Young Dendrobium phalaenopsis orchi

Young Dendrobium phalaenopsis orchid plants were obtained from Orchid Garden, Ratchaburi, Thailand. Shoot segments with one to two meristematic auxillary buds (6– 15 mm) were excised. These shoot pieces were washed with soap and tap water three times and immersed in antiseptic solution (5.25% sodium hypochlorite with a few drops of soap) to disinfect the surface. After that the shoot segments were rinsed several times in sterilized distilled water to remove the antiseptic solution and non-attached tissue. Meristematic auxillary buds were excised from these shoot segments and cultured in liquid modified VW medium [23]. Dendrobium orchid protocorms three months of age were obtained from the Plant Tissue Culture Laboratory, Chatuchak Weekend Market, Bangkok, Thailand.
2.2. Culture medium and conditions
The VW medium [23] contained 20 g/l sucrose, 150 ml/l coconut water, 0.525 g/l KNO3, 0.25 g/l KH2PO4, 0.5 g/l (NH4)2SO4, 0.007 g/l MnSO44H2O, 0.025g/l MgSO47H2O, 0.028 g/l FeSO47H2O and 0.037 g/l Na2-EDTA. Coconut water was obtained from local market, Bangkok, Thailand. The media were supplemented with various amounts of chitosan, either chitosan from shrimp shell with a molecular weight of 100 or 10 kDa [24]. Oligomer 1 kDa chitosan was obtained from Kittolife Co. Ltd., Korea. The 10 kDa chitosan was isolated from fungal cell wall [25]. The pH of the medium was adjusted to 4.9 for liquid medium. Solid medium was prepared by adding agar (12 g/l supplied by Sigma) to the complete liquid medium. Liquid medium (50 ml) in the 250 ml Erlenmeyer flasks and 10 ml of solid agar medium in the culture tubes (150 mm 25 mm) were autoclaved for 20 min at 121 8C.
Meristematic auxillary buds were used as explants in the liquid medium. Protocorm-like bodies (PLB) (0.03–0.04 g fresh weight) were used as explant in liquid and agar medium. Liquid cultures were maintained at 27 8C and 100 rpm. Solid cultures were kept at 27 8C and provided photoperiods of 16 h per day using cool white fluorescent tubes (TLD 18 W/54 f 4A, Daylight 1030 lm, 57 lm/W, Philips, Thailand).
2.3. Data collection and analysis
Visual observations were made every day. Total fresh weight of protocorm-like bodies was recorded at 0 and after 3, 6, 8 and 12 weeks. The number of plantlets generated by the protocorm-like bodies maintained on agar medium were counted after 12 weeks of cultivation. Three replicates were carriedoutineachexperiment.AlldatawereanalyzedbySPSS software, version 7.2 using one-way ANOVA analysis. All photographs are representative for the growth condition as described.