2.2. Synthesis of 4-nitrobenzaldehy

2.2. Synthesis of 4-nitrobenzaldehyde semicarbazone (used as internal standard)
1.0 g (9.0 mmol) of semicarbazide hydrochloride and 5 g of sodium acetate were dissolved in 50 ml of a mixture of water and dimethyl sulfoxide (95:5, v/v). 0.5 g (3.3 mmol) of 4-nitrobenzaldehyde was added to this solution in small portions. After stirring for 60 min at room temperature, the semicarbazone, a yellow precipitate, was filtered off, washed thoroughly with water–DMSO (95:5, v/v) to remove the excess of semicarbazide and dried in vacuo. The product was examined by mass spectrometry and 1H-NMR.

2.3. LC–MS–MS analysis
The LC–MS–MS system consisted of an Agilent Series 1100 HPLC system (Agilent Technologies, Waldbronn, Germany) connected to a PE Sciex API 365 triple quadrupole mass spectrometer (PE Sciex Instruments, Thornhill, Canada) equipped with an Ion Sprayer (pneumatically assisted electrospray) interface. The column used was an Inertsil® ODS-3, 150×3 mm I.D., 5 μm (GL Sciences, Tokyo, Japan) connected to an Inertsil® ODS-3 pre-column, 10×3 mm I.D., 5 μm. A mixture of methanol and water (50:50, v/v) with 10 mM ammonium acetate was used as mobile phase at a flow rate of 0.5 ml min−1 and at a temperature of 25°C. The solvent flow was split in a ratio of 1:50 prior to MS detection.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การสังเคราะห์ 4 nitrobenzaldehyde เชิงซ้อน (ใช้เป็นมาตรฐานภายใน)
1.0 กรัม (9.0 mmol) ของไฮโดรคลอไร semicarbazide และ 5 กรัมโซเดียมอะซิเตทถูกกลืนหายไปใน 50 มิลลิลิตรส่วนผสมของน้ำและ dimethyl sulfoxide (95: 5, v / v) 0.5 กรัม (3.3 mmol) 4 nitrobenzaldehyde ถูกบันทึกอยู่ในการแก้ปัญหานี้ในส่วนเล็ก ๆ หลังจากที่กวนเป็นเวลา 60 นาทีที่อุณหภูมิห้องเชิงซ้อน, ตะกอนสีเหลืองถูกกรองออกล้างให้สะอาดด้วยน้ำ DMSO (95: 5, v / v) เพื่อลบส่วนที่เกินจาก semicarbazide และแห้งในสุญญากาศ สินค้าที่ได้รับการตรวจสอบโดยมวลสารและ 1H-NMR. 2.3 LC-MS-MS การวิเคราะห์ระบบ LC-MS-MS ประกอบด้วย Agilent ซีรีส์ 1100 ระบบ HPLC (Agilent Technologies, Waldbronn, เยอรมนี) เชื่อมต่อกับ PE Sciex API 365 สามสเปกโตรมิเตอร์มวล quadrupole (PE Sciex เครื่องมือ Thornhill, แคนาดา) ติดตั้ง กับพ่นไอออน (ช่วยอัตโนมัติ Electrospray) อินเตอร์เฟซ คอลัมน์ที่ใช้เป็น ODS-3 Inertsil® 150 × 3 มม ID, 5 ไมครอน (วิทยาศาสตร์ GL, โตเกียว, ญี่ปุ่น) เชื่อมต่อกับ ODS-3 Inertsil®ก่อนคอลัมน์, 10 × 3 มม ID, 5 ไมครอน ส่วนผสมของเมทานอลและน้ำ (50:50, v / v) กับอะซิเตท 10 มมแอมโมเนียมถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ในอัตราการไหล 0.5 มิลลิลิตรนาทีที่ 1 และที่อุณหภูมิ 25 ° C การไหลของตัวทำละลายที่ถูกแบ่งออกในอัตราส่วน 1:50 ก่อนที่จะมีการตรวจสอบ MS

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . การสังเคราะห์ 4-nitrobenzaldehyde เกิด ( ใช้เป็นมาตรฐานภายใน )
1.0 กรัม ( 9.0 มิลลิโมล ) / semicarbazide และ 5 กรัมของโซเดียมอะซิเตทละลายใน 50 มิลลิลิตร ผสมน้ำและไดเมทิลซัลฟอกไซด์ ( 95:5 , V / V ) 0.5 กรัม ( 3.3 มิลลิโมล ) ของ 4-nitrobenzaldehyde ถูกเพิ่มเพื่อแก้ปัญหานี้ ในส่วนที่เล็ก หลังจากกวนนาน 60 นาที ที่อุณหภูมิห้องเกิดที่ ,เป็นตะกอนสีเหลือง ถูกกรองออก ล้างให้สะอาดด้วยน้ำ ( DMSO ) 95:5 , V / V ) เพื่อลบส่วนเกินของ semicarbazide และแห้งใน vacuo . สินค้าที่ถูกตรวจสอบโดยมวลสาร และ 1h-nmr

2.3 LC MS MS ––––การวิเคราะห์
LC MS MS ระบบประกอบด้วย Agilent 1100 ชุด HPLC ( Agilent Technologies , waldbronn ระบบ ,เยอรมนี ) เชื่อมต่อกับ PE sciex API 365 สามสี่ขั้วแมสสเปกโตรมิเตอร์ ( PE sciex เครื่องมือ ธอร์นฮิลล์ , แคนาดา ) อุปกรณ์เครื่องพ่นไอออน ( pneumatically ช่วยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ) อินเตอร์เฟซ คอลัมน์ที่ใช้เป็น inertsil ® ods-3 150 มม. × 3 ไอดี 5 μ M ( GL ) , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) เชื่อมต่อกับ inertsil ® ods-3 ก่อนคอลัมน์ 10 × 3 mm บัตร 5 μเมตร ส่วนผสมของเมทานอลและน้ำ ( 50 ,v / V ) แอมโมเนียมอะซิเตท 10 มม. ใช้เฟสเคลื่อนที่ที่อัตราการ ไหลของ− 1 0.5 มิลลิลิตรต่อนาทีและที่อุณหภูมิ 25 ° C สารเคมี การแบ่งในอัตราส่วน 1 : 50 ก่อนที่คุณตรวจสอบ