Frozen stocks were thawed and grown anaerobically overnight in 10 ml TPGY medium at 30 °C (strains 17B, Alaska E, Beluga E and type G) or 37 °C (strains Loch Maree, Hall A Hyper, Okra B, ATCC 3502, 62A and C. sporogenes). These cultures were inoculated at 1 %, v/v, into 500 ml anaerobic TPGY, and grown statically for 18 h at 30 or 37 °C, and the cells were harvested by centrifugation at 4 °C. The wet cell pellets were extracted with chloroform/methanol/water by the method of Bligh & Dyer (1959) , with modifications. The lipid extracts were dried under a stream of nitrogen, while being warmed in a heating block. They were dissolved in chloroform and stored at −20 °C.
เตรียมแช่แข็งหุ้น และปลูก anaerobically ค้างคืนในกลาง TPGY 10 ml ที่ 30 ° C (สายพันธุ์ 17B อลาสกา E, E เบลู และชนิด G) หรือ 37 ° C (สายพันธุ์ลอชมารีรับสัญญาณดาวเทียม Hall A Hyper กระเจี๊ยบเขียว B, ATCC 3502, 62A และ C. sporogenes) วัฒนธรรมเหล่านี้ถูก inoculated 1%, v/v, 500 มิลลิลิตรลงใน TPGY ไม่ใช้ออกซิเจน และโต statically สำหรับ 18 h 30 หรือ 37 ° C และเซลล์ถูกเก็บเกี่ยว โดยการหมุนเหวี่ยงที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส เซลล์เปียกเม็ดที่สกัด ด้วยเมทานอลคลอโรฟอร์ม/น้ำ โดยวิธี Bligh และดายเออร์ (1959), การแก้ไข สารสกัดไขมันถูกแห้งภายใต้กระแสของไนโตรเจน ในขณะที่กำลังอุ่นในบล็อกทำความร้อน พวกเขาละลายในคลอโรฟอร์ม และเก็บไว้ที่ −20 ° c
การแปล กรุณารอสักครู่..
