All chemicals and reagents used were either analytical-reagent or HPLC grade. The water was treated in a Milli-Q water purification system (Millipore, Bedford, MA, USA) before use. Chemicals and reagents used to simulate the GI digestion were: potassium chloride (KCl), potassium thiocyanate (KSCN), monosodium phosphate (NaH2PO4), sodium sulphate (Na2SO4), sodium chloride (NaCl), sodium bicarbonate (NaHCO3), urea, α-amylase, hydrochloric acid (HCl), pepsin, pancreatin, bile salts (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA). Chromatographic resins Sephadex G-50, G-25 and G-10, DPPH (1,1-diphenyl-2-picrilhydrazyl), 2,4,6-tris-2,4,6-tripiridyl-S-triazine (TPTZ), iron (III) chloride (dry), 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid (Trolox), purchased from Sigma Aldrich (Sigma Chemical Co.). All organic solvents were purchased from Carlo Erba (Milano, Italy). 2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA, Sigma Chemical Co.) was dissolved in dimethylsulphoxide (DMSO) to obtain 100 mM stock solution (aliquoted and stored at −20 °C). Work solutions of DCFH-DA were produced by diluting aliquots in 1% phosphate buffer saline (PBS, 10 mM, pH 7.4) at different concentrations.
ทั้งหมดเคมีภัณฑ์และ reagents ใช้ได้วิเคราะห์รีเอเจนต์หรือเกรด HPLC น้ำได้รับการรักษาใน Q น้ำฟอกระบบ (มาก กลาสโกว์ MA สหรัฐอเมริกา) ก่อนใช้ สารเคมีและใช้ในการจำลองย่อยอาหาร GI reagents: โพแทสเซียมคลอไรด์ (KCl) โพแทสเซียม thiocyanate (KSCN), ผงฟอสเฟต (NaH2PO4), โซเดียมซัลเฟต (Na2SO4), โซเดียมคลอไรด์ (NaCl), โซเดียมไบคาร์บอเนต (NaHCO3), ยูเรีย ด้วยกองทัพ-amylase กรดไฮโดรคลอริก (HCl), เพพซิน pancreatin เกลือน้ำดี (ซิกเคมี Co., St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) เรซิ่น chromatographic Sephadex G-50, G 25 และ G-10, DPPH (1.1 ฟีนิลได-2-picrilhydrazyl), 2,4,6-tris-2,4,6-tripiridyl-S-triazine (TPTZ) เหล็ก (III) คลอไรด์ (แห้ง), 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic กรด (Trolox), ซื้อจาก Aldrich ซิก (ซิกเคมี จำกัด) หรือสารทำละลายอินทรีย์ทั้งหมดถูกซื้อจาก Carlo Erba (มิลาโน อิตาลี) 2′, 7′-Dichlorofluorescin diacetate (DCFH DA ซิกเคมี จำกัด) ได้ละลายใน dimethylsulphoxide (DMSO) รับเพิ่มหุ้น 100 มม. (aliquoted และเก็บไว้ที่ −20 ° C) โซลูชั่นการทำงานของดา DCFH ผลิต โดย diluting aliquots ใน 1% ฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS, 10 mM, pH 7.4) ที่ความเข้มข้นแตกต่างกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
สารเคมีและสารเคมีทั้งหมดที่ใช้ทั้งการวิเคราะห์-น้ำยาหรือเกรด HPLC น้ำที่ได้รับการรักษาใน Milli-Q ระบบน้ำบริสุทธิ์ (คฟอร์ด, MA, USA) ก่อนการใช้งาน สารเคมีและสารเคมีที่ใช้ในการจำลองการย่อยอาหาร GI อยู่: โพแทสเซียมคลอไรด์ (KCl) thiocyanate โพแทสเซียม (KSCN) ฟอสเฟตโมโนโซเดียม (NaH2PO4) โซเดียมซัลเฟต (Na2SO4) โซเดียมคลอไรด์ (NaCl), โซเดียมไบคาร์บอเนต (NaHCO3), ยูเรีย, α -amylase, กรดไฮโดรคลอ (HCl) น้ำย่อย, Pancreatin, เกลือน้ำดี (ซิกม่า Chemical Co. , เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) เรซินสาร Sephadex G-50, G-25 และ G-10 DPPH (1,1-diphenyl-2-picrilhydrazyl) 2,4,6-tris-2,4,6-tripiridyl-S-triazine (TPTZ) เหล็ก (III) คลอไรด์ (แห้ง), กรดไฮดรอกซี 6-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-คาร์บอกซิ (Trolox) ซื้อมาจากซิกม่าดิช (Sigma เคมี จำกัด ) ทุกตัวทำละลายอินทรีย์ที่ซื้อมาจากคาร์โลเออร์บา (Milano, อิตาลี) 2 ', 7'-Dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA ซิกเคมี จำกัด ) ถูกละลายใน dimethylsulphoxide (DMSO) เพื่อให้ได้ 100 มิลลิแก้ปัญหาหุ้น (aliquoted และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 ° C) การแก้ปัญหาการทำงานของ DCFH-DA ถูกผลิตโดยเจือจางใน aliquots 1% เกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอส 10 มิลลิค่า pH 7.4) ที่ระดับความเข้มข้นที่แตกต่างกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
ทั้งหมดเคมีภัณฑ์และสารเคมีที่ใช้เป็นสารเคมีเกรดวิเคราะห์ หรือ 2 . น้ำได้รับการรักษาใน milli-q น้ำบริสุทธิ์ระบบ ( มิลลิ , ฟอร์ด , MA , USA ) ก่อนใช้ เคมีและสารเคมีที่ใช้ในการจำลองกีการย่อยอาหาร : โพแทสเซียมคลอไรด์ ( KCL ) , โปแตสเซียมไธโอไซยาเนต ( เชียล ) , โมโนโซเดียมฟอสเฟต ( nah2po4 ) โซเดียมซัลเฟต ( na2so4 ) โซเดียมคลอไรด์ ( NaCl )โซเดียมไบคาร์บอเนต ( NaHCO3 ) , ยูเรีย , แอลฟาอะไมเลส , กรดไฮโดรคลอริก ( HCl ) เพพซิน Pancreatin เกลือน้ำดี ( Sigma Chemical Co . , St . Louis , MO , USA ) เมื่อเรซิ่น Sephadex G-50 g-25 g-10 dpph , และ , ( 1,1-diphenyl-2-picrilhydrazyl ) 2,4,6-tris-2,4,6-tripiridyl-s-triazine ( tptz ) , เหล็ก ( III ) คลอไรด์ ( แห้ง ) , 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic แอซิด ( สาร )ซื้อจากซิกม่า Aldrich ( Sigma Chemical Co . ) ตัวทำละลายอินทรีย์ทั้งหมดซื้อมาจากคาร์โลมา ( มิลาน , อิตาลี ) 2 ดูแล 7 - dichlorofluorescin นั้นได ซิเตท ( dcfh-da , Sigma Chemical Co . ) ถูกละลายใน dimethylsulphoxide ( DMSO ) เพื่อให้ได้ 100 มิลลิเมตรหุ้นโซลูชั่น ( aliquoted และเก็บรักษาที่ − 20 ° C ) งานแก้ไข dcfh-da ถูกผลิตโดยเจือจาง 1% เฉยๆในฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ ( พีบีเอส10 มม. , pH 7.4 ) ที่ความเข้มข้นต่างกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..