Fungus strainA strain of M. anisopl

Fungus strain

A strain of M. anisopliae designated “Strain 150” was used in this research. It was obtained from a culture collection of entomopathogenic fungi kept in our laboratory. It was originally isolated from infected larvae of the ground beetle Harpalus caliginosus (Carabidae, Coleoptera). Morphological and molecular characteristics of the fungus species which confirmed its identity as M. anisopliae were formerly confirmed by our laboratory and the laboratory of molecular biology at An-Najah National University. These characteristics were conforming to those described by other investigators for the genus and species of the fungus ( Bridge et al., 1993; Bischoff et al., 2009). For bioassays, the fungus strain was sub-cultured on plates of Sabouraud dextrose agar (SDA) culture medium, then incubated at 20 ± 1 °C for 16 days to produce large numbers of conidia. The conidia produced were harvested then suspended in sterile distilled water containing 0.1% (v/v) Tween 20 using 250 ml screw capped glass bottles. The suspension produced was vigorously shaken for few minutes to get a homogenous suspension then sieved using a small-mesh piece of sterile cheese-cloth to separate the mycelium fragments of the fungus from other constituents of the suspension. A haemocytometer was used for counting the conidia of the original suspension before making any dilution. The concentration of conidial suspension used for bioassays was adjusted at 5.0 × 107 conidia/ml. The choice of this concentration is attributed to the range of effectiveness of this strain against many insects which varies from 1.0 × 107 to 1.0 × 108 conidia/ml (Batta, 2005). Viability of the conidia that were used for bioassays and suspended in the conidial suspension was measured by calculating the % conidia that can germinate. The germination of conidia was based on the formation of a short germ tube when the conidia were suspended in water for 24 h. The calculated % of conidia that germinated after the suspension was 80.2%.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สายพันธุ์เชื้อราสายพันธุ์ของ M. anisopliae กำหนด "150 สายพันธุ์" ถูกใช้ในงานวิจัยนี้ มาจากกลุ่มวัฒนธรรมของ entomopathogenic เชื้อเก็บไว้ในห้องปฏิบัติการของเรา มันเป็นครั้งแรกที่แยกจากการติดเชื้อตัวอ่อนของด้วงดิน caliginosus Harpalus (Carabidae, Coleoptera) ลักษณะสัณฐาน และโมเลกุลของสายพันธุ์เชื้อราซึ่งได้รับการยืนยันข้อมูลประจำตัวเป็น M. anisopliae เดิมได้รับการยืนยันจากห้องปฏิบัติการของเราและห้องปฏิบัติการของอณูชีววิทยาที่มหาวิทยาลัยแห่งชาติที่ Najah ลักษณะเหล่านี้ได้ตามที่อธิบายไว้ โดยนักวิจัยอื่น ๆ ประเภทและชนิดของเชื้อรา (สะพานและ al. 1993 Bischoff et al. 2009) สำหรับการทดลองทางชีววิทยากล้าหาญ สายพันธุ์เชื้อราถูกเพาะเลี้ยงย่อยบนแผ่นของกลางวัฒนธรรม Sabouraud เป็นอาหาร (SDA) จาก นั้นได้รับการกกที่ 20 ± 1 ° C เป็นเวลา 16 วันในการผลิตจำนวนมากของ conidia Conidia ที่ผลิตถูกเก็บเกี่ยว แล้วในน้ำกลั่นที่ผ่านการฆ่าเชื้อที่มี 0.1% (v/v) 20 แต่ใช้ขวดแก้วสกรูที่ปกคลุม ml 250 ระงับการผลิตถูกจังเขย่าสองสามนาทีที่จะระงับการเป็นเนื้อเดียวกันแหลกลาญแล้ว ใช้ผ้ากอซชีผืนตาข่ายเล็กเพื่อแยกชิ้นส่วนยังของเชื้อราจากบุคคลอื่น ๆ การระงับ ใช้แบบ haemocytometer นับ conidia ระงับต้นฉบับก่อนการเจือจางใด ๆ มีการปรับปรุงความเข้มข้นของ conidial ระงับใช้สำหรับการทดลองทางชีววิทยากล้าหาญที่ 5.0 × 107 conidia/ml ทางเลือกของความเข้มข้นนี้คือประกอบช่วงประสิทธิภาพของสายพันธุ์นี้กับแมลงมากมายซึ่งตั้งแต่ 1.0 × 107 ไปจนถึง 1.0 × 108 conidia/ml (นุ 2005) Viability ของ conidia ที่ใช้สำหรับการทดลองทางชีววิทยากล้าหาญ และถูกระงับในการระงับ conidial โดยวัดจากการคำนวณ% conidia ที่สามารถงอก การงอกของ conidia ตามการก่อตัวของหลอดสั้นจมูกเมื่อ conidia ถูกหยุดชั่วคราวในน้ำ 24 ชม %ที่คำนวณได้ของ conidia ที่งอกหลังจากการระงับ 80.2%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เชื้อราสายพันธุ์สายพันธุ์ของ anisopliae เอ็มกำหนด "สายพันธุ์ 150" ถูกนำมาใช้ในการวิจัยครั้งนี้ มันได้รับจากคอลเลกชันวัฒนธรรมของเชื้อราแมลงเก็บไว้ในห้องปฏิบัติการของเรา มันถูกแยกออกจากเดิมที่ติดเชื้อตัวอ่อนของด้วงพื้น Harpalus caliginosus (Carabidae, Coleoptera) ลักษณะทางสัณฐานวิทยาและโมเลกุลของสายพันธุ์เชื้อราซึ่งได้รับการยืนยันตัวตนของมันเป็น anisopliae เอ็มได้รับการยืนยันก่อนโดยห้องปฏิบัติการและห้องปฏิบัติการชีววิทยาโมเลกุลที่-Najah มหาวิทยาลัยแห่งชาติของเรา ลักษณะเหล่านี้ถูกสอดคล้องกับที่อธิบายโดยนักวิจัยอื่น ๆ สำหรับประเภทและสายพันธุ์ของเชื้อรา (สะพาน et al, 1993;.. บิชอฟ et al, 2009) สำหรับ bioassays สายพันธุ์เชื้อราเป็นย่อยที่เพาะเลี้ยงบนจานของ Sabouraud dextrose agar (SDA) กลางวัฒนธรรมแล้วบ่มที่อุณหภูมิ 20 ± 1 ° C เป็นเวลา 16 วันในการผลิตจำนวนมากของสปอร์ สปอร์ที่ผลิตเก็บเกี่ยวระงับแล้วในน้ำกลั่นปลอดเชื้อที่มี 0.1% (v / v) Tween 20 โดยใช้สกรู 250 มลปกคลุมขวดแก้ว การระงับการผลิตเขย่าแรง ๆ ไม่กี่นาทีที่จะได้รับการระงับเนื้อเดียวกันแล้วร่อนโดยใช้ชิ้นส่วนเล็ก ๆ ของตาข่ายหมันชีสผ้าที่จะแยกชิ้นส่วนเส้นใยของเชื้อราจากองค์ประกอบอื่น ๆ ของการระงับ สไลด์นับเม็ดเลือดถูกนำมาใช้สำหรับการนับสปอร์ของการระงับเดิมก่อนที่จะทำการเจือจางใด ๆ ความเข้มข้นของการระงับเชื้อราใช้สำหรับ bioassays ปรับที่ 5.0 × 107 ปอร์ / มล. ทางเลือกของความเข้มข้นนี้จะนำมาประกอบกับช่วงของความมีประสิทธิภาพของสายพันธุ์นี้กับแมลงจำนวนมากที่แตกต่างกันไปจาก 1.0 × 107-1.0 × 108 ปอร์ / มล. (Batta 2005) ความมีชีวิตของสปอร์ที่ถูกนำมาใช้สำหรับ bioassays และระงับในการระงับเชื้อราโดยวัดจากการคำนวณ conidia% ที่สามารถงอก งอกของสปอร์ก็ขึ้นอยู่กับการก่อตัวของหลอดจมูกสั้นเมื่อสปอร์ที่ถูกระงับในน้ำเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ของ% คำนวณของสปอร์ที่งอกหลังจากระงับเป็น 80.2%

