In vitro experiments2.3.1. Confront

In vitro experiments
2.3.1. Confrontation tests
2.3.1.1. Dual culture of BCA and F. solani mycelia. The antagonistic
activity of Trichoderma spp. (BCA) was evaluated on PDA medium,
using the direct confrontation method as described by Comporta
(1985). Briefly, two discs (5 mm) obtained from one week old culture on PDA of Trichoderma sp. and F. solani respectively were
placed at opposite points on the same diagonal line at 1 cm distance from the edge. Three plates were considered for each
fungus-fungus interaction and the biological control potential of
each endophyte isolate against F. solani was studied. One disc each
of pathogenic agent (F. solani) and BCA (endophyte) alone was prepared as control. Both the dual and individual cultures were incubated at 25 ± 2 C and the linear growth of the fungi was measured
daily for 10 consecutive days. The growth inhibition percentage (%
I) was calculated at the last day following incubation using the formula (1) given below (Mokhtar and Aid, 2013):
ð%IÞ ¼ ð1  T=CÞ  100 ð1Þ
where %I = Percent Inhibition of pathogen growth by antagonists;
C = Radial growth in control (cm); T = Radial growth in the test culture (cm).
Additional biocontrol parameters were determined as described
by Pakdaman et al. (2013) including (i) days required for the two
colonies to come into contact (C); (ii) days required for the BCA
to fully grow over the pathogen colony (Z); (iii) days required for
the BCA to fully grow over the plate (M); (iv) the radial growth distance (in cm) of pathogen colony between the point of inoculation
and the marginal point of contact with the BCA growth zone (P);
(v) the pathogen resistance index (R) to the BCA was defined as a
ratio of Z/M based on the periods required for the full growth of
a fungal BCA in the presence (Z) and absence (M) of pathogen
(Pakdaman et al., 2013).
In addition, the Pakdaman’s biological control index (PBCI)
(Pakdaman et al., 2013) combining temporal parameters and
pathogen growth parameter was calculated following the formula
(2) below.
PBCI ðin cm1Þ ¼ M ðin daysÞ=Z ðin daysÞ  P ðin cmÞ ð2Þ

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การทดลองในหลอดทดลอง2.3.1 การเผชิญหน้าทดสอบ2.3.1.1 คู่วัฒนธรรมของ BCA และ F. solani mycelia การต่อต้านประกอบกิจกรรมของเชื้อ (BCA) บน PDAใช้วิธีการเผชิญหน้าโดยตรงตามที่อธิบายไว้ โดย Comporta(1985) สั้น ๆ สองแผ่น (5 มม.) ได้รับจากวัฒนธรรมหนึ่งสัปดาห์เก่าเอสพี PDA Trichoderma และ F. solani ตามลำดับได้อยู่ตรงข้ามกับจุดบนเส้นทแยงมุมเดียวกันที่ระยะห่าง 1 ซม.จากขอบ แผ่นที่สามได้รับการพิจารณาสำหรับแต่ละเชื้อราเชื้อราโต้และศักยภาพการควบคุมทางชีวภาพเป็นศึกษาแต่ละโปรตีน endophyte กับ F. solani ดิสก์หนึ่งแผ่นตัวแทนทำให้เกิดโรค (F. solani) และ BCA (endophyte) เพียงอย่างเดียวถูกเตรียมเป็นตัวควบคุม ทั้งคู่ และแต่ละวัฒนธรรมได้รับการกกที่ 25 ± 2 C และมีวัดการเติบโตของเชื้อราเชิงเส้นทุกวัน 10 วันติดต่อกัน เปอร์เซ็นต์การยับยั้งการเจริญเติบโต (%I) คำนวณในวันสุดท้ายไปบ่มโดยใช้สูตร (1) ต่ำกว่า (Mokhtar และช่วยเหลือ 2013):ð% IÞ ¼ ð1 T = CÞ 100 ð1Þที่ %I =เปอร์เซ็นต์การยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อโรคโดยอริC =เติบโตรัศมีควบคุม (cm); T =รัศมีเจริญเติบโตในการทดสอบ (ซม.)