3.2. Generation of astaxanthin-prod

3.2. Generation of astaxanthin-producing tomato plants
We prepared two binary vectors containing CrBKT or this gene
with HpBHY (Fig. 3A). The strong constitutive CaMV 35S promoter
was used to drive gene expression in two tomato lines, a wild-type
(WT) accumulating lycopene and a mutant B-type (BT) which
synthesizes mainly β-carotene together with some lycopene, This
ubiquitous promoter was chosen to compare the differential
astaxanthin formations between leaf chloroplasts and fruit chromoplasts
where different carotenoid pathways and carotenoid
storage occur (Ronen et al., 2000).
Twenty to thirty independent lines were generated for each
of the two expression constructs, among them four primary
transformants, designated as WT-bkt9, WT-bktbhy20, BT-bkt10,
and BT-bktbhy8, were investigated in detail. The presence and
expression of the transgenes were confirmed by RT-PCR analysis
(Fig. 3B). A marked change of the color phenotype was observed
in all transgenic plants which showed brown leaves and red
flowers instead of the normal green and yellow (Fig. 3C and D).
Transgenic fruits developed normally except that the fruits of
B-type transformants showed a much more intense red pigmentation
compared to the more orange pigmentation in controls
(Fig. 3D and F).
3.3. Carotenoid contents and compositions in leaves and fruits
The leaves and fruits of transgenic and control lines were
subjected to carotenoid extraction and high performance liquid
chromatography (HPLC) to determine their carotenoid profiles
(Tables 2 and 3). Leaves of WT and B-type share a similar
carotenoid profile with lutein, violaxanthin, β-carotene, and neoxanthin
as the major carotenoids. Transgenic lines overexpressing
CrBKT (WT-bkt9, BT-bkt10) predominantly accumulated non-native
canthaxanthin and other ketocarotenoids including astaxanthin
(up to 86.7% of total carotenoids) at the expense of endogenous
carotenoids. The low contents of astaxanthin (ca. 10% of total
carotenoids) in the leaves of the transgenic lines were associated
with the poor enzymatic activity of the endogenous BHY1 (also
known as CrtR-b1) in converting canthaxanthin to astaxanthin (data
not shown). This is further supported by the transformants (WTbktbhy20
and BT-bktbhy8) co-expressing CrBKT and HpBHY to
reinforce hydroxylase activity, leading to 6- to 9-fold increases of
astaxanthin and a 1.8-fold increase of total carotenoids. B-bktbhy8
accumulated 3.12 mg/g (dry weight, DW) of astaxanthin in the
leaves, accounting for 59% of total carotenoids with 90% in free form
and 10% in esterified forms. Although the strong accumulation of
ketocarotenoids in transgenic leaves was accompanied by decrease
of chlorophyll contents (up to 30%), the efficiency of photosynthetic
CO2 assimilation was not affected nor showed the transgenic plants
a significantly difference in heights (Fig. 4A and B).
Different carotenoid profiles were found in the ripe fruits of
WT, BT and their transformants (Table 3). The most striking
differences were the content of β-carotene and ketocarotenoids.
WT-bkt9 and WT-bktbhy20 accumulated 1.5-fold and 2.9-fold
higher amounts of total carotenoids in WT, respectively, with
lycopene as the major carotenoid and ketocarotenoids as the
minor ones due to the limitation of β-carotene. In contrast, the
expression of CrBKT in B-type fruits resulted in a 5.1-fold increase
of total carotenoids with ketocarotenoids as the predominant
carotenoids including moderate increases of the endogenous
carotenoids. Unexpectedly, BT-bktbhy8 contained a 16-fold higher
concentration of the wild type total carotenoids, and an amount of
astaxanthin (16.1 mg/g cell dry weight) similar to H. pluvialis.
