2.3. Cell culture and UV irradiation
Human foreskin fibroblasts (Hs68) were obtained from the Bioresource
Collection and Research Center (Hsinchu, Taiwan). Hs68 cells were maintained in
DMEM, and supplemented with 10% FBS, 100 U/mL of penicillin, and 100 U/mL of
streptomycin in a humidified atmosphere of 5% CO2 at 37 C. The cells in a
phosphate-buffered saline (PBS) were exposed to UVB at a dosage of 40 mJ/cm2
.
A CL-1000M UV Crosslinker (UVP, Upland, CA, USA) was used as the UVB source,
delivering a UVB energy spectrum of 302 nm. After UV exposure, the cells were
incubated for 24 h at 37 C in a humidified atmosphere of 5% CO2 in serum-free
DMEM containing various concentrations of K36. The cytotoxicity of K36 was evaluated
in the cells cultured for 3 h by using the MTT assay described previously
(Chiang et al., 2012, 2011). The concentrations of K36 used in this study were based
on preliminary studies that have reported the successful prevention of photodamage
and no cytotoxicity.
2.3 การเพาะเลี้ยงเซลล์และ UV รังสีไฟโบรบลาส หนังหุ้มปลายลึงค์ของมนุษย์ ( hs68 ) ที่ได้รับจากทรัพยากรชีวภาพศูนย์รวบรวมและวิจัย ( Hsinchu , ไต้หวัน ) hs68 เซลล์ถูกเก็บรักษาไว้ในdmem และเสริมด้วย 10% FBS 100 U / ml ของเพนนิซิลลิน และ 100 U / ml ของสเตร็ปโตมัยซินใน humidified บรรยากาศของ CO2 5% ที่ 37 องศาเซลเซียส เซลล์ในเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS ) ก็โดน UVB ที่ขนาด 40 เมกะจูล / ตร. ซม..เป็น cl-1000m UV รอบ ( uvp ไร่ , CA , USA ) ถูกใช้เป็นแหล่ง UVB ,ส่ง UVB สเปกตรัมพลังงานของ 302 nm . หลังจากแสง UV , เซลล์คือบ่มเชื้อเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ในบรรยากาศของ CO2 humidified 5% ใน serum-freedmem ที่มีความเข้มข้นต่าง ๆ ของ k36 . ความเป็นพิษของ k36 ถูกประเมินในเซลล์เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 3 ชม. โดยใช้ MTT assay ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้( เชียงใหม่ ) et al . , 2554 , 2011 ) ความเข้มข้นของ k36 จำนวนตามในการศึกษาเบื้องต้นได้รายงานการป้องกันที่ประสบความสําเร็จของ photodamageและไม่มีพิษ .
การแปล กรุณารอสักครู่..
