Use of highly specific, sensitive a

Use of highly specific, sensitive and quantitative Real-Time PCR (qRT-PCR) based methods greatly
facilitate the monitoring of experimental drug intervention and vaccination efficacy targeting liver stage
malaria parasite. Here, in this study we have used qRT-PCR to detect the growing liver stage parasites
following inoculation of Plasmodium yoelii sporozoite. Route of sporozoite administration and size of the
sporozoite inoculums are two major determinants that affect the liver stage parasite load and therefore
its detection and quantification. Thus, these factors need to be addressed to determine the accuracy of
detection and quantification of Real-Time PCR method. Furthermore, applicability of quantitative RT-PCR
system needs to be confirmed by analyzing the effect of different antimalarials on liver stage parasite
burden. We have observed that parasite burden in mice infected via intravenous route was higher
compared to that in subcutaneous, intradermal and intraperitoneal route infected mice. Moreover, this
method detected liver stage parasite load with as low as 50 sporozoites. The inhibition studies with
primaquine and atovaquone revealed inhibition of liver stage parasite and well correlated with patency
and course of blood stage infection. This study characterized the simplicity, accuracy, and quantitative
analysis of liver stage parasite development by real time PCR under different experimental conditions.
Use of real time PCR method greatly improves the reproducibility and applicability to estimate the efficacy
and potency of vaccine or drug candidates targeting liver stage parasite.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้งานสูง มีความสำคัญ และเฉพาะเชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ PCR (qRT PCR) วิธีการที่ใช้มากอำนวยความสะดวกในการตรวจสอบการทดลองยาแทรกแซงและวัคซีนประสิทธิภาพการกำหนดเป้าหมายขั้นตับมาลาเรีย นี่ ในการศึกษานี้ เรามีใช้ qRT PCR เพื่อตรวจหาปรสิตระยะตับเติบโตต่อ inoculation ของพลาสโมเดียม yoelii sporozoite เส้นทาง sporozoite บริหารและขนาดของการsporozoite inoculums มีสองดีเทอร์มิแนนต์ที่สำคัญที่มีผลต่อการโหลดปรสิตระยะตับดังนั้นการตรวจจับและการนับ ดังนั้น การที่ปัจจัยเหล่านี้จำเป็นต้องได้รับการตรวจสอบความถูกต้องของตรวจสอบและนับจำนวนวิธี PCR แบบเรียลไทม์ นอกจากนี้ การยอมรับเชิง RT-PCRระบบต้องได้รับการยืนยัน โดยการวิเคราะห์ผลของ antimalarials แตกต่างกันบนเวทีตับพยาธิภาระงาน เราได้สังเกตเห็นภาระที่ปรสิตในหนูที่ติดเชื้อผ่านทางหลอดเลือดดำเส้นได้สูงขึ้นเมื่อเทียบกับว่า ในเส้นทางที่ใต้ผิวหนัง intradermal และ intraperitoneal ติดเมาส์ นอกจากนี้ นี้วิธีโหลดปรสิตระยะตับด้วยการตรวจพบต่ำสุด 50 sporozoites การศึกษาการยับยั้งด้วยprimaquine และ atovaquone พบว่า ยับยั้งปรสิตระยะตับ และความสัมพันธ์กับ patency ดีและหลักสูตรของการติดเชื้อระยะเลือด การศึกษานี้ลักษณะความเรียบง่าย ความแม่นยำ และเชิงปริมาณวิเคราะห์พัฒนาปรสิตระยะตับตามเวลาจริง PCR ภายใต้เงื่อนไขการทดลองที่แตกต่างกันใช้วิธี PCR เวลาจริงการปรับปรุงความสามารถและความเกี่ยวข้องเพื่อประเมินประสิทธิภาพและความแข็งแรงของวัคซีนหรือยาเสพติดผู้สมัครกำหนดเป้าหมายขั้นตับพยาธิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การใช้ที่เฉพาะเจาะจงสูงที่มีความสำคัญเชิงปริมาณและวิธี Real-time PCR (qRT-PCR) ตามมาก
อำนวยความสะดวกในการตรวจสอบของการแทรกแซงทดลองยาเสพติดและประสิทธิภาพการฉีดวัคซีนการกำหนดเป้าหมายตับเวที
ปรสิตมาลาเรีย ที่นี่ในการศึกษาครั้งนี้เราได้ใช้ qRT-PCR ในการตรวจสอบการเจริญเติบโตของปรสิตเวทีตับ
ต่อไปนี้การปลูกเชื้อ Plasmodium sporozoite yoelii เส้นทางของการบริหาร sporozoite และขนาดของ
หัวเชื้อแบคทีเรีย sporozoite เป็นสองปัจจัยสำคัญที่ส่งผลกระทบต่อภาระตับเวทีปรสิตและดังนั้น
การตรวจสอบและการหาปริมาณของมัน ดังนั้นปัจจัยเหล่านี้จะต้องได้รับการแก้ไขเพื่อตรวจสอบความถูกต้องของ
การตรวจสอบและการหาปริมาณของ Real-Time PCR วิธี นอกจากนี้การบังคับใช้ของปริมาณ RT-PCR
ระบบความต้องการที่จะได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์ผลกระทบของยาต้านมาลาเรียที่แตกต่างกันบนเวทีตับพยาธิ
ภาระ เราได้ตั้งข้อสังเกตว่าภาระพยาธิในหนูที่ติดเชื้อผ่านเส้นทางทางหลอดเลือดดำสูง
เมื่อเทียบกับว่าในใต้ผิวหนัง intradermal และเยื่อบุช่องท้องหนูเส้นทางการติดเชื้อ นอกจากนี้
วิธีการตรวจพบตับโหลดเวทีปรสิตกับที่ต่ำเป็น 50 sporozoites การศึกษาการยับยั้งด้วย
Primaquine และ atovaquone เปิดเผยยับยั้งตับเวทีปรสิตและมีความสัมพันธ์ดีกับแจ้งชัด
และแน่นอนของการติดเชื้อในเลือดเวที การศึกษาครั้งนี้มีลักษณะเรียบง่ายถูกต้องและปริมาณ
การวิเคราะห์ของการพัฒนาตับเวทีปรสิตตามเวลาจริง PCR ภายใต้เงื่อนไขการทดลองที่แตกต่างกัน.
ใช้เวลาจริงวิธี PCR ช่วยเพิ่มการทำสำเนาและการบังคับใช้เพื่อประเมินประสิทธิภาพ
และความแข็งแรงของการฉีดวัคซีนหรือยาเสพติดผู้สมัครที่กำหนดเป้าหมายตับ เวทีปรสิต