กำหนดพารามิเตอร์เพิ่มเติม biocontrol ดังที่โดย Pakdaman et al. (2013) รวม (i) ต้องการวันที่สองอาณานิคมเพื่อติดต่อ (C); (ii) จำเป็นสำหรับการ BCA วันจะเต็มโตเชื้ออาณานิคม (Z); (iii) วันที่จำเป็นสำหรับBCA จะโตเต็มแผ่น (M); (iv)รัศมีเจริญเติบโตระยะทาง (ซม) อาณานิคมของเชื้อโรคระหว่างจุดของ inoculationและจุดเกิดของการติดต่อกับโซนเติบโต BCA (P);(v ดัชนี)ความต้านทานเชื้อโรค (R) เพื่อ BCA ถูกกำหนดเป็นการอัตราส่วนของ Z/M ตามรอบระยะเวลาจำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตเต็มที่ของBCA เป็นเชื้อราในปัจจุบัน (Z) และการขาดงาน (M) ของเชื้อโรค(Pakdaman et al. 2013)นอกจากนี้ Pakdaman การควบคุมดัชนี (PBCI)(Pakdaman et al. 2013) รวมพารามิเตอร์ที่ขมับ และเชื้อโรคเจริญเติบโตของพารามิเตอร์คำนวณตามสูตร(2) ด้านล่างPBCI ðin ซม 1Þ ¼ M ðin daysÞ = Z ðin daysÞ P ðin cmÞ ð2Þ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการทดลองในหลอดทดลอง
2.3.1 สรุปผลการแข่งขันทดสอบ
2.3.1.1 วัฒนธรรมที่สองของการเก็บกวาดและเอฟ solani เส้นใย ปฏิปักษ์
กิจกรรมเชื้อรา Trichoderma spp (BCA) ถูกประเมินในสื่อ PDA,
โดยใช้วิธีการเผชิญหน้าโดยตรงตามที่อธิบาย Comporta
(1985) สั้น ๆ สองแผ่น (5 มิลลิเมตร) ที่ได้รับจากวัฒนธรรมเก่าหนึ่งสัปดาห์บน PDA เชื้อรา Trichoderma SP และเอฟ solani ตามลำดับถูก
วางไว้ที่จุดตรงข้ามบนเส้นทแยงมุมเดียวกันที่ระยะ 1 ซม. จากขอบ สามแผ่นได้รับการพิจารณาสำหรับแต่ละ
ปฏิสัมพันธ์เชื้อราเชื้อราและศักยภาพการควบคุมทางชีวภาพของ
แต่ละ endophyte แยกกับเอฟ solani ได้ศึกษา หนึ่งแผ่นแต่ละ
ตัวแทนที่ทำให้เกิดโรค (เอฟ solani) และเก็บกวาด (endophyte) เพียงอย่างเดียวถูกจัดทำขึ้นเป็นตัวควบคุม ทั้งคู่วัฒนธรรมและบุคคลถูกบ่มที่อุณหภูมิ 25 ± 2 องศาเซลเซียสและการเจริญเติบโตเชิงเส้นของเชื้อราวัด
ทุกวันเป็นเวลา 10 วันติดต่อกัน เปอร์เซ็นต์การยับยั้งการเจริญเติบโต (%
I) ที่คำนวณได้ในวันสุดท้ายต่อไปบ่มโดยใช้สูตร (1) ได้รับด้านล่าง (Mokhtar และช่วยเหลือ, 2013):
% d ith ¼ D1? T = CTH? 100 ð1Þ
ที่% I = การยับยั้งการเจริญเติบโตร้อยละของเชื้อโรคโดยคู่อริ;
การเจริญเติบโต c = รัศมีในการควบคุม (ซม.); การเจริญเติบโตของ T = Radial ในวัฒนธรรมทดสอบ (ซม.)
พารามิเตอร์ควบคุมทางชีวภาพได้รับการพิจารณาเพิ่มเติมตามที่อธิบายไว้
โดย Pakdaman et al, (2013) รวมทั้ง (i) วันที่จำเป็นสำหรับทั้งสอง
อาณานิคมเข้ามาติดต่อ (C); (ii) วันที่จำเป็นสำหรับการเก็บกวาด
ที่จะเติบโตอย่างเต็มที่ในช่วงอาณานิคมเชื้อโรค (Z); (iii) วันที่จำเป็นสำหรับการ
เก็บกวาดที่จะเติบโตได้อย่างเต็มที่ทั่วจาน (M) นั้น (iv) ระยะทางรัศมีการเจริญเติบโต (ในเซนติเมตร) ของเชื้อโรคอาณานิคมระหว่างจุดของการฉีดวัคซีน
และจุดที่ขอบของการติดต่อกับเขตการเจริญเติบโต BCA (P);
(V) ดัชนีต้านทานเชื้อโรค (R) ในการเก็บกวาดที่ถูกกำหนดให้เป็น
อัตราส่วนของ Z / M ขึ้นอยู่กับระยะเวลาที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตเต็มรูปแบบของ
BCA เชื้อราในการปรากฏตัว (Z) และการขาด (M) ของเชื้อโรค
(Pakdaman et al., 2013).
นอกจากนี้ดัชนีการควบคุมทางชีวภาพ Pakdaman ของ ( PBCI)
(Pakdaman et al., 2013) การรวมพารามิเตอร์เวลาและ
การเจริญเติบโตของเชื้อโรคพารามิเตอร์ที่คำนวณได้ดังต่อไปนี้สูตร
(2) ด้านล่าง.
PBCI DIN ซม.? 1th ¼ M DIN daysÞ = Z DIN daysÞ? P DIN cmÞð2Þ