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สาวกล้วยไม้สกุลหวายกล้วยไม้ phalaenopsis พืชได้รับจากสวนกล้วยไม้ ราชบุรี ไทย ยิง เซกเมนต์ มีหนึ่งถึงสอง meristematic กรมการอาหาร (6-15 มม.) ถูก excised ยิงเหล่านี้ชิ้นถูกล้าง ด้วยสบู่และก๊อกน้ำสามครั้ง และแช่อยู่ในโซลูชันยาฆ่าเชื้อ (5.25% ฟอก ด้วยสบู่กี่หยด) เพื่อกำจัดผิว หลังจากที่ เซ็กเมนต์ที่ยิงถูก rinsed หลายครั้งใน sterilized น้ำกลั่นเอาโซลูชันยาฆ่าเชื้อและเนื้อเยื่อไม่แนบ กรมการ meristematic อาหารถูก excised เข้ายิงเซ็กเมนต์ และอ่างในน้ำปรับเปลี่ยนกลาง VW [23] กล้วยไม้สกุลหวาย protocorms อายุสามเดือนได้รับจากห้องปฏิบัติการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช จตุจักร กรุงเทพ ไทย 2.2 การสื่อวัฒนธรรมและเงื่อนไข กลาง VW [23] ประกอบด้วยซูโครส 20 g/l น้ำมะพร้าว 150 ml/l, l 0.525 g KNO3, KH2PO4 0.25 g/l, 0.5 g/l (NH4) 2SO4, 0.007 g/l MnSO44H2O, 0.025 g/l MgSO47H2O, 0.028 g/l FeSO47H2O และ 0.037 บัญชี Na2 EDTA น้ำมะพร้าวที่ได้จากตลาดท้องถิ่น กรุงเทพ ไทย สื่อถูกเสริม ด้วยจำนวนต่าง ๆ ของไคโตซาน การไคโตซานจากเปลือกกุ้งมีน้ำหนักโมเลกุลของ 10 หรือ 100 kDa [24] ยับยั้ง 1 kDa ไคโตซานได้รับจาก Kittolife Co. Ltd. เกาหลี ไคโตซาน 10 kDa ถูกแยกจากผนังเซลล์เชื้อรา [25] PH ของตัวกลางมีการปรับปรุงการ 4.9 ขนาดกลางของเหลว แข็งปานกลางถูกเตรียม โดยการเพิ่ม agar (12 g/l โดยซิก) กลางน้ำสมบูรณ์ เหลวปานกลาง (50 ml) ในน้ำ Erlenmeyer 250 ml และ 10 ml ของกลางแข็ง agar ในหลอดวัฒนธรรม (150 มม. 25 มม.) ถูก autoclaved สำหรับ 20 นาทีที่ 121 8C. กรมการ meristematic อาหารถูกใช้เป็น explants ในกลางน้ำ ร่างกายเหมือน Protocorm (PLB) (0.03-0.04 กรัมน้ำหนักสด) ใช้เป็น explant ใน agar และของเหลว มีรักษาวัฒนธรรมของเหลวที่ 27 8C และ 100 รอบต่อนาที วัฒนธรรมที่เป็นของแข็งที่ถูกเก็บไว้ที่ 27 8C และ photoperiods บริการของ h 16 ต่อวันใช้เย็นหลอดเรืองแสงสีขาว (รหัส 18 W/54 f 4A กาล 1030 lm, 57 ที่ lm/W ฟิลิปส์ ไทย) 2.3. ข้อมูลเก็บรวบรวมและวิเคราะห์ สังเกตภาพขึ้นทุกวัน บันทึกน้ำหนักสดทั้งหมดของร่างกายเหมือน protocorm ที่ 0 และ 3, 6, 8 และ 12 สัปดาห์หลังจากนั้น จำนวนสร้าง โดย protocorm เหมือนร่างกายอยู่ในระดับปานกลาง agar plantlets นับได้หลังจาก 12 สัปดาห์ของการเพาะปลูก เหมือนกับสามมี carriedoutineachexperimentซอ AlldatawereanalyzedbySPSS รุ่น 7.2 ใช้การวิเคราะห์การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียว ภาพทั้งหมดผู้แทนสภาพการเจริญเติบโตตามที่อธิบายไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หนุ่มกล้วยไม้ Phalaenopsis พืชกล้วยไม้ที่ได้รับจากสวนกล้วยไม้, ราชบุรี, ประเทศไทย ยิงส่วนที่มี 1-2 ดอกตูม Auxillary เจริญ (6- 15 มิลลิเมตร) ถูกตัดทิ้ง ชิ้นนี้ยิงถูกล้างด้วยสบู่และน้ำประปาสามครั้งและแช่ในสารละลายน้ำยาฆ่าเชื้อ (โซเดียมไฮโปคลอไรต์ 5.25% มีไม่กี่หยดของสบู่) การฆ่าเชื้อพื้นผิว หลังจากนั้นกลุ่มยิงถูกล้างหลายครั้งในน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อที่จะเอาการแก้ปัญหายาฆ่าเชื้อโรคและเนื้อเยื่อที่ไม่ยึดติด ตา Auxillary เจริญถูกตัดจากนี้ส่วนยอดและเพาะเลี้ยงในอาหารเหลวแก้ไขกลาง VW [23] กล้วยไม้สกุลหวายโปรโตคอร์สามเดือนของอายุที่ได้รับจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชห้องปฏิบัติการ, ตลาดนัดสวนจตุจักร, Bangkok, Thailand.
