Polyphenol content and composition analyses
The extraction of PPs from the yoghurts was performed using an
Accelerated Solvent Extractor (ASE, 300, Dionex, Sunnyvale, CA). A
quantity (5 g) of yoghurt sample was mixed with 8.5 g Celite
(diatomaceous earth; Manville Service Corporation, USA), before
being transferred into the ASE Dionex 33 mL stainless steel
extraction cells. Three cycles of extractions (with 5 min heating and
10 min static time) were carried out at 40 C and 1500 psi under N2
using n-hexane (100%), acetone (100%) and methanol (100%). The
solvent containing extracted PPs was then collected, concentrated
using the Ultra-Low Cold Trap Centrivap (Model 78100-01, Labconco
Corp., Kansas City, MO), and dried using a freeze drier (Telstar
Cryodos-80, Telstar Industrial SL, Spain). The extracts were kept
at 80 C and reconstituted in 25% methanol for FolineCiocalteu
assay and HPLC analysis.
The total extractable PP content (TEPC) was analysed using the
method of Singleton, Orthofer, and Lamuela-Raventos (1999) and
expressed as catechin equivalent (CtE). The absorbance at 760 nm
was detected using a microplate reader (SpectraMax Plus 384,
Molecular Devices, Sunnyvale, California, USA).
The High Performance Liquid Chromatography (HPLC) profiling
of individual PPs was performed following the methods of
Stevenson et al. (2006), using a Shimadzu analytical HPLC equipped
with a diode-array detector (SPD-M10AVP), a Synergi Polar-RP
ether-linked column (250 4.6 mm, 4 mm particle size, 80 A
ether-linked column; Phenomenex, Auckland, New Zealand). The
mobile phases (A) acetonitrile þ 0.1% formic acid, and (B) acetonitrile:
water:formic acid (5:92:3) were pumped at 1.5 mL/min at
45 C. Injection volume was 40 mL. Individual PPs were identified
based on their retention time and absorbance maximum (lmax), and
through comparing to the BPE anthocyanidin peaks that were
identified in our previous published papers (Slimestad & Solheim,
2002; Sun-Waterhouse, Sivam, et al., 2011; Sivam, Sun-
Waterhouse, Waterhouse, Quek, & Perera, 2011). External standards
used include epicatechin, catechin, ferulic acid, salicylic acid,
protocatechuic acid, caffeic acid, p- and o-coumaric acids, and
Cyanidin.
วิเคราะห์เนื้อหาและองค์ประกอบของ Polyphenolทำการสกัด PPs จาก yoghurts ใช้เป็นเร่งระบายเป็นตัวทำละลาย (ASE, 300, Dionex, Sunnyvale, CA) Aปริมาณ (5 กรัม) ของโยเกิร์ตอย่างถูกผสมกับ 8.5 g Celite(ดินเบา บริษัท Manville บริการ สหรัฐอเมริกา), ก่อนการโอนย้ายเป็น ASE Dionex 33 mL สเตนเลสแยกเซลล์ รอบสามของสกัด (มีเครื่องทำความร้อน 5 นาที และ10 นาทีเวลาคงที่) ได้ดำเนินการใน 40 C และ 1500 psi ภายใต้ N2ใช้เอ็นเฮกเซน (100%), อะซิโตน (100%) และเมทานอล (100%) ที่แล้วรวบรวมไว้ ประกอบด้วย PPs แยกตัวทำละลายเข้มข้นใช้ Ultra-Low เย็นดัก Centrivap (รุ่น 78100-01, Labconcoคอร์ป แคนซัสซิตี้ MO), และใช้การแช่แข็งแห้ง (Telstar แห้งCryodos-80, Telstar อุตสาหกรรม SL สเปน) สารสกัดได้เก็บไว้ที่ 80 C และ reconstituted ในเมทานอล 25% สำหรับ FolineCiocalteuทดสอบและวิเคราะห์ HPLCรวม extractable PP เนื้อหา (TEPC) คือ analysed โดยใช้การวิธีเดี่ยว Orthofer และ Lamuela-Raventos (1999) และแสดงเป็นเทียบเท่าสารสกัดจาก (CtE) Absorbance ที่ 760 nmพบใช้อ่าน microplate (SpectraMax บวก 384โมเลกุลอุปกรณ์ Sunnyvale แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา)การสร้างโพรไฟล์สูงประสิทธิภาพของเหลว Chromatography (HPLC)ของแต่ละ PPs ได้ดำเนินการตามวิธีการสตีเวนสัน et al. (2006), โดยใช้ HPLC วิเคราะห์ Shimadzu พร้อมพร้อมกับไดโอดอาร์เรย์จับ (SPD-M10AVP), RP-ขั้วโลกที่ Synergiคอลัมน์ลิงค์อีเทอร์ (250 4.6 mm, 4 mm ขนาดอนุภาค 80 Aคอลัมน์ ลิงค์อีเทอร์ Phenomenex โอ๊คแลนด์ นิวซีแลนด์) ที่ระยะเคลื่อนที่ (A) acetonitrile þ 0.1% กรด และ (ข) acetonitrile:น้ำ: กรด (5:92:3) ถูกสูบที่ 1.5 mL/min ที่45 C. ฉีดปริมาณ 40 mL ได้ ระบุแต่ละ PPsการรักษาเวลาและ absorbance สูงสุด (lmax), และโดยเทียบกับ BPE anthocyanidin แห่งที่ระบุในของเราก่อนหน้านี้เผยแพร่เอกสาร (Slimestad และ Solheim2002 ซัน-Waterhouse, Sivam และ al., 2011 Sivam ซัน-Waterhouse, Waterhouse สซาเควก และ Perera, 2011) มาตรฐานภายนอกใช้รวม epicatechin สารสกัดจาก กรด ferulic กรดซาลิไซลิprotocatechuic กรด กรด caffeic กรด p - และ o-coumaric และCyanidin
การแปล กรุณารอสักครู่..

