Cryo-SEM was performed using a Polaron PP2000 Cryo Transfer system (Quorum Technologies, Ringmer, UK) attached to an FEI Quanta 250 Scanning Electron Microscope (FEI,Hillsboro,OR,USA.) Frozen tissue was mounted in sample holders containing a mixture of colloidal graphite and OCT compound (Sakura Finetek,Zoeterwoude,NL)under an argon atmosphere and immersed liquid nitrogen with about half the sample protruding, Samples were transferred to the sample handling chamber of the PP2000 in liquid nitrogen then transferred under vacuum to the PP2000 preparation stage at-150 c and the protruding tissue fractured using a cooled metal blade or probe.Ice sublimation was then carried out at-90 c for between 1 and 7 min to improve surface contrast.
สามารถทำการแช่แข็งโดยใช้ปฏิยานุพันธ์ pp2000 แช่แข็ง ระบบการโอน ( เทคโนโลยี องค์ประชุม ringmer , UK ) แนบมากับเฟต้า 250 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ( Fei , Hillsboro , หรือ , USA ) ติดตั้งในผู้ถือเนื้อเยื่อแช่แข็งตัวอย่างผสม colloidal แกรไฟต์และต.ค. สารประกอบ ( ซากุระ finetek zoeterwoude , ,NL ) ภายใต้บรรยากาศอาร์กอน และแช่ไนโตรเจนเหลวด้วยประมาณครึ่งหนึ่งของตัวอย่างที่ยื่นออกมาอย่างที่ถูกโอนไปยังตัวอย่างการจัดการห้องของ pp2000 ในไนโตรเจนเหลวแล้วโอนภายใต้สุญญากาศเพื่อขั้นตอนการเตรียม pp2000 at-150 C และยื่นทิชชู่หักใช้ระบายความร้อนด้วยโลหะใบมีดหรือสอบสวนน้ำแข็งระเหิดได้ดำเนินการ at-90 C ระหว่าง 1 และ 7 นาทีเพื่อเพิ่มความคมชัดผิว
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)