2.2 สื่อวัฒนธรรมและเงื่อนไข
กลาง VW [23] มี 20 g / l ซูโครส 150 มิลลิลิตร / ลิตรน้ำมะพร้าว, 0.525 กรัม / ลิตร KNO3, 0.25 กรัม / ลิตร KH2PO4 0.5 g / l (NH4) 2SO4, 0.007 กรัม / ลิตร MnSO44H2O , 0.025g / ลิตร MgSO47H2O, 0.028 กรัม / ลิตร FeSO47H2O และ 0.037 กรัม / ลิตร Na2-EDTA น้ำมะพร้าวที่ได้รับจากตลาดท้องถิ่น, Bangkok, Thailand สื่อถูกเสริมด้วยปริมาณต่างๆของไคโตซานทั้งไคโตซานจากเปลือกกุ้งที่มีน้ำหนักโมเลกุลของ 100 หรือ 10 กิโลดาลตัน [24] oligomer 1 กิโลดาลตันไคโตซานที่ได้รับจาก Kittolife จำกัด เกาหลี 10 กิโลดาลตันไคโตซานถูกแยกออกจากผนังเซลล์ของเชื้อรา [25] ค่า pH ของกลางที่ได้รับการปรับให้ 4.9 สำหรับอาหารเหลว สื่อที่เป็นของแข็งถูกจัดทำขึ้นโดยการเพิ่มวุ้น (12 g / l จัดทำโดย Sigma) กับอาหารเหลวที่สมบูรณ์ อาหารเหลว (50 มล.) ใน 250 มลขวดรูปกรวยและ 10 มล. ของกลางวุ้นแข็งในหลอดวัฒนธรรม (150 มิลลิเมตร 25 มิลลิเมตร) ได้รับการอบไอน้ำเป็นเวลา 20 นาทีที่อุณหภูมิ 121 8C.
เจริญตา Auxillary ถูกนำมาใช้เป็นชิ้นส่วนในอาหารเหลว ร่างกายของโปรโตคอร์เหมือน (PLB) (0.03-0.04 กรัมน้ำหนักสด) ถูกนำมาใช้เป็นชิ้นส่วนในอาหารเหลวและอาหารเลี้ยงเชื้อ วัฒนธรรมเหลวถูกเก็บรักษาไว้ที่ 27 8C และ 100 รอบต่อนาที วัฒนธรรมที่เป็นของแข็งถูกเก็บไว้ที่ 27 8C และให้ photoperiods 16 ชั่วโมงต่อวันโดยใช้หลอดเรืองแสงสีขาวนวล (TLD 18 วัตต์ / 54 ฉ 4A, Daylight 1,030 ลูเมน, 57 ลูเมน / W, ฟิลิปส์ประเทศไทย).
2.3 การเก็บรวบรวมข้อมูลและการวิเคราะห์
ภาพสังเกตได้ทำทุกวัน น้ำหนักสดรวมของร่างกายโปรโตคอร์เหมือนถูกบันทึกไว้ที่ 0 และหลังจาก 3, 6, 8 และ 12 สัปดาห์ จำนวนของต้นอ่อนที่เกิดจากร่างกายของโปรโตคอร์เหมือนการบำรุงรักษาในสื่อวุ้นนับหลังจาก 12 สัปดาห์ของการเพาะปลูก สามซ้ำเป็นซอฟแวร์ carriedoutineachexperiment.AlldatawereanalyzedbySPSS รุ่น 7.2 โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว ภาพถ่ายทั้งหมดเป็นตัวแทนสภาพการเจริญเติบโตตามที่อธิบายไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กล้วยไม้ฟาแลนนอปซิสกล้วยไม้
