A simple and automated HPLC column-

A simple and automated HPLC column-switching method with rapid sample pretreatment has been
developed for quantitative determination of b-carotene in food supplements. Commercially samples of
food supplements were dissolved in chloroform with help of saponification with 1 M solution of sodium
hydroxide in ultrasound bath. A 20-min sample dissolution/extraction step was necessary before chromatography
analysis to transfer b-carotene from solid state of food supplements preparations (capsules,
tablets) to chloroform solution. Sample volume – 3 lL of chloroform phase was directly injected
into the HPLC system. Next on-line sample clean-up was achieved on the pretreatment precolumn Chromolith
Guard Cartridge RP-18e (Merck), 10  4.6 mm, with a washing mobile phase (methanol:water,
92:8, (v/v)) at a flow rate of 1.5 mL/min. Valve switch to analytical column was set at 2.5 min in a
back-flush mode. After column switching to the analytical column Ascentis Express C-18, 30  4.6 mm,
particle size 2.7 lm (Sigma Aldrich), the separation and determination of b-carotene in food supplements
was performed using a mobile phase consisting of 100% methanol, column temperature at 60 C and flow
rate 1.5 mL/min. The detector was set at 450 nm. Under the optimum chromatographic conditions standard
calibration curve was measured with good linearity – correlation coefficient for b-carotene
(r2 = 0.999014; n = 6) between the peak areas and concentration of b-carotene 20–200 lg/mL. Accuracy
of the method defined as a mean recovery was in the range 96.66–102.40%. The intraday method precision
was satisfactory at three concentration levels 20, 125 and 200 lg/mL and relative standard deviations
were in the range 0.90–1.02%. The chromatography method has shown high sample throughput
during column-switching pretreatment process and analysis in one step in short time (6 min) of the
whole chromatographic analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ได้ง่าย และอัตโนมัติ HPLC สลับคอลัมน์วิธีกับ pretreatment อย่างรวดเร็วพัฒนาขึ้นสำหรับการกำหนดเชิงปริมาณของ b-แคโรทีนในอาหารเสริม ตัวอย่างในเชิงพาณิชย์ของอาหารเสริมที่ละลายในคลอโรฟอร์มด้วยความช่วยเหลือของสะพอนิฟิโซลูชั่น 1 M ของโซเดียมไฮดรอกไซด์ในห้องอัลตร้าซาวด์ ขั้นตอนการยุบ/สกัดตัวอย่าง 20 นาทีไม่จำเป็นก่อน chromatographyการโอนย้ายบีแคโรทีนจากสถานะของแข็งของอาหารผลิตภัณฑ์เสริมอาหารเตรียม (ยาแคปซูลเม็ด) กับ chloroform โซลูชัน ตัวอย่างปริมาณ – 3 จะของคลอโรฟอร์มระยะถูกฉีดโดยตรงเข้าระบบ HPLC สำเร็จใน pretreatment precolumn Chromolith ถัดไปอย่างง่ายดายล้างป้องกันตลับ RP-18e (เมอร์ค), 10 4.6 มม. มีขั้นตอนการซักผ้าเคลื่อน (เมทานอล: น้ำ(v/v) 92:8) ที่อัตราการไหลของวาล์ว 1.5 mL/นาที สลับกับคอลัมน์การวิเคราะห์ถูกตั้งค่าใน 2.5 นาทีในการโหมดล้างหลัง หลังจากคอลัมน์สลับกับคอลัมน์วิเคราะห์ Ascentis Express C-18, 30 4.6 มม.