Determination of cellulose by detec

Determination of cellulose by detecting glucose as the major
product of digestion by cellulase using thin layer chromatography
and reversed phase high performance liquid chromatography
The dried piece of cellulose obtained as described in Section
2.4 was cut into small 1 mm diameter pieces. The small pieces
of cellulose were digested with 5 units of cellulase at pH 5 for
3 h at 37 ◦C. The separations of the digested products of cellulose
by thin-layer chromatography (TLC) on silica gel (5 cm
×
10 cm)
was performed. The TLC plate was developed at room temperature
using a mobile phase of a saturated isopropanol: 1-butanol: distilled
water solvent (12:5:4). Detection was made by spraying the
dried plate with 5% sulfuric acid in ethanol then heating at 150 ◦C
for 1–2 min (modified from Godin, Poirier, Blomquist, & Tremblay,
1999). The products appeared as brown spots on a white background.
Cellulose without digestion, cellubiose and glucose were
used as controls. To carry out the HPLC separation the sorbent layer
with the same Rf value as glucose was removed into a test tube.
The sorbent layer was extracted with the same solvent used for the
TLC. Reversed phase high performance liquid chromatography was
then performed to analyze for glucose as a product of the digested
cellulose. A standard of glucose was added to the sample to check
the retention time and refractive index. Separation of the digested
cellulose for detecting glucose was investigated by HPLC using a
Zorbax NH2 column 4.6 mm × 250 mm, 5 m performed at 25 ◦C.
The mobile phase was acetonitrile: water (75: 25) with a flow rate of
0.5 mL/min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลลูโลสโดยตรวจหากลูโคสเป็นวิชากำหนดผลิตภัณฑ์ของย่อยอาหารโดยใช้บางชั้น chromatography cellulaseและกลับเฟส chromatography เหลวประสิทธิภาพสูงชิ้นส่วนที่แห้งของเซลลูโลสที่ได้รับตามที่อธิบายไว้ในส่วน2.4 ถูกตัดเป็นชิ้นขนาดเล็ก 1 mm เส้นผ่าศูนย์กลาง ชิ้นเล็ก ๆของเซลลูโลสถูกต้องกับหน่วย cellulase ที่ค่า pH 5 5h 3 ที่ 37 ◦C ประโยชน์ของผลิตภัณฑ์ digested ของเซลลูโลสโดยชั้นบาง chromatography (TLC) กับซิลิก้าเจล (5 ซม.×10 ซม)ที่ดำเนินการ มีพัฒนาแผ่น TLC ที่อุณหภูมิห้องใช้ระยะเคลื่อนของ isopropanol อิ่มตัว: 1-บิวทานอ: กลั่นน้ำตัวทำละลาย (12:5:4) ทำการตรวจสอบ โดยพ่นแห้งจานกับกรดกำมะถัน 5% ในเอทานอลจากนั้น ความร้อนที่ 150 ◦Cสำหรับ 1 – 2 นาที (ปรับเปลี่ยนจาก Godin, Poirier, Blomquist, & Tremblay1999) . ผลิตภัณฑ์ที่ปรากฏเป็นจุดสีน้ำตาลบนพื้นขาวโดยไม่มีการย่อยอาหาร cellubiose และกลูโคสเซลลูโลสได้ใช้เป็นตัวควบคุม การดำเนินการแยก HPLC ชั้นดูดซับตามค่า Rf เป็นกลูโคสถูกเอาลงในหลอดทดสอบชั้นดูดซับถูกสกัด ด้วยตัวทำละลายเดียวกันที่ใช้สำหรับการทีแอลซี กลับเฟส chromatography เหลวประสิทธิภาพสูงได้แล้ว ดำเนินการวิเคราะห์สำหรับกลูโคสเป็นผลิตภัณฑ์ที่ digestedเซลลูโลส มาตรฐานของกลูโคสได้เพิ่มตัวอย่างเพื่อตรวจสอบเวลาเก็บข้อมูลและดรรชนี แยกของที่ต้องสำหรับการตรวจสอบน้ำตาลกลูโคสเซลลูโลสถูกสอบสวน โดย HPLC โดยใช้การZorbax NH2 คอลัมน์ 4.6 มม. × 250 มม. 5 เมตร 25 ◦Cเฟสเคลื่อน acetonitrile: น้ำ (75:25) กับอัตราการไหลของ0.5 mL/นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความมุ่งมั่นของเซลลูโลสโดยการตรวจสอบระดับน้ำตาลเป็นหลัก
ผลิตภัณฑ์ของการย่อยอาหารโดยใช้เซลลูโคชั้นบาง ๆ
และเฟสกลับประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography
ชิ้นแห้งเซลลูโลสที่ได้รับตามที่อธิบายไว้ในมาตรา
2.4 ถูกตัดเป็นขนาดเล็ก 1 ชิ้นมิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง ชิ้นเล็ก ๆ
ของเซลลูโลสถูกย่อยด้วย 5 หน่วยงานของเซลลูเลสที่ pH 5
3 ชั่วโมงที่ 37 ◦C การแยกส่วนของผลิตภัณฑ์ที่ย่อยเซลลูโลส
โดยโคบางชั้น (TLC) บนซิลิกาเจล (5 ซม.
×
10 ซม.)
ได้ดำเนินการ แผ่น TLC ได้รับการพัฒนาที่อุณหภูมิห้อง
โดยใช้เฟสเคลื่อนที่ของ isopropanol อิ่มตัว: 1 บิวทานอ: กลั่น
ตัวทำละลายน้ำ (12: 5: 4) การตรวจสอบที่ถูกสร้างขึ้นโดยการฉีดพ่น
แผ่นแห้ง 5% กรดกำมะถันในเอทานอลจากนั้นความร้อนที่ 150 ◦C
1-2 นาที (ดัดแปลงมาจากโก, Poirier, Blomquist & Tremblay,
1999) ผลิตภัณฑ์ที่ปรากฏเป็นจุดสีน้ำตาลบนพื้นสีขาว.
เซลลูโลสโดยไม่ต้องย่อยอาหาร cellubiose และกลูโคสถูก
นำมาใช้เป็นตัวควบคุม เพื่อดำเนินการแยก HPLC ชั้นดูดซับ
ที่มีค่า Rf เดียวกับกลูโคสจะถูกลบออกลงในหลอดทดสอบ.
ชั้นดูดซับถูกสกัดด้วยตัวทำละลายเดียวกับที่ใช้สำหรับ
TLC กลับเฟสของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงได้รับการ
ดำเนินการแล้วในการวิเคราะห์สำหรับกลูโคสเป็นผลิตภัณฑ์ของที่ย่อย
เซลลูโลส มาตรฐานของกลูโคสถูกบันทึกอยู่ในตัวอย่างเพื่อตรวจสอบ
เวลาการเก็บรักษาและดัชนีหักเห แยกย่อย
เซลลูโลสในการตรวจหาระดับน้ำตาลได้รับการตรวจสอบโดยวิธี HPLC โดยใช้
คอลัมน์ NH2 Zorbax 4.6 มม× 250 มม, 5 เมตรดำเนินการใน 25 ◦C.
เฟสเคลื่อนที่เป็น acetonitrile: น้ำ (75: 25) มีอัตราการไหลของ
0.5 มิลลิลิตร / นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การหาปริมาณเซลลูโลส โดยการตรวจจับกลูโคสเป็นหลัก
ผลิตภัณฑ์ของการย่อยอาหารโดยเอนไซม์ใช้ชั้นบางและกลับเฟสโครมาโทกราฟี

วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงแห้งชิ้นของเซลลูโลสที่ได้อธิบายไว้ในส่วน
2.4 ถูกตัดเป็นก้อนเล็ก ๆขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 1 มม. ชิ้น เล็กชิ้น
เซลลูโลสถูกย่อยด้วยเอนไซม์ที่ pH 5 หน่วย 5
3 H ที่ 37 ◦ Cการแยกของย่อยผลิตภัณฑ์เซลลูโลส
โดย chromatography ( TLC ) พบว่าซิลิกาเจล ( 5 cm
×

10 ซม. ) กำหนด ที่ถูกพัฒนาขึ้นใน TLC plate
อุณหภูมิห้องโดยใช้เฟสเคลื่อนที่ของกระแสอิ่มตัว : บิวทานอล : กลั่น
น้ำตัวทำละลาย ( 12:5:4 ) การตรวจสอบทำโดยฉีด
แผ่นแห้ง 5% กรดซัลฟูริคในเอทานอล จากนั้นความร้อน 150 C
◦1 – 2 นาที ( ดัดแปลงจาก Godin poirier บลอมควิสต์ , , ,
& เทรมเบลย์ , 1999 ) ผลิตภัณฑ์ที่ปรากฏเป็นจุดสีน้ำตาลบนพื้นหลังสีขาว โดยไม่มีการย่อยเซลลูโลส
,
cellubiose และกลูโคสถูกใช้เป็นตัวควบคุม . ดําเนินการโดยการดูดซับชั้น
กับค่า RF เดียวกันเป็นกลูโคสจะถูกลบออกในหลอดทดลอง .
ดูดซับชั้นถูกสกัดด้วยตัวทำละลายเดียวกันใช้สำหรับ
TLC .วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงเฟสกลับถูก
แล้วทำการวิเคราะห์กลูโคสเป็นผลิตภัณฑ์ที่ย่อยสลาย
เซลลูโลส มาตรฐานของกลูโคสเพิ่มตัวอย่างการตรวจสอบ
ในเวลาและดัชนีการหักเห . การแยกของย่อยเซลลูโลสให้ตรวจหากลูโคส
ถูกตรวจสอบด้วย HPLC โดยใช้
คอลัมน์ zorbax nh2 × 4.6 มม. 250 มม. , 5  M แสดงที่ 25 ◦
Cระยะที่เคลื่อนที่อยู่ไนน้ำ ( 75 : 25 ) ด้วยอัตราการไหล
0.5 มิลลิลิตร / นาที