MATERIALS AND METHODS Yeast strains

MATERIALS AND METHODS
Yeast strains fermentation under acidic or high-temperature condition. The WW strain was a NAM26-15A (MATa) and NAM34-4C (MATα) were haploids generated from the diploid obtained by mating NAM26-15A (MA Ta) and NAM34-4C (MAToc) (20). flocculating yeast strain KF-7 sedt : : Sh. Ble urQ3O ) (18, 19). Strain NAM27-6B (MATu dse2 : LkanMX NAM23-5D (MATa dse2 : : kanMX sedJ : : Sh ble ura3O ) and KFG4-6B (MATu F1o +) (20). Strain NAM51-11D (MATa dse2 : : kanMX sed 1 : : She ura3AO) ascospore progeny obtained from the cross between NAM34-4C and NAM50-6D (MATa dse2 : : kanMX sedt : : Sh ble urQ3AO) which was an ascospore progeny cross between NAM34-4C and NAM27-6B. The NAM51-11D strain was cap mating and producing ascospore progenies efficiently and hence was used ro isolate the heterothallic haploid strain from the cross between the NAM51-11D cell and an ascospore of the homothallic diploid. Culture media Yeast strains were maintained on 2% YPD slants (2% glucose, IX yeast extract, 2% polypeptone, and 2% agar). The sporulation medium (PH 5. 5) was composed of 1% potassium acetate and 2% agar. Screening for G418-resistant strains was carriEd out using SD+G418 medium (PH 5. 5) containing 2% glucose, 0. 67% yeast nitrogen base without amino acids, 2% agar, and 200 lLgjml G418. Before inoculation into the sporulation medium or the{SD+G418 mediuml. The yeast strains were grown overnight on a 2% YPDA plate (2% glucose, 1% yeast extract, 2% polypeprone, O. 004% adenine, and 2% agar, PH 5. 5). For growth tests, the strains were grown in 2% YPD (2% glucose, 1% yeast ext : act, and 2% polypeptone). For batch and continuous fermenta tion, precultivation and fermentation were perfornned in 5% YPD (5%glucose. 1% yeast extract, and 2% polypeptone) and 15% YPD (15% gluco se, 1% yeast extra ct, and 2X polypeFtone), respectively. The PH of the medium was adjusted with HCI solution as necessary.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการ ยีสต์สายพันธุ์หมักภายใต้สภาวะที่เป็นกรด หรือ อุณหภูมิสูง สายพันธุ์ WW NAM26-15A (ภะ) และ NAM34 - 4C (MATα) haploids จากฮอโมไซกัสได้ โดยการผสมพันธุ์ NAM26-15A (MA Ta) และ NAM34 - 4C (MAToc) (20) ยีสต์สายพันธุ์ KF-7 sedt flocculating:: urQ3O ลอฮุ Ble) (18, 19) สายพันธุ์ NAM27-6B (MATu dse2: LkanMX NAM23 - 5D (MATa dse2:: kanMX sedJ:: Sh ble ura3O) และ KFG4-6B (MATu F1o +) (20) สายพันธุ์ NAM51 - 11D (ภะ dse2:: kanMX sed 1:: เธอ ura3AO) ascospore ลูกหลานที่ได้จากการผสมระหว่าง NAM34 - 4C และ NAM50 6D (ภะ dse2:: kanMX sedt:: Sh ble urQ3AO) ซึ่งเป็นมี ascospore ลูกหลานข้ามระหว่าง NAM34 - 4C และ NAM27-6B สายพันธุ์ NAM51 - 11D เป็นฝาผสมพันธุ์และผลิต ascospore progenies ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และดังนั้น ถูกใช้ ro แยกสายพันธุ์พริก heterothallic จากการผสมระหว่างเซลล์ NAM51 - 11D และมี ascospore ของฮอโมไซกัส homothallic สายพันธุ์ยีสต์ที่สื่อวัฒนธรรมถูกเก็บรักษาไว้ 2% slants YPD (น้ำตาล 2% สารสกัดจากยีสต์ IX, polypeptone 2% และวุ้น 2%) สื่อ sporulation (PH 5. 5) คือประกอบด้วย 1% โพแทสเซียมอะซิเตทและ 2% วุ้น การตรวจหาสายพันธุ์ที่ทน G418 ดำเนินใช้ SD + G418 ปานกลาง (PH 5. 5) ที่ประกอบด้วยกลูโคส 2%, 0 67% ยีสต์ไนโตรเจนฐาน โดยไม่มีกรดอะมิโน วุ้น 2% และ 200 lLgjml G418 ก่อนดันเข้ากลาง sporulation หรือ {SD + G418 mediuml ยีสต์สายพันธุ์ที่ปลูกค้างคืนบนจาน YPDA 2% (น้ำตาล 2% สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% polypeprone, o. ก 004% คือ และ วุ้น 2% ค่า PH 5. 5) สำหรับการเจริญเติบโต สายพันธุ์ที่ปลูกใน 2% YPD (น้ำตาล 2%, 1% ยีสต์ ext: พระราชบัญญัติ และ 2% polypeptone) สำหรับชุดและทางการค้าต่อเนื่อง fermenta, precultivation และหมักถูก perfornned ใน 5% YPD (สารสกัดจากยีสต์ 1% กลูโคส 5%. และ polypeptone 2%) และ 15% YPD (se หนึ 15%, 1% ยีสต์เสริม ct และ 2 X polypeFtone), ตามลำดับ มีการปรับปรุงค่า PH ของตัวกลาง ด้วยโซลูชันของ HCI ตามความจำเป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
ยีสต์สายพันธุ์หมักภายใต้เงื่อนไขที่เป็นกรดหรืออุณหภูมิสูง สายพันธุ์ WW เป็น NAM26-15A (Mata) และ NAM34-4C (MATα) เป็นข้าวโพดที่ regenerate เกิดจากการซ้ำที่ได้จากการผสมพันธุ์ NAM26-15A (MA ตา) และ NAM34-4C (MAToc) (20) Flocculating ยีสต์ KF-7 sedt: Sh Ble urQ3O) (18, 19) สายพันธุ์ NAM27-6B (Matu dse2: LkanMX NAM23-5D (Mata dse2: kanMX sedJ:. Sh เบิ้ ura3O) และ KFG4-6B (Matu F1o +) (20) สายพันธุ์ NAM51-11D (Mata dse2: kanMX sed 1 :: เธอ ura3AO) ลูกหลาน ascospore ที่ได้รับจากการผสมผสานกันระหว่าง NAM34-4C และ NAM50-6D (Mata dse2 นี้:: kanMX sedt:. Sh เบิ้ urQ3AO) ซึ่งเป็นลูกหลานข้าม ascospore ระหว่าง NAM34-4C และ NAM27-6B NAM51- 11 สายพันธุ์ที่ได้รับการผสมพันธุ์หมวกและผลิตลูก ascospore ได้อย่างมีประสิทธิภาพและด้วยเหตุนี้เป็น RO ใช้แยกสายพันธุ์เดี่ยว heterothallic จากลูกผสมระหว่างเซลล์ NAM51-11D และ ascospore ของซ้ำ homothallic ได้. สื่อวัฒนธรรมยีสต์สายพันธุ์ที่ได้รับการดูแลในวันที่ 2% slants YPD (2 กลูโคส% ทรงเครื่องสารสกัดจากยีสต์, 2% polypeptone และวุ้น% 2). สื่อสร้างสปอร์ (PH 5. 5) ประกอบไปด้วยโพแทสเซียมอะซิเตท 1% และ 2% วุ้น. คัดกรองสำหรับสายพันธุ์ที่ทน G418 ถูกดำเนินการโดยใช้ SD + กลาง G418 (PH 5. 5) ที่มีน้ำตาลกลูโคส 2%, 0. 