Determination of thiol contentThe d

Determination of thiol content
The degree of thiolation was determined using Ellman’s
reagent reaction, as described elsewhere (Marschutz Michaela
& Bernkop-Schnurch, 2002). The 5,50-dithiobis(2-nitrobenzoic
acid) (DTNB) molecule reacts with the thiol chemical group to
release a 2-nitro-5-thiobenzoate (TNB) ion, which further
ionizes to TNB2. The latter ion has a yellow color that can be
detected by visible light at 412 nm.
In brief, 5 mg of modified polymer were hydrated in 1.75 ml
of DDW. Then, 500 ml of 0.5 M phosphate buffer pH 8.0 and 500 ml
0.03% (w/w) Ellman’s reagent dissolved in the same buffer was
added to the sample and the resulting solution was incubated
for 2 h. Finally, the absorbance at 412 nm was measured. The
concentration of the thiol groups was determined using a
standard calibration curve obtained by measuring a series of
solutions containing increasing amounts of L-cysteine.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดเนื้อหา thiolกำหนดระดับของ thiolation ใช้ของ Ellmanรีเอเจนต์ปฏิกิริยา ดังที่อื่น (Marschutz Michaelaและ Bernkop-Schnurch, 2002) 5,50-dithiobis(2-nitrobenzoicกรด) (DTNB) โมเลกุลทำปฏิกิริยากับเคมีกลุ่ม thiol เพื่อปล่อยไอออนเป็น 2-ไนโตร-5-thiobenzoate (TNB) ซึ่งเพิ่มเติมionizes 2 TNB ไอออนหลังมีสีเหลืองที่สามารถตรวจจับแสงที่มองเห็นที่ 412 nmสังเขป 5 มิลลิกรัมของพอลิเมอร์ที่ถูกปรับเปลี่ยนถูก hydrated ในมล 1.75ของ DDW 0.5 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 8.0 และ 500 ml แล้ว 500 mlรีเอเจนต์ Ellman 0.03% (w/w) ละลายในบัฟเฟอร์ที่เดียวกันได้เพิ่มตัวอย่าง และการแก้ปัญหาได้ถูก incubatedสำหรับ 2 h สุดท้าย absorbance ที่ 412 nm ที่วัด ที่กำหนดความเข้มข้นของกลุ่ม thiol ใช้เป็นเส้นโค้งการปรับเทียบมาตรฐานได้ โดยการวัดชุดโซลูชั่นที่ประกอบด้วยจำนวนเพิ่มขึ้นของ L-cysteine

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การหาปริมาณ thiol
ระดับของ thiolation ถูกกำหนดโดยใช้ Ellman ของ
ปฏิกิริยาสารตามที่อธิบายไว้ในที่อื่น (Marschutz Michaela
และ Bernkop-Schnurch, 2002) 5,50-dithiobis (2-nitrobenzoic
กรด) (DTNB) โมเลกุลปฏิกิริยากับสารเคมีกลุ่ม thiol การ
ปล่อยไนโตร 2-5-thiobenzoate (TNB?) ไอออนซึ่งต่อไป
จะ ionizes TNB 2 ไอออนหลังมีสีเหลืองที่สามารถ
ตรวจพบได้โดยแสงที่มองเห็นที่ 412 นาโนเมตร.
ในช่วงสั้น ๆ 5 mg ของโพลิเมอร์ถูกไฮเดรทใน 1.75 มล.
ของ DDW จากนั้น 500 มล. 0.5 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 8.0 และ 500 มล.
0.03% (w / w) ของสาร Ellman ละลายในบัฟเฟอร์เดียวกัน
เพิ่มเข้าไปในตัวอย่างและวิธีการแก้ปัญหาที่เกิดขึ้นได้รับการบ่ม
เป็นเวลา 2 ชั่วโมง ในที่สุดการดูดกลืนแสงที่ 412 นาโนเมตรวัด
ความเข้มข้นของกลุ่ม thiol ถูกกำหนดโดยใช้
เส้นโค้งการสอบเทียบมาตรฐานได้โดยการวัดชุดของ
การแก้ปัญหาที่มีจำนวนเพิ่มมากขึ้นของ L-cysteine

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การหาปริมาณ thiol content
ระดับ thiolation ตั้งใจใช้เอลเมิ่นเป็น
3 ปฏิกิริยาตามที่อธิบายไว้ในที่อื่น ( marschutz มิเชล่า
& bernkop schnurch , 2002 ) การ 5,50-dithiobis ( 2-nitrobenzoic
acid ) ( dtnb ) โมเลกุลทำปฏิกิริยากับสารเคมีในกลุ่มขนาด

ปล่อย 2-nitro-5-thiobenzoate ( tnb  ) ไอออนซึ่งต่อไป
ionizes เพื่อ tnb  2 ไอออนหลังมีสีเหลืองที่สามารถ
ตรวจจับแสงที่ 412 nm .
สรุป 5 มิลลิกรัมของ Polymer Modified อยู่ hydrated ใน 1.75 มล.
ของ ddw . แล้ว 500 ml 0.5 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 8.0 และ 500 ml
0.03 % ( w / w ) เอลเมิ่นเป็นรีเอเจนต์ละลายในบัฟเฟอร์เดียวกัน
เพิ่มตัวอย่าง และผลในสารละลายเชื้อ
2 H . ในที่สุด , การดูดกลืนแสงที่ 412 นาโนเมตรคือวัด
ความเข้มข้นของขนาดกลุ่มถูกกำหนดโดยใช้มาตรฐานการสอบเทียบ
โค้งดังกล่าววัดจากชุดของ
สารละลายที่มีปริมาณที่เพิ่มขึ้นของ L-Cysteine .