อนุภาคขนาด 2.7 lm (ซิก Aldrich), แยก และมุ่งมั่นของบีแคโรทีนในอาหารเสริมทำโดยใช้เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยเมทานอล 100% คอลัมน์อุณหภูมิที่ 60 C และกระแสอัตรา 1.5 mL/min มีตั้งเครื่องตรวจจับที่ 450 nm ภายใต้เงื่อนไข chromatographic สูงมาตรฐานเทียบเส้นโค้งถูกวัด ด้วยดีแบบดอกไม้ – สัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์สำหรับบีแคโรทีน(r2 = 0.999014; n = 6) ระหว่างพื้นที่สูงสุดและความเข้มข้นของ b-แคโรทีน 20 – 200 lg/mL ความถูกต้องวิธีกำหนดกู้หมายถึงการอยู่ในช่วง 96.66 – 102.40% ความแม่นยำของวิธีกราฟรายไม่พอใจที่ 3 ความเข้มข้นระดับ 20, 125 และ lg/มล. และ 200 ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ในช่วง 0.90-1.02% วิธี chromatography ได้แสดงอัตราความเร็วสูงตัวอย่างในระหว่างกระบวนการ pretreatment คอลัมน์สลับและการวิเคราะห์ในขั้นตอนเดียวในเวลาสั้น ๆ (6 นาที) ของการการวิเคราะห์ทั้งหมด chromatographic

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ที่ง่ายและอัตโนมัติวิธีคอลัมน์ HPLC สลับกับการปรับสภาพตัวอย่างอย่างรวดเร็วได้รับการ
พัฒนาสำหรับการกำหนดปริมาณของขแคโรทีนในผลิตภัณฑ์เสริมอาหาร ตัวอย่างในเชิงพาณิชย์ของ
ผลิตภัณฑ์เสริมอาหารถูกละลายในคลอโรฟอร์มด้วยความช่วยเหลือของสะพอกับแก้ปัญหา M 1 ของโซเดียม
ไฮดรอกไซในอ่างอัลตราซาวนด์ 20 นาทีสลายตัวอย่าง / ขั้นตอนการสกัดเป็นสิ่งจำเป็นก่อนที่โครมา
วิเคราะห์ในการถ่ายโอนขแคโรทีนจากรัฐที่มั่นคงของการเตรียมอาหารเสริม (แคปซูล,
เม็ด) เพื่อแก้ปัญหาคลอโรฟอร์ม ปริมาณตัวอย่าง - 3 lL เฟสคลอโรฟอร์มถูกฉีดโดยตรง
เข้าสู่ระบบ HPLC ถัดไปในบรรทัดตัวอย่างสะอาดขึ้นก็ประสบความสำเร็จในการปรับสภาพ precolumn Chromolith
ยามตลับ RP-18e (เมอร์), 10? 4.6 มมมีซักผ้าเฟสเคลื่อนที่ (เมทานอล: น้ำ,
92: 8, (v / v)) ในอัตราการไหล 1.5 มิลลิลิตร / นาที สวิทช์วาล์วคอลัมน์วิเคราะห์ตั้งอยู่ที่ 2.5 นาทีใน
โหมดหลังล้าง หลังจากสลับคอลัมน์คอลัมน์วิเคราะห์ Ascentis เอ็กซ์เพรส C-18, 30? 4.6 มม
ขนาดอนุภาค 2.7 LM (Sigma Aldrich), แยกและความมุ่งมั่นของขแคโรทีนในผลิตภัณฑ์เสริมอาหาร
ได้รับการดำเนินการโดยใช้เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยเมทานอล 100% อุณหภูมิคอลัมน์ที่ 60 องศาเซลเซียสและการไหล
อัตรา 1.5 มิลลิลิตร / นาที เครื่องตรวจจับตั้งอยู่ที่ 450 นาโนเมตร ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมสารมาตรฐาน
