After a 6-day osteogenic induction,

After a 6-day osteogenic induction, the murineMC3T3-E1 cellswere
incubated using serum-free medium,which contained Rb2 and/or H2O2
for 2 days. The intracellular ROS expression level was determined using
the ROS assay kit. DCFH-DA can be oxidized by ROS in viable cells to
2′,7′-dichlorofluorescein (DCF), which is highly fluorescent at 530 nm.
These cellswerewashed three timeswith PBS. DCFH-DA,whichwas diluted
to a final consistency of 10 μM,was added and cultured for 30min
at 37 °C in the dark. When washed three times by PBS, the relative
expression of fluorescence was quantified using a multi-detection
micro-plate reader (485 nm excitation and 535 nm emission).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลังจากที่ 6-วัน osteogenic เหนี่ยวนำ cellswere murineMC3T3-E1incubated ใช้ฟรีเซรั่มกลาง ที่อยู่ Rb2 หรือ H2O2วัน 2 กำหนดระดับ intracellular ROS นิพจน์โดยใช้ROS assay kit DCFH ดาสามารถออกซิไดซ์ โดย ROS ในเซลล์ทำงานได้2′, 7′-dichlorofluorescein (DCF), ซึ่งเป็นเรืองแสงสูงที่ 530 nmTimeswith เหล่านี้ cellswerewashed สาม PBS DCFH-ดา whichwas ยกเว้นการสอดคล้องที่สุดท้ายของ 10 μM ถูกเพิ่ม และอ่างสำหรับ 30 นาทีที่ 37 ° C ในมืด เมื่อล้างสามครั้ง โดย PBS ญาตินิพจน์ของ fluorescence ถูก quantified ใช้ตรวจหลายเครื่องอ่านแผ่นไมโคร (485 nm ในการกระตุ้นและปล่อยก๊าซ nm 535)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หลังจากที่ 6 วันเหนี่ยวนำ osteogenic ที่ murineMC3T3-E1 cellswere
บ่มโดยใช้สื่อในซีรั่มฟรีที่มี Rb2 และ / หรือ H2O2
2 วัน ภายในเซลล์ระดับการแสดงออก ROS
ถูกกำหนดโดยใช้ชุดทดสอบROS DCFH-DA สามารถออกซิไดซ์โดย ROS ในเซลล์ทำงานได้
2 ', 7'-dichlorofluorescein (DCF) ซึ่งเป็นอย่างสูงที่เรืองแสงที่ 530 นาโนเมตร.
เหล่านี้ cellswerewashed สาม timeswith พีบีเอส DCFH-DA, whichwas
เจือจางเพื่อความสอดคล้องสุดท้ายของ10 ไมครอนได้รับการเพิ่มและการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 30
นาทีที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียสในที่มืด เมื่อล้างสามครั้งโดยพีบีเอสเมื่อเทียบการแสดงออกของการเรืองแสงได้รับการวัดโดยใช้การตรวจสอบหลายอ่านแผ่นไมโคร(485 นาโนเมตรและกระตุ้นการปล่อย 535 นาโนเมตร)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลังจากที่ 6 วัน osteogenic อุปนัย , murinemc3t3-e1
บ่มใช้ serum-free ระดับกลาง ซึ่งมี rb2 และ / หรือ H2O2
2 วัน ในการใช้วิเคราะห์ผลตอบแทนทางสถิติ
รอสในชุด dcfh-da สามารถถูกออกซิไดซ์โดยได้ผลตอบแทนในเซลล์
2 ’’ - 7 dichlorofluorescein ( 2 ) ซึ่งมีหลอดที่ 530 nm .
เหล่านี้ cellswerewashed สาม timeswith PBS dcfh-da ,ซึ่งเจือจาง
เพื่อความสอดคล้องสุดท้าย 10 μ M , เพิ่มและเพาะเลี้ยงสำหรับ 30 นาทีที่ 37 ° C
ในที่มืด เมื่อซักสามครั้งโดยพีบีเอส การแสดงออกของการถูก quantified ใช้ญาติ
หลายตรวจจับ
ไมโครจานอ่าน ( 485 nm และ 535 นาโนเมตรและปล่อย )