The secondary antibody has an attac

The secondary antibody has an attached enzyme, horseradish
peroxidase (HRP). In the last step, the attached HRP enzyme
catalyzes color development in the substrate, OPD. The optical
density of the substrate is then measured and is inversely
proportional to aflatoxin concentration.
Aflatoxin concentrations were measured using 96-well
polystyrene microplates that had previously been coated with
AfB1-BSA-conjugate. The AfB1-BSA coated plates were
prepared as follows: To the wells of new microplates, 100 μL
AfB1-BSA-conjugate (5 mg/L) in pH 9.5 carbonate/bicarbonate
buffer were added and equilibrated overnight in a
refrigerator. The coated plates were subsequently washed 6
times using phosphate buffered saline with 0.05% Tween 20
(PBST) and stored dry in a refrigerator until use.
Aliquots (50 μL) of aflatoxin standards containing 0 to
500 ng AfB1/mL in 12% methanol/88% PBST were added to
the wells of AfB1-BSA coated plates. Similarly, blanks and
sample solutions were diluted using 12% methanol/88% PBST
and 50-μL aliquots added to the wells of the microplates.
Then, 50-μL aliquots of a 1:2000 dilution of the rabbit anti-
AfB1 antibody in PBST were added to the microplate wells
and the microplates agitated for 2 h. Afterward, the

