eluted with a concentration gradient of sodium chloride (0-0.5 M NaCl) in the same buffer and fractions of 2 mL each were collected at a flow rate of 0.2 mL min-1. Protein concentration of each fraction was determined by measuring the absorbance at nm and each fractions were assayed for protease activity. Fractions with high specific activity were pooled and then concentrated by lyophilization

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การแก้ปัญหาการตกตะกอนเอนไซม์ถูกโหลดในอัตราไหลต่ำสุด 0.2 mL-1 (2 x 7 ซม.), equilibrated ก่อน ด้วยบัฟเฟอร์ pH 8.0 mM 1 ทริสเรทติ้ง HCl และมีการเก็บรวบรวมเศษ eluted (1 mL แต่ละ) หลังจากโหลดตัวอย่าง คอลัมน์ถูกล้าง ด้วยบัฟเฟอร์เดียวจนอ่านบัฟเฟอร์ eluted ที่ 280 nm เป็นศูนย์ โปรตีนที่ถูกผูกไว้ได้แล้ว eluted ด้วยการไล่ระดับความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ (0-0.5 M NaCl) ในบัฟเฟอร์และเศษของ 2 mL เหมือนถูกรวบรวมไว้ที่อัตราการไหลต่ำสุด 0.2 mL-1 กำหนดความเข้มข้นของโปรตีนของทุกฝ่าย โดยการวัด absorbance ที่ nm และแต่ละส่วนถูก assayed สำหรับกิจกรรมรติเอส เศษส่วนที่ มีกิจกรรมสูงทางถูกพู และเข้มข้น โดย lyophilization แล้ว

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การแก้ปัญหาการทำงานของเอนไซม์ตกตะกอนถูกโหลดที่อัตราการไหล 0.2 มิลลิลิตรนาที 1 (2x7 เซนติเมตร) ก่อน equilibrated 1 มิลลิบัฟเฟอร์ Tris-HCl ของค่า pH 8.0 และเศษส่วนชะ (1 มิลลิลิตรแต่ละ) ถูกเก็บรวบรวม หลังจากโหลดตัวอย่างคอลัมน์ถูกล้างด้วยบัฟเฟอร์แบบเดิมจนกว่าการอ่านของบัฟเฟอร์ชะที่ 280 นาโนเมตรเป็นศูนย์ โปรตีนที่ถูกผูกถูกชะแล้วกับการไล่ระดับความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ (0-0.5 M NaCl) ในบัฟเฟอร์เดียวกันและเศษส่วนของ 2 มิลลิลิตรแต่ละถูกเก็บที่อัตราการไหล 0.2 มิลลิลิตรต่อนาที-1 ความเข้มข้นของโปรตีนในแต่ละส่วนได้รับการกำหนดโดยการวัดการดูดกลืนแสงที่นาโนเมตรและแต่ละส่วนถูก assayed สำหรับกิจกรรมโปรติเอส เศษส่วนด้วยกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงสูงที่ได้รวบรวมและเข้มข้นโดย lyophilization แล้​​ว

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตกตะกอนสารละลายเอนไซม์เป็นโหลดที่อัตราการไหล 2 มล. min-1 ( 2x7 ซม. ) ก่อน equilibrated 1 มม. หรือ HCl บัฟเฟอร์ของ pH 8.0 และตัวอย่างเศษส่วน ( 1 มิลลิลิตรละ ) เก็บรวบรวม หลังจากโหลดตัวอย่างคอลัมน์ล้างบัฟเฟอร์เดียวกันจนกว่าจะอ่านตัวอย่างของบัฟเฟอร์ที่ 280 nm เป็นศูนย์การจำกัดโปรตีน แล้วไล่ระดับ ตัวอย่างที่มีความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ ( ทั้ง M NaCl ) ในบัฟเฟอร์เดียวกันและเศษส่วน 2 ml แต่ละถูกเก็บที่อัตราการไหล 2 มล. min-1 . ความเข้มข้นของโปรตีนแต่ละส่วนถูกกำหนดโดยการวัดการดูดกลืนแสงในแต่ละส่วนถูก assayed nm และเอนไซม์โปรติเอสเศษส่วนกับกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงมากเป็นพู และเข้มข้น โดยเอนไซม์