เนื้อหา Polyphenol และวิเคราะห์องค์ประกอบ
สกัดจากพีพีจากโยเกิร์ตได้รับการดำเนินการโดยใช้
ตัวทำละลายเร่งดูด (ASE, 300, Dionex, ซันนีเวล, แคลิฟอร์เนีย)
ปริมาณ (5 กรัม) ของกลุ่มตัวอย่างโยเกิร์ตผสมกับ 8.5 กรัม Celite?
(ดินเบา; Manville บริการคอร์ปอเรชั่นสหรัฐอเมริกา) ก่อนที่จะ
ถูกโอนเข้า ASE Dionex 33 มิลลิลิตรสแตนเลส
เซลล์สกัด สามรอบของการสกัดสาร (5 นาทีความร้อนและ
10 นาทีเวลาคงที่) ได้ดำเนินการที่ 40 องศาเซลเซียสและ 1,500 ปอนด์ต่อตารางนิ้วภายใต้ N2
ใช้เฮกเซน (100%), อะซิโตน (100%) และเมทานอล (100%)
ตัวทำละลายบรรจุสกัดพีพีถูกเก็บรวบรวมแล้วเข้มข้น
โดยใช้ Centrivap ดักเย็นต่ำเป็นพิเศษ? (รุ่น 78100-01, Labconco
คอร์ป, Kansas City, MO) และแห้งโดยใช้เครื่องทำแห้งแบบแช่แข็ง (Telstar
Cryodos-80, เทลสตาอุตสาหกรรม SL, สเปน) สารสกัดถูกเก็บไว้
ที่ 80 องศาเซลเซียสและสร้างขึ้นในเมทานอล 25% สำหรับ FolineCiocalteu
ทดสอบและการวิเคราะห์ HPLC.
เนื้อหา PP ที่สกัดได้ทั้งหมด (ก.ค.ศ. ) ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้
วิธีการของโทน Orthofer และ Lamuela-Raventos (1999) และ
แสดงเป็น เทียบเท่า catechin (CTE) ดูดกลืนแสงที่ 760 นาโนเมตร
ได้รับการตรวจพบโดยใช้ผู้อ่าน microplate (SpectraMax พลัส 384,
อุปกรณ์โมเลกุลซันนีเวล, แคลิฟอร์เนียสหรัฐอเมริกา).
ที่มีประสิทธิภาพสูง Chromatography เหลว (HPLC) โปรไฟล์
ของพีพีของแต่ละบุคคลได้ดำเนินการตามวิธีการของ
สตีเวนสันและคณะ (2006) โดยใช้การวิเคราะห์ HPLC Shimadzu ติดตั้ง
กับเครื่องตรวจจับไดโอดอาร์เรย์ (SPD-M10AVP) Synergi? Polar-RP
คอลัมน์อีเทอร์เชื่อมโยง (250 4.6 มม, 4 มมขนาดอนุภาค 80?
