The oysters used in the present study were produced in 2012 at the
Ifremer experimental hatchery in La Tremblade (Charente, France). To
produce diploid and triploid oysters, 30 diploid females, 10 diploid
males and 15 tetraploidmaleswere selected as genitors. Diploid oysters
were three-year-old individuals, bought from local oyster farmers
working exclusively with wild-caught spat. These diploid oysters were
conditioned to full maturation in an open circulating system at
20–22 °C. Tetraploid oysters used to produce triploid progeny in
At the end of oyster gametogenesis, gametes were collected from
diploid and tetraploid oysters by gonad stripping, then suspended in
1 μm filtered sea water (FSW, 24 °C). Eggs from the 30 diploid females
were collected and divided into two pools. The first pool was fertilized
using sperm collected from the 10 diploid males to produce diploid
larvae, and the second poolwas fertilized by spermfromthe 15 tetraploid
males, to produce triploid larvae. Then, these diploid and triploid larvae
were transferred to 150 L tanks filled with FSWand cultured under
standard rearing conditions until metamorphosis (24 °C, 100
larvae mL−1, fed with a mixture of microalgae: Isochrysis galbana,
Chaetoceros gracili and Skeletonema costatum). DNA ploidy level of
each batch was regularly verified by flow cytometry, according to
Barranger et al. (2014).
หอยนางรมที่ใช้ในการศึกษาปัจจุบันมีการผลิตในปี 2012
ที่โรงเพาะฟักทดลองIfremer ใน La Tremblade (Charente, ฝรั่งเศส) เพื่อการผลิตซ้ำและหอยนางรม triploid 30 หญิงซ้ำซ้ำ 10 เพศชายและ 15 tetraploidmaleswere เลือกเป็น genitors หอยนางรมซ้ำเป็นบุคคลที่สามปีซื้อจากเกษตรกรหอยนางรมท้องถิ่นทำงานเฉพาะกับถ่มน้ำลายป่าที่จับ หอยนางรมซ้ำเหล่านี้ได้รับเงื่อนไขที่จะเจริญเติบโตเต็มรูปแบบในการไหลเวียนของระบบเปิดที่20-22 องศาเซลเซียส หอยนางรม tetraploid ใช้ในการผลิตลูกหลาน triploid ในตอนท้ายของการเกิดเซลล์สืบพันธุ์หอยนางรม, เซลล์สืบพันธุ์ที่ถูกเก็บรวบรวมจากหอยนางรมซ้ำและ tetraploid โดยลอกอวัยวะสืบพันธุ์ระงับแล้วใน 1 ไมครอนกรองน้ำทะเล (FSW, 24 ° C) ไข่จาก 30 หญิงซ้ำถูกเก็บรวบรวมและแบ่งออกเป็นสองสระว่ายน้ำ สระว่ายน้ำเป็นครั้งแรกที่การปฏิสนธิโดยใช้สเปิร์มที่เก็บรวบรวมจาก 10 เพศซ้ำในการผลิตซ้ำตัวอ่อนและpoolwas สองปฏิสนธิโดย spermfromthe 15 tetraploid เพศชายในการผลิตตัวอ่อน triploid จากนั้นเหล่าตัวอ่อนซ้ำและ triploid ถูกถ่ายโอนไป 150 ถัง L เต็มไปด้วย FSWand เลี้ยงภายใต้เงื่อนไขการเลี้ยงตามมาตรฐานจนกระทั่งการเปลี่ยนแปลง(24 ° C, 100 ตัวอ่อน mL-1 อาหารที่มีส่วนผสมของสาหร่าย: Isochrysis galbana, gracili Chaetoceros และ Skeletonema costatum) . ระดับ ploidy ดีเอ็นเอของแต่ละชุดถูกตรวจสอบอย่างสม่ำเสมอโดยการไหลภูมิคุ้มกันตามBarranger et al, (2014)
การแปล กรุณารอสักครู่..