The 12.5 ul RT-PCR reaction volume of 12.5 μl contained 10 pmoles of each primer, 2 units of Taq polymerase (Promega, M830B, Go Taq DNA Polymerase, Madison WI, USA), 25 nmoles of each deoxynucleoside triphosphate, 1.5 mM MgCl2 and 2.5 μl of 5X green buffer (Promega, M891A, %X Green Buffer Go Taq, Flexi Buffer, Madison WI, USA), 20 units of Reverse transcriptase (Promega, M170B, M-ML V Reverse Transcriptase, Madison WI, USA) and prior to commencing the PCR cycling parameters, there was a 42 °C incubation for 15 mins., followed by 95 °C for 4.5 mins. denaturation.
ปริมาณปฏิกิริยา 12.5 μl 12.5 ul RT-PCR อยู่ 10 pmoles ละพื้น Taq พอลิเมอเรส (Promega, M830B ไป Taq DNA พอลิเมอเรส เมดิสัน WI สหรัฐอเมริกา), nmoles 25 ของแต่ละ deoxynucleoside triphosphate, 1.5 mM MgCl2 และ 2.5 μl 5 X 2 หน่วยเขียวบัฟเฟอร์ (Promega, M891A, %x เขียวบัฟเฟอร์ไป Taq, Flexi บัฟเฟอร์ เมดิสัน WI สหรัฐอเมริกา), ปเทส (Promega 20 หน่วย , M170B, M ML V ปเท เมดิสัน WI สหรัฐอเมริกา) และก่อนเป็นต้นไปพารามิเตอร์ขี่จักรยาน PCR บ่มที่ 42 ° C สำหรับ 15 นาที ตาม ด้วย 95 ° C เป็นเวลา 4.5 นาที แปรสภาพ
การแปล กรุณารอสักครู่..

12.5 UL RT-PCR ปริมาณการเกิดปฏิกิริยาของ 12.5 ไมโครลิตรมี 10 pmoles ของแต่ละไพรเมอร์จำนวน 2 Taq โพลิเมอร์ (Promega, M830B ไป Taq DNA Polymerase เมดิสัน WI, USA) 25 nmoles ของแต่ละ deoxynucleoside triphosphate 1.5 มิลลิ MgCl2 และ 2.5 ไมโครลิตรของ 5X กันชนสีเขียว (Promega, M891A, X% สีเขียวบัฟเฟอร์ไป Taq, Flexi บัฟเฟอร์เมดิสัน WI, USA) 20 หน่วยของเอนไซม์ (Promega, M170B M-ML V ย้อนกลับ transcriptase เมดิสันวิสคอนซินสหรัฐอเมริกา) และ ก่อนที่จะเริ่มพารามิเตอร์การขี่จักรยาน PCR มีการบ่ม 42 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที. ตามด้วย 95 ° C เป็นเวลา 4.5 นาที สูญเสียสภาพธรรมชาติ
การแปล กรุณารอสักครู่..

ที่ 12.5 UL RT-PCR ปฏิกิริยาปริมาณ 12.5 μผมมีอยู่ 10 pmoles ของแต่ละคู่ , 2 หน่วย ( promega ได้ดี , ใช้ m830b ไปใช้ ดีเอ็นเอ ทัค Madison WI , USA ) , 25 ในแต่ละชุด ไตรฟอสเฟต deoxynucleoside , 1.5 มม. และ 2.5 ลิตร สีเขียว μเช่นบัฟเฟอร์ ( promega m891a % X , สีเขียว บัฟเฟอร์ไปแท็ค Flexi , บัฟเฟอร์ , Madison WI , USA ) , 20 หน่วย reverse transcriptase ( promega m170b m-ml V , , reverse transcriptase แมดิสัน Wi , USA ) และก่อนที่จะเพิ่มจักรยานพารามิเตอร์เริ่มมี 42 ° C บ่มเป็นเวลา 15 นาที ตามด้วย 95 องศา C นาน 4.5 นาที การหยุดชั่วคราว .
การแปล กรุณารอสักครู่..