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สายพันธุ์เชื้อราสายพันธุ์ของ M . anisopliae เขต " สายพันธุ์ 150 " ถูกใช้ในงานวิจัยนี้ มันได้จากการเพาะเลี้ยงแมลงที่ตายเก็บคอลเลกชันของเชื้อราในห้องปฏิบัติการของเรา แต่เดิมที่แยกได้จากผู้ติดเชื้อหนอนของด้วงดิน harpalus caliginosus ( คาราบิดี้ , Coleoptera ) ลักษณะทางสัณฐานวิทยาและลักษณะโมเลกุลของเชื้อราชนิดที่ยืนยันตัวตนของเชื้อราเป็นเมตร เดิมเป็นการยืนยันโดยห้องปฏิบัติการและห้องปฏิบัติการอณูชีววิทยาใน najah แห่งชาติมหาวิทยาลัย ลักษณะเหล่านี้สอดคล้องกับที่อธิบายไว้โดยนักวิจัยอื่น ๆสำหรับสกุลและชนิดของเชื้อรา ( สะพาน et al . , 1993 ; บิชอป et al . , 2009 ) ให้ละเอียด , เชื้อราสายพันธุ์บนอาหารจานย่อย sabouraud dextrose agar ( SDA ) อาหารเลี้ยงเชื้อ แล้วบ่มที่อุณหภูมิ 20 ° C ± 1 16 วัน เพื่อผลิตจำนวนมากของโคนิเดีย . โคนิเดียผลิตได้เก็บเกี่ยวแล้ว สงสัยเป็นหมันน้ำกลั่นที่มี 0.1 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) Tween 20 ที่ใช้ 250 ml สกรูฝาครอบขวดแก้ว ระงับผลิตคือการให้ความบันเทิงสำหรับไม่กี่นาทีที่จะได้รับการยึดเกาะแล้วใช้ชิ้นเล็กขนาดตาข่ายผ้าชีสเป็นหมัน เพื่อแยกเส้นใย ชิ้นส่วนของเชื้อราจากองค์ประกอบอื่น ๆของการระงับ เป็น haemocytometer ถูกใช้สำหรับการนับโคนิเดียของช่วงล่างเดิมก่อนที่จะตัดสินใจใด ๆเจือจาง ความเข้มข้นของเดียระงับใช้ปรับละเอียด 5.0 × 107 conidia / ml ความเข้มข้นนี้เลือกจากช่วงของประสิทธิผลของสายพันธุ์นี้ กับแมลงหลายซึ่งแตกต่างจาก 1.0 × 107 1.0 × 108 conidia / ml ( กซานเดอร์ บัตตา , 2005 ) ความมีชีวิตของโคนิเดีย ที่ใช้ให้ละเอียดและระงับในการระงับจากวัดจากการคำนวณ % ชนิดที่สามารถงอก การงอกของโคนิเดีย ขึ้นอยู่กับการพัฒนาเป็น germ tube สั้นเมื่อนี้ถูกระงับในน้ำ 24 ชั่วโมง ค่า % ของโคนิเดียที่งอกหลังจากถูกระงับ 80.2 %