2.3. Lipid extraction and fatty aci

2.3. Lipid extraction and fatty acid analysis
The total lipid from wet muscle tissue was extracted and
measured gravimetrically according to the method of Folch et al.
(1957). Wet muscle samples were homogenised in chloroform/
methanol (C:M 2:1, v/v) using an Ultra-Turrax tissue disrupter
(Fisher Scientific, Loughborough, UK). The homogenates were
filtered and a Folch extract prepared. Samples were kept on ice
under nitrogen between procedures and lipid extracts stored in
C:M (2:1, v/v) at a final concentration of 10 mg lipid/mL at 20 8C
under nitrogen. Solvents contained 0.05% (w/v) butylated
hydroxy-toluene (BHT) as an antioxidant. Fatty acid methyl esters
(FAME) were prepared by acid-catalysed transesterification of
1 mg total lipid with 0.1 mg heptadecanoic acid (Sigma Chemical
Company, St. Louis, USA) as internal standard using 2 mL of 1% (v/
v) sulphuric acid in methanol and 1 mL of toluene under nitrogen
at 50 8C for 16 h. Crude FAME were purified by TLC in isohexane:
diethyl ether: acetic acid (90:10:1, v/v) and visualised by spraying
lightly the edge of the plate with 1% (w/v) iodine in CHCl3. FAME
were scraped from the plate and eluted with isohexane: diethyl
ether (1:1, v/v). Purified FAME were re-dissolved in isohexane
containing 0.05% BHT and stored under nitrogen at 20 8C prior to
gas–liquid chromatography.
Fatty acid methyl esters were separated and quantified by gas–
liquid chromatography (Fisons 8000 series, Thermo-Finnegan,
Hemel Hempstead, UK) using a CP Wax 52CB fused silica capillary
column (30 m  0.32 mmi.d., 0.25 mmfilm thickness) (Chrompak,
London, UK). Hydrogen was used as carrier gas at a flow rate of
2.5 mL/min and temperature programming was from 50 8C to
150 8C at 40 8C/min and from 150 8C to 225 8C at a rate of 2 8C/min
and the final temperature of 225 8C was maintained for 5 min.
Individual methyl esters were identified by comparison to known
standards (marine fish oil). Peak areas of fatty acids were
quantified with reference to the peak area of 17:0 internal
standards and computed automatically by a computing integrator
(Chromcard for Windows, ThermoQuest, Milan, Italy).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. กระบวนการวิเคราะห์สกัดและกรดไขมันมีสกัดไขมันรวมจากเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อเปียก และวัด gravimetrically ตามวิธีของ Folch et al(1957) มี homogenised ตัวอย่างกล้ามเนื้อเปียกในคลอโรฟอร์ม /เมทานอล (C:M 2:1, v/v) ใช้ disrupter มีเนื้อเยื่อพิเศษ Turrax(Fisher วิทยาศาสตร์ Loughborough, UK) ได้ homogenatesกรอง และเตรียมสารสกัด Folch ตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้บนน้ำแข็งภายใต้ไนโตรเจนระหว่างขั้นตอนและสารสกัดไขมันที่เก็บไว้ในC:M (2:1, v/v) ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของไขมัน 10 มก./มล.ที่ 20 8Cภายใต้ไนโตรเจน หรือสารทำละลายอยู่ 0.05% (w/v) butylatedhydroxy-โทลูอีน (บาท) เป็นสารต้านการ กรดไขมัน methyl esters(ชื่อเสียง) ถูกเตรียม โดย catalysed กรดเพิ่มของ1 มิลลิกรัมไขมันรวมกับกรด heptadecanoic 0.1 mg (ซิกเคมีบริษัท St. Louis สหรัฐอเมริกา) เป็นมาตรฐานภายในใช้ mL 2 1% (v /v) กรดเมทานอลและ 1 mL ของโทลูอีนภายใต้ไนโตรเจนที่ 8C 50 สำหรับ 16 h. ชื่อเสียงน้ำมันที่บริสุทธิ์ โดย TLC ใน isohexane:อีเทอร์ diethyl: กรดอะซิติก (90:10:1, v/v) และ visualised โดยการฉีดพ่นเบา ๆ ขอบของแผ่นกับไอโอดีน 1% (w/v) ใน CHCl3 ชื่อเสียงขูดจากจาน และ eluted กับ isohexane: diethylอีเทอร์ (1:1, v/v) ชื่อเสียงที่บริสุทธิ์ถูกละลายอีกครั้งใน isohexaneประกอบด้วยบาท 0.05% และเก็บไว้ภายใต้ไนโตรเจนที่ 8C 20 ก่อนchromatography ก๊าซของเหลวกรดไขมัน methyl esters คั่น และ quantified โดยก๊าซ –เหลว chromatography (Fisons 8000 ชุด เทอร์โมฟินนีแกนโรงแรม UK) ใช้เป็นขี้ผึ้ง CP 52CB นส่วน fused แรงคอลัมน์ (30 m $ 0.32 mmi.d ความหนา 0.25 mmfilm) (Chrompakลอนดอน สหราชอาณาจักร) ใช้ไฮโดรเจนเป็นก๊าซผู้ขนส่งที่อัตราการไหลของ2.5 mL/min และเขียนโปรแกรมอุณหภูมิได้จาก 50 8C ไป150 8C 8C 40 นาที และ จาก 150 8C ไป 225 8C ในอัตรานาทีละ 2 8 Cและมีรักษาอุณหภูมิสุดท้ายของ 225 8C ใน 5 นาทีแต่ละ methyl esters ที่ระบุโดยการเปรียบเทียบการรู้จักมาตรฐาน (น้ำมันปลาทะเล) พื้นที่สูงสุดของกรดไขมันได้quantified โปร่งบริเวณจุดสูงสุดภายใน 17:0มาตรฐาน และคำนวณโดยอัตโนมัติ โดยตัวรวมคอมพิวเตอร์(Chromcard สำหรับ Windows, ThermoQuest มิลาน อิตาลี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การสกัดและวิเคราะห์ไขมันกรดไขมัน
ปริมาณไขมันทั้งหมดจากเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อที่เปียกถูกสกัดและ
วัด gravimetrically ตามวิธีการของฟอล์ช et al .
( 1957 ) ตัวอย่างกล้ามเนื้อเปียกเป็น homogenised ในคลอโรฟอร์ม : เมทานอล ( C : m : V / V ) โดยใช้อัลตร้า turrax เนื้อเยื่อ disrupter
( ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ Loughborough , UK ) การ homogenates ถูก
กรองและฟอล์ชสารสกัดที่เตรียมไว้ตัวอย่างถูกเก็บบนน้ำแข็ง
ภายใต้ไนโตรเจนระหว่างกระบวนการและสารสกัดไขมันเก็บไว้ใน C : m (
2 : 1 v / v ) ที่ความเข้มข้น 10 มก. / มล. สุดท้ายของไขมันที่  20 8C
ภายใต้ไนโตรเจน สารละลายที่ประกอบด้วย 0.05% ( w / v ) butylated
ไฮดรอกซีโทลูอีน ( บาท ) เป็นสารต้านอนุมูลอิสระ กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์
( ชื่อเสียง ) เตรียมโดยกระบวนการทรานส์เอสเทอริฟิเคชั่นของ catalysed
1 มิลลิกรัม กรดไขมันรวมกับ 01 มิลลิกรัม heptadecanoic acid ( Sigma เคมี
บริษัท , เซนต์ หลุยส์ , USA ) เป็นมาตรฐานภายในโดยใช้ 2 ml ของ 1% ( v /
V ) กรดในเมทานอลและ 1 มิลลิลิตรของโทลูอีนในไนโตรเจน
ที่ 16 ชั่วโมง 50 8C ดิบชื่อเสียงมีความบริสุทธิ์โดย TLC ใน isohexane :
: กรดน้ำส้ม ( อีเทอร์ 90:10:1 , v / v ) และมองเห็นโดยการฉีดพ่น
เบาขอบจานด้วย 1% ( w / v ) ไอโอดีนใน chcl3 . ชื่อเสียง
ถูกขูดจานและตัวอย่างกับ isohexane : ได
อีเทอร์ ( 1 : 1 v / v ) ชื่อเสียงบริสุทธิ์ เป็นอีกครั้งที่ละลายใน isohexane
ที่มีร้อยละ 0.05 บาท และเก็บภายใต้ไนโตรเจนที่  20 8C ก่อน

