2.1. Collection of the plant materi

2.1. Collection of the plant materials
The leaves of plants, Tinospora cardifolia (Thunb.) Miers, Arum maculatum L. and Andrographis paniculata (Burm. f.) Wall ex Nees were collected from Pharmaceutical Garden, IMS, BHU, Varanasi, India, and submitted in the herbarium of Botanical Survey of India (BSI) under the voucher specimen no. 417577, 11177 and 414228, respectively.
2.2. Test organisms
The bacterial strains of Escherichia coli, ATCC 35218, and Pseu- domonas aeruginosa ATCC 27853, Mycobacterium tuberculosis H37Rv, S. aureus ATCC 25923, local isolates of methicillin resistant S. aureus BHU 011 and Enterococcus faecalis were used in this study. Antibiotic sensitivity pattern of these test or- ganisms were tested by using FDA recommended antibiotics and standard methodology.
2.3. Preparation of extracts from plant leaves
The freshly collected leaves were washed with distilled water and air-dried at 40 C and powdered. The powdered material was extracted with different solvents (Hexane, Methanol and water) by freeze- thaw method. The extracts were collected in sterile bottles, reduced to dryness and stored at 2e8 C until use.
2.4. Antibacterial assays
Qualitative antibacterial assays were performed by agar well diffusion method. Different volumes (50e300 ml) of extracts dissolvedin distilled water (10 mg/ml) were directly applied to
the wells made on surface of MHA containing bacterial lawn. Control wells received only distilled water. Positive control wells received streptomycin (10 mg) except in case of MRSA and E. faecalis, where streptomycin (300 mg) was used as pos- itive control.Afterdiffusion, plateswereincubatedat37Cfor 18 h and zones of growth inhibition were measured. Anti- mycobacterial activity of the plant extracts was tested by In- direct proportion method. The assay was performed on LJ medium with or without the plant extracts (05e20 mg ml1). The minimuminhibitoryconcentration(MIC)wasdetermined by agar dilution method. The concentration of plant extracts used were in the range of 0.25e08 mg ml1 and plates without any extracts were used as control for MIC determination.
2.5. Fractionation of active plant extract and its characterization
75% methanol extracts of A. paniculata leaves were subjected to thin layer chromatography (TLC) for separation of anti- bacterial fraction. Silica gel-60 was used as stationary phase whereas the mobile phase was the mixture of chloroform and methanol (7:3). The bands were visualized in a UV trans- illuminator and the position of bands was marked. The bands were scratched from TLC plates, dissolved in methanol, reduced to dryness, redissolved in deionized water and tested for its antibacterial activity against S. aureus ATCC 25923 by Macrobroth dilution method. The active fraction was sub- jected to various phytochemical tests according to conven- tional methods7 to determine its chemical nature.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.1 การเก็บวัสดุโรงงานใบของพืช Tinospora cardifolia (Thunb) Miers อารัม maculatum L. และทะลาย (Burm. f) ผนัง ex Nees ถูกรวบรวมไว้จาก สวนยา IMS บุหงา พาราณสี อินเดีย และส่งในหอพรรณไม้ของพฤกษศาสตร์สำรวจของอินเดีย (BSI) ภายใต้สำคัญตัวอย่างหมายเลข 417577, 11177 และ 414228 ตามลำดับ2.2 การทดสอบสิ่งมีชีวิตสายพันธุ์แบคทีเรีย Escherichia coli, ATCC 35218 และ Pseu domonas aeruginosa ATCC 27853 มัยโคแบคทีเรียวัณโรค H37Rv หมอเทศข้างลาย S. ATCC 25923 เครื่องแยกของหมอเทศข้างลาย S. methicillin ทน 011 บุหงาและ Enterococcus faecalis ใช้ในการศึกษานี้ รูปแบบความไวต่อยาปฏิชีวนะของการทดสอบเหล่านี้ หรือ-ganisms ทดสอบโดย FDA แนะนำยาและวิธีมาตรฐาน2.3 การเตรียมสารสกัดจากพืชใบใบไม้สดรวบรวมถูกล้าง ด้วยน้ำกลั่น และ air-dried ที่ 40 C และผง วัสดุผงที่สกัด ด้วยหรือสารทำละลายต่าง ๆ (โพลี เมทานอล