67% ฐานยีสต์ไนโตรเจนโดยไม่ต้องกรดอะมิโนวุ้น 2% และ 200 lLgjml G418. ก่อนที่จะฉีดวัคซีนเข้ากลางสร้างสปอร์หรือ {SD + G418 mediuml ยีสต์สายพันธุ์ที่ปลูกในชั่วข้ามคืนใน YPDA แผ่น 2% (กลูโคส 2%, สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% polypeprone ทุม 004% adenine และวุ้น 2%, PH 5. 5) สำหรับการทดสอบการเจริญเติบโตของสายพันธุ์ที่ได้รับการปลูกใน 2% YPD (2% กลูโคส 1% ต่อยีสต์ทำหน้าที่และ 2% polypeptone) สำหรับชุดและการ fermenta อย่างต่อเนื่อง precultivation และหมักถูก perfornned ใน 5% YPD (5% กลูโคส. 1% สารสกัดจากยีสต์และ polypeptone 2%) และ 15% YPD (15% Gluco SE, 1% ยีสต์ CT พิเศษและ 2X polypeFtone ) ตามลำดับ ค่า pH ของกลางมีการปรับกับการแก้ปัญหา HCI ตามความจำเป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการสายพันธุ์ยีสต์หมักเปรี้ยว หรืออุณหภูมิสูง ภายใต้เงื่อนไข ส่วน WW ความเครียดเป็น nam26-15a ( มาตา ) และ nam34-4c ( เสื่อα ) haploids ที่เกิดจากรังได้โดย nam26-15a ผสมพันธุ์ ( มาต้า ) และ nam34-4c ( matoc ) ( 20 ) flocculating สายพันธุ์ยีสต์ kf-7 sedt : : ชุ ble urq3o ) ( 18 , 19 ) nam27-6b สายพันธุ์ ( มาตุ dse2 : lkanmx nam23-5d ( มาตา dse2 : : kanmx sedj : : SH ble ura3o ) และ kfg4-6b ( มาตุ f1o + ) ( 20 ) nam51-11d สายพันธุ์ ( มาตา dse2 : : kanmx แต่ 1 : : เธอ ura3ao ) ascospore ลูกหลานที่ได้รับจากข้ามระหว่าง nam34-4c และ nam50-6d ( มาตา dse2 : : kanmx sedt : : SH ble urq3ao ) ซึ่งเป็น ascospore ลูกหลานข้ามระหว่าง nam34-4c และ nam27-6b . nam51-11d สายพันธุ์ผสมพันธุ์และผลิตหมวก ascospore ลูกจึงถูกใช้อย่างมีประสิทธิภาพ โรแยกสายพันธุ์ heterothallic แฮพลอยด์จากข้ามระหว่าง nam51-11d เซลล์ดิพลอยด์และ ascospore ของโฮโมแทลลิก . อาหารเพาะเชื้อยีสต์สายพันธุ์ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 2 % slants ypd ( 2 % = 9 สารสกัดจากยีสต์ , 2% polypeptone และ 2% วุ้น ) การสร้างสปอร์กลาง ( pH 5 5 ) ประกอบด้วยอะซีโปตัสเซียม 1% และ 2% วุ้น การคัดเลือกสายพันธุ์ที่ทน g418 ได้โดยใช้ SD + g418 ปานกลาง ( pH 5 5 ) ประกอบด้วยกลูโคส 2 % 0 67 เปอร์เซ็นต์ยีสต์ฐานไม่มีกรดอะมิโนไนโตรเจน 2% วุ้น และ 200 llgjml g418 . ก่อนการฉีดวัคซีนในสัตว์ขนาดกลางหรือ { SD + g418 mediuml . ยีสต์สายพันธุ์ที่ปลูกค้างคืนบนจาน ypda 2 % ( กลูโคส 2 % สารสกัดจากยีสต์ , 2% polypeprone . 004 % สารอัลคาลอยด์ และ 2 % Agar , pH 5 5 ) สำหรับการทดสอบการเจริญเติบโต สายพันธุ์ปลูกใน 2 % ypd ( กลูโคส 2 % ยีสต์ ext : Act 2 % polypeptone ) สำหรับชุดและ tion fermenta อย่างต่อเนื่อง precultivation และการหมักเป็น perfornned 5 % ypd ( กลูโคส 5% สารสกัดจากยีสต์ 1% และ 2% polypeptone ) และ 15% ypd ( 15% กลูโคเซ , 1% ยีสต์พิเศษ CT และ 2x polypeftone ) ตามลำดับ พีเอชของอาหารปรับด้วยกรดไฮโดรคลอริกโซลูชั่นเท่าที่จำเป็น