หนุ่มพืชได้มาจากสวน กล้วยไม้จังหวัดราชบุรี ยิงกลุ่มกับหนึ่งสองตาเสริม meristematic ( 6 – 15 มิลลิเมตร ) ถูกเอาออก ชิ้นยิงเหล่านี้ถูกล้างด้วยสบู่และน้ำสามครั้ง และแช่ในสารละลายยาฆ่าเชื้อโรค ( 5.25 % โซเดียมไฮโปคลอไรต์ไม่กี่หยดสบู่ ) เพื่อฆ่าเชื้อที่พื้นผิวหลังจากนั้นยิงกลุ่มถูกล้างหลาย ๆ ครั้งในการฆ่าเชื้อน้ำเอาสารละลายยาฆ่าเชื้อโรค และไม่ติดทิชชู่ meristematic เสริมตาถูกตัดจากเหล่านี้ยิงกลุ่มและเลี้ยงในน้ำขนาดกลาง VW ดัดแปลง [ 23 ] กล้วยไม้สกุลหวายเมื่อสามเดือนของอายุ ได้จากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชในห้องปฏิบัติการ , จตุจักร ,กรุงเทพมหานคร , ประเทศไทย
2.2 . เงื่อนไขสื่อและวัฒนธรรม
VW ขนาดกลาง [ 23 ] บรรจุ 20 กรัม / ลิตรน้ำตาลซูโครสลิตรน้ำมะพร้าว 150 ml 0.525 กรัม / ลิตร kno3 0.25 กรัม / ลิตร kh2po4 0.5 g / l ( NH4 ) 2so4 0.007 กรัม / ลิตร , mnso44h2o 0.025g/l mgso47h2o , 0.028 g / l , feso47h2o 0.005 กรัมและ L N EDTA น้ํามะพร้าว ได้จากตลาดท้องถิ่น , กรุงเทพ , ประเทศไทย สื่อที่ถูกเสริมด้วยปริมาณต่างๆของไคโตซานให้ไคโตซานจากเปลือกกุ้ง มีน้ำหนักโมเลกุล 100 หรือ 10 กิโล [ 24 ] โอลิโกเมอร์ 1 กิโลดาลตันของไคโตซาน ที่ได้จาก kittolife Co . Ltd เกาหลี 10 กิโลดาลตันของไคโตซาน ที่แยกได้จากเชื้อราผนังเซลล์ [ 25 ] พีเอชของอาหารปรับ 4.9 สำหรับอาหารเหลว อาหารแข็งได้เพิ่ม ( 12 กรัมต่อลิตร ที่จัดโดย Sigma ) ในอาหารเหลวที่สมบูรณ์อาหารเหลว ( 50 มล. ) ในขวด 10 ml 250 มิลลิลิตร เออร์เลนเมเยอร์และขนาดกลางวุ้นแข็งในวัฒนธรรมหลอด ( 150 มิลลิเมตร 25 มิลลิเมตร ) ถูกสังเคราะห์สำหรับ 20 นาทีที่ 121 8C .
meristematic เสริมตา ใช้เป็นอาหาร ในอาหารเหลว โปรโตคอร์มเหมือนศพ ( plb ) ( 0.03 - 0.04 กรัมน้ำหนักสด ) ที่ใช้ต่อในของเหลวและผง ) วัฒนธรรมของเหลวเป็นรักษาที่ 27 8C และ 100 รอบต่อนาทีวัฒนธรรมที่แข็งไว้ที่ 27 8C และ ให้ photoperiods 16 ชั่วโมงต่อวันโดยใช้หลอดเรืองแสงสีขาวเย็น ( TLD 18 W / 54 F 4 กลางวัน 1030 LM , 57 LM / W , Philips , ประเทศไทย )
2.3 การเก็บรวบรวมข้อมูลและการวิเคราะห์ข้อมูล
สังเกตภาพได้ทุกวัน น้ำหนักรวมของโปรโตคอร์มเหมือนศพที่ถูกบันทึกไว้ 0 และหลัง 3 , 6 , 8 และ 12 สัปดาห์จำนวนต้นที่เกิดจากโปรโตคอร์มเหมือนร่างกายรักษาอาหารวุ้นถูกนับหลังจาก 12 สัปดาห์ของการเพาะปลูก มี 3 ซ้ำ carriedoutineachexperiment.alldatawereanalyzedbyspss ซอฟต์แวร์ เวอร์ชั่น 7.2 การวิเคราะห์แปรปรวนทางเดียว ภาพทั้งหมดเป็นตัวแทนของเงื่อนไขการอธิบายว่า