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แอนติบอดีรองมีการแนบเอนไซม์ horseradish
peroxidase (HRP) ในขั้นตอนสุดท้าย เอนไซม์ HRP แนบ
catalyzes พัฒนาสีในพื้นผิว ผู้ป่วยนอก ที่แสง
แล้ววัดความหนาแน่นของพื้นผิว และเป็น inversely
กับสมาธิ aflatoxin.
Aflatoxin ความเข้มข้นที่วัดใช้ดี 96
microplates โฟมที่ก่อนหน้านี้มีการเคลือบด้วย
AfB1-บีเอสเอค่าสังยุค AfB1-บีเอสเอได้แผ่นเคลือบ
เตรียมดังนี้: การบ่อของใหม่ microplates, 100 μL
AfB1-บีเอสเอค่าสังยุค (5 mg/L) ในค่า pH 9.5 คาร์บอเนต/ไบคาร์บอเนต
บัฟเฟอร์เพิ่ม และ equilibrated ค้างคืนใน
ตู้เย็น แผ่นเคลือบมาถูกล้าง 6
เวลาใช้ฟอสเฟต buffered น้ำเกลือกับ 0.05% Tween 20
(PBST) และแห้งเก็บไว้ในตู้เย็นจนกว่าจะใช้
Aliquots (50 μL) ประกอบด้วย 0 เพื่อมาตรฐาน aflatoxin
500 ng AfB1/mL ใน methanol/88% 12% PBST เพิ่มเข้า
บ่อของบีเอสเอ AfB1 เคลือบแผ่น ในทำนองเดียวกัน ช่องว่าง และ
โซลูชั่นอย่างถูกทำให้เจือจางใช้ 12% methanol/88% PBST
aliquots 50 μL เพิ่มบ่อของ microplates และ
แล้ว 50 μL aliquots ของเจือจาง 1:2000 ป้องกันกระต่ายที่-
เพิ่มแอนติบอดี AfB1 ใน PBST ไปบ่อ microplate
และ microplates นั้นกระตุ้นทำสำหรับ 2 h. หลัง การ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รองแอนติบอดีมีเอนไซม์แนบมะรุม
peroxidase (HRP) ในขั้นตอนสุดท้ายของการทำงานของเอนไซม์ HRP แนบ
กระตุ้นการพัฒนาสีในพื้นผิวที่แผนกผู้ป่วยนอก แสง
ความหนาแน่นของพื้นผิวที่วัดแล้วและมีความผกผัน
สัดส่วนกับความเข้มข้นของอะฟลาท็อกซิน
ความเข้มข้นของอะฟลาท็อกซินถูกวัดโดยใช้ 96 ดี
สไตรี microplates ที่เคยถูกเคลือบด้วย
AFB1-BSA-ผัน แผ่น AFB1-BSA เคลือบถูก
จัดทำขึ้นดังต่อไปนี้เพื่อบ่อของ microplates ใหม่ 100 ไมโครลิตร
AFB1-BSA-คอนจูเกต (5 mg / l) ค่า pH 9.5 คาร์บอเนต / ไบคาร์บอเนต
บัฟเฟอร์ที่เพิ่มขึ้นและ equilibrated ค้างคืนใน
ตู้เย็น แผ่นเคลือบก็ถูกล้าง 6
ครั้งโดยใช้ฟอสเฟตน้ำเกลือเป็นกลางกับ 0.05% Tween 20
(PBST) และแห้งที่เก็บไว้ในตู้เย็นจนใช้
aliquots (50 ไมโครลิตร) ของมาตรฐานที่มีอะฟลาท็อกซิน 0 ถึง
500 จำนวน AFB1 / ml ใน 12% เมทานอล / 88% PBST ถูกเพิ่มเข้าไปใน
บ่อของแผ่น AFB1-BSA เคลือบ ในทำนองเดียวกันช่องว่างและ
การแก้ปัญหาที่กลุ่มตัวอย่างถูกเจือจางโดยใช้ 12% PBST เมทานอล / 88%
และ 50 ไมโครลิตร aliquots เข้ามาอยู่ในบ่อของ microplates
จากนั้น 50 ไมโครลิตรของ aliquots 1: เจือจาง 2000 กระต่ายต่อต้าน
แอนติบอดี AFB1 ใน PBST ถูกเพิ่มเข้าไปในบ่อไมโคร
และตื่นเต้น microplates เป็นเวลา 2 ชั่วโมง ต่อจากนั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ระดับเอนไซม์แอนติบอดีที่ได้แนบ , พืชชนิดหนึ่ง
เปอร์ออกซิเดส ( HRP ) ในขั้นตอนสุดท้าย แนบ HRP เอนไซม์
กระตุ้นการพัฒนาสีในพื้นผิว , ไทย . แสง
ความหนาแน่นของพื้นผิว แล้ววัดและผกผันสัดส่วนกับปริมาณความเข้มข้น
.
จำหน่ายปริมาณการวัด 96 ดี
microplates สไตรีนที่ได้รับก่อนหน้านี้ที่เคลือบด้วย
( สาร ) . และสารเคลือบแผ่น ( ถูก
เตรียมดังนี้ : บ่อแห่ง microplates ใหม่ 100 μ L
สาร ( BSA ) 5 มก. / ล. ) ในบัฟเฟอร์ pH 9.5 / ไบคาร์บอเนตคาร์บอเนต
เพิ่ม
equilibrated ค้างคืนในตู้เย็น แผ่นเคลือบ จัดการล้าง 6
2 ครั้งใช้เกลือฟอสเฟต ) tween 20
( pbst ) และเก็บไว้ที่แห้งในตู้เย็นจนกว่าจะใช้
เฉยๆ ( 50 μ L ) ของมาตรฐานปริมาณความเข้มข้น 0

500 ng / ml ใน 12 % สารเมทานอล / 88 % pbst เพิ่ม

สารเคลือบบ่อน้ำของบีเอสเอ จาน ในทำนองเดียวกัน , ช่องว่างและ
ตัวอย่างโซลูชั่นลด 12 % ใช้เมทานอล / 88 % pbst
และ 50 - μผมเฉยๆเพิ่มบ่อของ microplates .
แล้ว 50 - μผมเฉยๆของ 1:2000 เจือจางของ anti -
กระต่ายสารแอนติบอดีใน pbst ถูกเพิ่มไปยังพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย เวล
และ microplates ปั่นป่วนเป็นเวลา 2 ชั่วโมง ต่อมา