คอลัมน์อีเทอร์เชื่อมโยง; Phenomenex, โอ๊คแลนด์, นิวซีแลนด์)
ขั้นตอนมือถือ (A) acetonitrile þ 0.1% กรดและ (B) acetonitrile:
น้ำ: กรด (5: 92: 3) ได้รับการสูบที่ 1.5 มิลลิลิตร / นาทีที่
45 C? ปริมาณการฉีดเป็น 40 มล พีพีบุคคลที่ถูกระบุ
ขึ้นอยู่กับเวลาการเก็บรักษาของพวกเขาและการดูดกลืนแสงสูงสุด (LMAX) และ
ผ่านเมื่อเทียบกับยอด BPE anthocyanidin ที่ได้
ระบุไว้ในเอกสารเผยแพร่ก่อนหน้านี้ (Slimestad & เฮล์ม,
2002. อาทิตย์วอเตอร์เฮาส์ Sivam, et al, 2011 ; Sivam, อาทิตย์
วอเตอร์เฮาส์วอเตอร์เฮาส์ Quek และเพียร์รา, 2011) มาตรฐานภายนอก
ใช้รวม epicatechin, catechin, กรด ferulic กรดซาลิไซลิ,
กรด protocatechuic กรด caffeic, p- และกรด o-coumaric และ
cyanidin
การแปล กรุณารอสักครู่..

ปริมาณโพลีฟีนอล และวิเคราะห์องค์ประกอบ
การสกัด PPS จากโยเกิร์ตมีการใช้ตัวทำละลายสกัด
เร่ง ( ASE , 300 , DIONEX Sunnyvale , CA ) a
( 5 กรัม ) โยเกิร์ตปริมาณตัวอย่างที่ผสมกับ 8.5 G ได้ดี
( ดินเบา ; ตะวันออกกลางบริการ Corporation , USA ) ก่อนที่จะถูกโอนเข้าไปในเมล์
DIONEX 33 ml สแตนเลสแยกเซลล์รอบสามของทีม ( 5 นาที 10 นาที ความร้อนและ
สถิตเวลา ) ได้ดำเนินการใน 40 C 1500 psi ภายใต้การบีบ N2
( 100% ) อะซีโตนและเมทานอล ( 100% ) ( 100% )
ตัวทำละลายที่สกัด PPS กลุ่มตัวอย่างเข้มข้น
ใช้ Ultra Low กับดักเย็น centrivap ( แบบ 78100-01 แล็บคอนโก้
, คอร์ป , แคนซัส ซิตี้ โม ) , และแห้งใช้ตรึงแห้ง ( telstar cryodos-80
,telstar อุตสาหกรรม SL , สเปน ) สารสกัดไว้
ที่ 80 C และสร้างในเมทานอล 25% สำหรับการทดสอบและการวิเคราะห์ HPLC folineciocalteu
.
เนื้อหาทั้งหมด PP ปริมาณ ( tepc ) วิเคราะห์โดยใช้วิธีของ Singleton orthofer
, , และ lamuela raventos ( 1999 ) และ
แสดงเป็น Catechin เทียบเท่า ( ETC ) นที่ 760 nm
ถูกตรวจพบใช้พื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( อ่าน 384 spectramax บวก
,อุปกรณ์ , ซันนีเวล , แคลิฟอร์เนีย ( USA ) .
ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography ( HPLC ) โปรไฟล์ของ PPS บุคคลทำการ
ต่อไปนี้วิธีการ
สตีเวนสัน et al . ( 2006 ) โดยใช้การวิเคราะห์ HPLC อุปกรณ์
กับ Shimadzu โอดเรย์ตรวจจับ ( spd-m10avp ) , คอลัมน์ synergi ขั้วโลก RP
อีเทอร์เชื่อมโยง ( 250 4.6 มม. 4 มม. ขนาด 80 เป็น
อีเทอร์เชื่อมโยงคอลัมน์ ; phenomenex โอ๊คแลนด์นิวซีแลนด์ )
เฟสเคลื่อนที่ ( ) ไนþ 0.1% กรด และ ( ข ) ไน :
น้ำ : กรด ( 5:92:3 ) ถูกสูบ 1.5 มิลลิลิตร / นาทีที่ 45
C ฉีดปริมาณ 40 มล. บุคคล PPS ระบุ
ขึ้นอยู่กับเวลาการเก็บรักษาของพวกเขาและค่าการดูดกลืนแสงสูงสุด ( Lmax
) โดยเปรียบเทียบกับยอดที่
BPE แอนโทไซยานิดินระบุในเอกสารเผยแพร่ก่อนหน้านี้ของเรา ( slimestad & Solheim
2002 ; ซันวอเตอร์เฮาส์ sivam , et al . , 2011 ; sivam , Sun -
โอโอ เคว็ก&เปเรร่า , , , , 2011 ) มาตรฐานภายนอก
ใช้แคเทชิน Catechin , รวม , ferulic acid กรด salicylic กรด Caffeic โปรโตคาเทคซู ค
, P - o-coumaric และกรดไซยานิดินและ
.
การแปล กรุณารอสักครู่..
