AbstractFive isolectins, L4, L3E1,

Abstract

Five isolectins, L4, L3E1, L2E2, L1E3 and E4, were purified from red kidney bean (Phaseolus vulgaris) by affinity chromatography on a porcine thyroglobulin bound Sepharose® 4B column, and subsequent separation by Sulfopropyl Sephadex C-50 ion exchange chromatography. Using sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), one clear band appeared for each isolectin, which confirmed the high purity. The decreased haemagglutination activity in an order of E4, L1E3, L2E2, L3E1 and L4 further proved the high separation efficiency of the two columns. Low concentration (1 μg/mL) of E4 was able to stimulate the proliferation of human H9 lymphoma cells but strong cytotoxicity was observed at higher concentration. The H9 cell viability was inhibited by the five isolectins in a dose-dependent manner. The concentrations that inhibited 50% of the H9 cell viability were determined to be 3.385 μM for L4, 7.778 μM for L3E1, 9.939 μM for L2E2, 20.840 μM for L1E3 and 33.004 μM for E4, respectively. L4 showed more potent cytotoxicity than E4, which was probably due to stronger binding of L4 with the cell-surface carbohydrates than E4. It may also be due to the partial masking of E4 cytotoxicity by the glycoprotein supplemented in the medium.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อIsolectins ห้า L4, L3E1, L2E2, L1E3 และ E4 ถูกบริสุทธิ์จากถั่วแดง (ถั่วผด) โดยความสัมพันธ์ chromatography บนคอลัมน์ 4B Sepharose® หมูฟอสฟาผูก และต่อมาแยกโดย chromatography แลกเปลี่ยนไอออน Sephadex C Sulfopropyl-50 ใช้โซเดียม dodecyl ซัลเฟตตรวจสอบวิเคราะห์เจอิ (SDS-หน้า), วงหนึ่งชัดเจนปรากฏสำหรับแต่ละ isolectin ซึ่งได้รับการยืนยันความบริสุทธิ์สูง กิจกรรม haemagglutination ลดลงในใบสั่งของ E4, L1E3, L2E2, L3E1 และ L4 เพิ่มเติมพิสูจน์ประสิทธิภาพสูงแยกของสองคอลัมน์ (1 μ mL) ความเข้มข้นต่ำของ E4 ก็สามารถที่จะกระตุ้นให้เกิดการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง H9 มนุษย์ แต่พบว่า พิษที่แข็งแกร่งที่เข้มข้นสูง ชีวิตในเซลล์ H9 ถูกยับยั้ง โดย isolectins ห้าในลักษณะขึ้นอยู่กับปริมาณ ความเข้มข้นที่ 50% ของเซลล์ H9 ในเชิงยับยั้งถูกกำหนดเป็น 3.385 ไมครอนสำหรับ L4, 7.778 ไมครอนสำหรับ L3E1, 9.939 ไมครอนสำหรับ L2E2, 20.840 ไมครอนสำหรับ L1E3 และ 33.004 ไมครอนสำหรับ E4 ตามลำดับ L4 แสดงให้เห็นว่ามีศักยภาพมากขึ้นเป็นพิษกว่า E4 ที่อาจจะเกิดจากการรวมแข็งแกร่งของ L4 กับคาร์โบไฮเดรตเซลล์ผิวกว่า E4 มันอาจจะเนื่องจากกาวบางส่วนของพิษ E4 โดยไกลโคโปรตีนเสริมในสื่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ

ห้า isolectins, L4, L3E1, L2E2, L1E3 และ E4 ถูกบริสุทธิ์จากไตถั่วแดง (ถั่วแขก) โดยโครมาเป็นพี่น้องกันในสุกร thyroglobulin ผูกพันคอลัมน์Sepharose® 4B และแยกตามมาโดย Sulfopropyl Sephadex C-50 แลกเปลี่ยนไอออน โดยใช้โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) หนึ่งในวงดนตรีที่ชัดเจนปรากฏสำหรับแต่ละ isolectin ซึ่งได้รับการยืนยันความบริสุทธิ์สูง กิจกรรม haemagglutination ลดลงในคำสั่งของ E4, L1E3, L2E2, L3E1 และ L4 เพิ่มเติมพิสูจน์ประสิทธิภาพการแยกสูงของสองคอลัมน์ ความเข้มข้นต่ำ (1 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) E4 ก็สามารถที่จะกระตุ้นให้เกิดการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลือง H9 มนุษย์ แต่เป็นพิษที่แข็งแกร่งเป็นข้อสังเกตที่มีความเข้มข้นสูง เซลล์ที่มีชีวิต H9 ถูกยับยั้งโดยห้า isolectins ในลักษณะขึ้นอยู่กับปริมาณ ความเข้มข้นที่สามารถยับยั้งการ 50% ของเซลล์ที่มีชีวิต H9 ได้รับการพิจารณาให้เป็น 3.385 ไมครอนสำหรับ L4, 7.778 ไมครอนสำหรับ L3E1, 9.939 ไมครอนสำหรับ L2E2, 20.840 ไมโครเมตร L1E3 และ 33.004 ไมโครเมตร E4 ตามลำดับ L4 แสดงให้เห็นความเป็นพิษมีศักยภาพมากขึ้นกว่า E4 ซึ่งอาจเป็นเพราะมีผลผูกพันที่แข็งแกร่งของ L4 กับคาร์โบไฮเดรตเซลล์ผิวกว่า E4 นอกจากนี้ยังอาจจะเป็นเพราะกำบังบางส่วนของ E4 เป็นพิษโดยไกลโคโปรตีนเสริมในระยะกลาง