และน้ำ) โดยวิธีการแช่แข็ง-thaw สารสกัดได้เก็บไว้ในขวดที่ฆ่าเชื้อ ลดความแห้งกร้าน และเก็บไว้ที่ 2e8 C จนใช้2.4. ยาปฏิชีวนะ assaysAssays ต้านเชื้อแบคทีเรียคุณภาพได้ดำเนินการ โดยวิธี agar แพร่ดี ไดรฟ์ข้อมูลอื่น (มล 50e300) สารสกัดจาก dissolvedin กลั่นน้ำ (10 mg/ml) ได้โดยตรงกับthe wells made on surface of MHA containing bacterial lawn. Control wells received only distilled water. Positive control wells received streptomycin (10 mg) except in case of MRSA and E. faecalis, where streptomycin (300 mg) was used as pos- itive control.Afterdiffusion, plateswereincubatedat37Cfor 18 h and zones of growth inhibition were measured. Anti- mycobacterial activity of the plant extracts was tested by In- direct proportion method. The assay was performed on LJ medium with or without the plant extracts (05e20 mg ml1). The minimuminhibitoryconcentration(MIC)wasdetermined by agar dilution method. The concentration of plant extracts used were in the range of 0.25e08 mg ml1 and plates without any extracts were used as control for MIC determination.2.5. Fractionation of active plant extract and its characterization75% methanol extracts of A. paniculata leaves were subjected to thin layer chromatography (TLC) for separation of anti- bacterial fraction. Silica gel-60 was used as stationary phase whereas the mobile phase was the mixture of chloroform and methanol (7:3). The bands were visualized in a UV trans- illuminator and the position of bands was marked. The bands were scratched from TLC plates, dissolved in methanol, reduced to dryness, redissolved in deionized water and tested for its antibacterial activity against S. aureus ATCC 25923 by Macrobroth dilution method. The active fraction was sub- jected to various phytochemical tests according to conven- tional methods7 to determine its chemical nature.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . คอลเลกชันของพืช
ใบของพืช tinospora cardifolia ( Thunb . ) Miers อารัม maculatum , L . และฟ้าทะลายโจร ( Burm . F . ) Wall ex Nees เก็บตัวยาสวนตัว BHU เมืองพาราณสี ประเทศอินเดีย , , , และแสดงความคิดเห็นในการสำรวจพืชสมุนไพรของอินเดีย ( BSI ) ภายใต้คูปองตัวอย่างที่ไม่ 417577 11177 414228 , และ , ตามลำดับ .
2.2 . ทดสอบสิ่งมีชีวิต
สายพันธุ์ของเชื้อแบคทีเรีย Escherichia coli ATCC 35218 และ pseu - domonas aeruginosa ATCC นำน้ำมันระเหยเชื้อวัณโรค , h37rv , S . aureus ATCC 25923 , ท้องถิ่นเชื้อ S . aureus เมทิซิลลินทนภู 011 เอ็นเทโรค็อกคัส faecalis และใช้แบบสอบถาม แบบแผนความไวของการทดสอบยาปฏิชีวนะเหล่านี้หรือ - ganisms ทดสอบโดยใช้ FDA แนะนำยาปฏิชีวนะและวิธีการมาตรฐาน
2.3การเตรียมสารสกัดจากใบพืช
เก็บใบสดล้างด้วยน้ำกลั่นและอากาศแห้งที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียส และ  ผง วัสดุผงที่สกัดด้วยตัวทำละลายที่แตกต่างกัน ( เฮกเซน เมทานอลและน้ำแข็ง - ละลายโดยวิธี สารสกัดถูกเก็บในขวดฆ่าเชื้อลดความแห้งกร้านและเก็บไว้ที่ 2e8 จนใช้  C .
2.4 . แบคทีเรีย )
ตรวจคุณภาพต้านเชื้อแบคทีเรียได้ด้วยวิธี agar diffusion . ปริมาณที่แตกต่างกัน ( 50e300 ml ) สารสกัดจาก dissolvedin น้ำกลั่น ( 10 mg / ml ) มาใช้โดยตรง

บ่อทำบนพื้นผิวของสนามหญ้า MHA ที่มีเชื้อแบคทีเรีย บ่อควบคุมที่ได้รับน้ำกลั่น บ่อควบคุมบวกได้รับยารักษา ( 10 mg ) ยกเว้นกรณีของเชื้อ E . faecalis และ ,ที่สเตร็ปโตมัยซิน ( 300 มิลลิกรัม ) ใช้ POS - ควบคุม itive . afterdiffusion plateswereincubatedat37 ,  C เป็นเวลา 18 ชั่วโมง และโซนของการยับยั้งการเจริญเติบโต คือ วัด ต่อต้าน - เวลากิจกรรมของสารสกัดพืชทดสอบโดยวิธีสัดส่วนโดยตรง ( คือใช้แอลเจ กลางมี หรือ ไม่มี สารสกัดจากพืช ( 05e20 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร  1 )การพิจารณา minimuminhibitoryconcentration ( MIC ) โดยวิธี agar dilution . ความเข้มข้นของสารสกัดจากพืชที่ใช้ในช่วง 0.25e08 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร และ  1 แผ่น ไม่มีสารสกัดที่ใช้ควบคุมกำหนดไมค์
2.5 การใช้สารสกัดจากพืชและสารสกัดเมทานอลของลักษณะ
75% ของ