เส้นโค้งการสอบเทียบวัดที่มีความเป็นเชิงเส้นที่ดี - ค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์สำหรับขแคโรทีน
(r2 = 0.999014; n = 6) ระหว่างพื้นที่สูงสุดและความเข้มข้นของขแคโรทีน 20-200 LG / มิลลิลิตร ความถูกต้อง
ของวิธีการที่กำหนดไว้ในขณะที่การฟื้นตัวของค่าเฉลี่ยอยู่ในช่วง 96.66-102.40% ความแม่นยำวิธีการระหว่างวัน
เป็นที่น่าพอใจที่สามระดับความเข้มข้น 20, 125 และ 200 LG / mL และค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานญาติ
อยู่ในช่วง 0.90-1.02% วิธีโครมาได้แสดงให้เห็นผ่านตัวอย่างสูง
ในระหว่างขั้นตอนการปรับสภาพคอลัมน์เปลี่ยนและการวิเคราะห์ในขั้นตอนเดียวในระยะเวลาอันสั้น (6 นาที) ของ
การวิเคราะห์โครมาทั้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ง่ายและอัตโนมัติคอลัมน์ HPLC สลับกับการเตรียมตัวอย่างวิธีที่รวดเร็วถูก
การพัฒนาสำหรับการวิเคราะห์ปริมาณเบต้าแคโรทีนในอาหารเสริม ในเชิงพาณิชย์ตัวอย่าง
อาหารเสริมถูกละลายในคลอโรฟอร์ม ด้วยความช่วยเหลือของสปอนนิฟิเคชั่นด้วยสารละลายโซเดียม ไฮดรอกไซด์
1 M ) ในอ่าง20 นาที ตัวอย่างการละลาย / การสกัดขั้นจำเป็นก่อนการวิเคราะห์โครมาโทกราฟี
โอนเบต้าแคโรทีนจากสถานะของแข็งของ ผลิตภัณฑ์ เสริมอาหาร การเตรียม ( แคปซูล
เม็ด ) เพื่อเข้าไปแก้ไข ตัวอย่างปริมาณ– 3 จะเฟสคลอโรฟอร์มโดยตรงฉีด
เข้าระบบ HPLC . ถัดไปออนไลน์ตัวอย่างล้างสําเร็จในการ precolumn chromolith
rp-18e ตลับการ์ด ( Merck ) , 10  4.6 มิลลิเมตร กับระยะการเคลื่อนที่ ( เมทานอล : น้ำ
92:8 ( v / v ) ที่อัตราการไหล 2 มล. / นาที วาล์วเปลี่ยนคอลัมน์วิเคราะห์ไว้ที่ 2.5 นาทีใน
กลับมาล้างโหมด หลังจากคอลัมน์เปลี่ยนไปวิเคราะห์คอลัมน์ ascentis ด่วน - 30  4.6 มม.
ขนาด 2.7 LM อนุภาค ( ซิกม่า Aldrich ) , การแยกและความมุ่งมั่นของเบต้า - แคโรทีน ในผลิตภัณฑ์เสริมอาหาร
การใช้เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 100 % เมทานอล คอลัมน์ อุณหภูมิ 60 องศาเซลเซียส และอัตราการไหล 
1.5 มิลลิลิตร / นาที เครื่องตรวจจับไว้ที่ 450 nm . ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมและมาตรฐาน
รูปโค้งวัดด้วยเส้นตรงและค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ดี -
( R2 = 0.999014 ; n = 6 ) ระหว่างพื้นที่และความเข้มข้นของเบต้า - แคโรทีนสูงสุด 20 – 200 LG / ความถูกต้อง
%ของวิธีการกำหนดเป็นหมายถึงการกู้คืนในช่วง 96.66 – 102.40 ล้านบาท วิธี intraday ความแม่นยำ
เป็นที่พอใจใน 3 ระดับความเข้มข้น 20 , 125 และ 200 LG / มิลลิลิตรและค่าส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์
มีค่าอยู่ในช่วง 0.90 และ 1.02 % วิธีโครมาโทกราฟีได้แสดง throughput ตัวอย่าง
สูงระหว่างคอลัมน์เปลี่ยนการกระบวนการและการวิเคราะห์ในขั้นตอนเดียวในเวลาอันสั้น ( 6 นาที ) ของ
การวิเคราะห์ทางโครมาโตกราฟีทั้งหมด