วิธีโครมาโทกราฟีของเหลว และก๊าซ กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ถูกแยกออกจากกันและ quantified โดยแก๊สโครมาโตกราฟีของเหลว–
( fisons 8000 ชุดฟิน
, เทอร์โม , เฮเมิลสเตดอังกฤษ ) ใช้ CP ขี้ผึ้ง 52cb ซิลิกาคอลัมน์ capillary
( 30 เมตร  0.32 MMI . D . , 0.25 mmfilm หนา ) ( chrompak
, ลอนดอน , UK ) ไฮโดรเจนถูกใช้เป็นแก๊สตัวพา ที่อัตราการไหล
2.5 มล. / นาทีและโปรแกรมอุณหภูมิจาก 50 8C

150 8C 40 8B / นาทีและจาก 150 8C ถึง 225 8C ในอัตรา 2 8B / min
และอุณหภูมิสุดท้ายของ 225 8C ไว้ 5 นาที
บุคคล เมทิลเอสเทอร์ที่ถูกระบุโดยเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่รู้จัก
( น้ำมันปลาทะเล ) พื้นที่สูงสุดของกรดไขมันอยู่
quantified ที่มีการอ้างอิงถึงจุดสูงสุดภายในพื้นที่ของ 17:0
มาตรฐานและคำนวณโดยอัตโนมัติโดยคอมพิวเตอร์ )
( chromcard สำหรับ Windows , thermoquest , มิลาน , อิตาลี )