3.4. Expression of isoprenoid and carotenoid biosynthesis genes
The enhanced accumulation of carotenoids in the fruit was
associated with the up-regulation of most carotenoid biosynthetic
genes (Fig. 6). In all transformants, the transcripts of carotenogenic
genes responsible for the formation of lycopene increased
between 2- and 9-fold. Highest levels were found for the DXS
gene encoding deoxyxylulose 5-phosphate synthase, the gateway
enzyme for the terpenoid pathway, GGPPS encoding geranylgeranyl
pyrophosphate synthase which provides the direct precursor
for carotenoid formation, and PSY1 (fruit-specific phytoene
synthase gene) in combination with PDS (phytoene desaturase
gene) which together initiate carotenogenesis. In transgenic Btype
plants (B-bkt10 and B-bktbhy8) cycB was also strongly upregulated
(Fig. 2B). In contrast, the transcripts of BHY1 and BHY2
kept at low levels in fruits of both transgenic lines and controls,
correlate to the high accumulation of canthaxanthin instead of
astaxanthin in the transgenic B-type lines expressing only CrBKT.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.2 การสร้างผลิต astaxanthin พืชมะเขือเทศเราเตรียมสองเวกเตอร์ที่ไบนารีที่ประกอบด้วย CrBKT หรือยีนนี้กับ HpBHY (Fig. 3A) โปรโมเตอร์ CaMV 35S ขึ้นแข็งแรงใช้ขับยีนสองมะเขือเทศบรรทัด ไวลด์ไทป์Lycopene (WT) สะสมและ mutant ชนิด B (BT) ซึ่งsynthesizes ส่วนใหญ่β-แคโรทีนกับบาง lycopene นี้โปรโมเตอร์ที่สมบูรณ์ได้รับเลือกให้เปรียบเทียบแตกต่างกันastaxanthin ก่อตัวระหว่าง chloroplasts ใบไม้และผลไม้ chromoplastsซึ่งมนต์ต่าง ๆ carotenoid และ carotenoidจัดเก็บข้อมูลเกิดขึ้น (Ronen et al., 2000)สร้างขึ้นสำหรับแต่ละบรรทัดด้วยตนเอง 20-30ของโครงสร้างนิพจน์ที่สอง ในหมู่พวกเขาสี่หลักtransformants กำหนดเป็น WT bkt9, WT bktbhy20, bkt10 บาทบาท-bktbhy8 และถูกตรวจสอบในรายละเอียด สถานะ และของ transgenes ถูกยืนยัน โดยวิเคราะห์ RT-PCR(Fig. 3B) การเปลี่ยนแปลงเครื่องหมายของ phenotype สีถูกสังเกตในถั่วเหลืองพืชทั้งหมด ที่พบใบสีน้ำตาลและสีแดงดอกไม้แทนปกติสีเขียวและสีเหลือง (Fig. 3C และ D)ถั่วเหลืองผลไม้พัฒนาโดยปกติยกเว้นที่ผลไม้ของประเภท B transformants แสดงให้เห็นว่าผิวคล้ำสีแดงที่เข้มข้นมากขึ้นเมื่อเทียบกับผิวคล้ำมากกว่าสีส้มในตัวควบคุม(Fig. 3D และ F)3.3. carotenoid เนื้อหาและองค์ในใบไม้และผลไม้ใบไม้และผลไม้ของถั่วเหลืองและรายการควบคุมการสกัด carotenoid และของเหลวประสิทธิภาพสูงchromatography (HPLC) เพื่อกำหนดโพรไฟล์ของ carotenoid(ตารางที่ 2 และ 3) ใบของ WT และชนิด B ร่วมคล้ายคลึงกันโพรไฟล์ carotenoid มีลูทีน violaxanthin β-แคโรทีน และ neoxanthinเป็น carotenoids ที่สำคัญ ถั่วเหลืองบรรทัด overexpressingCrBKT (WT-bkt9, bkt10 บาท) สะสมเป็นถิ่นcanthaxanthin และ ketocarotenoids อื่น ๆ รวม astaxanthin(ถึง 86.7% ของรวม carotenoids) ค่าใช้จ่ายของ endogenouscarotenoids เนื้อหาน้อยของ astaxanthin (ca. 10% ของยอดรวมcarotenoids) ในใบของใบถั่วเหลืองเกี่ยวข้องกับกิจกรรมเอนไซม์ในระบบไม่ดีของ endogenous BHY1 (ยังเรียกว่า CrtR b1) ในแปลง canthaxanthin astaxanthin (ข้อมูลไม่แสดง) ต่อไปนี้ถูกสนับสนุน โดย transformants (WTbktbhy20และบีที-bktbhy8) ร่วมแสดง CrBKT และ HpBHY เพื่อเสริมกิจกรรม hydroxylase นำ 6 - ให้ 9 - fold เพิ่มขึ้นastaxanthin และเพิ่ม 1.8-fold ของ carotenoids รวม B bktbhy8สะสม 3.12 มิลลิกรัม/กรัม (น้ำหนักแห้ง DW) ของ astaxanthin ในการใบ บัญชี 59% ของ carotenoids รวม 90% ในรูปอิสระและ 10% ในแบบฟอร์ม esterified แม้ว่าสะสมแข็งแรงของพร้อมกับ ketocarotenoids ในใบถั่วเหลือง โดยลดสารบัญคลอโรฟิลล์ (สูงสุด 30%), ประสิทธิภาพของ photosyntheticผสม CO2 ไม่ได้รับผลกระทบ หรือพบพืชถั่วเหลืองมีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในความสูง (Fig. 4A และ B)โพรไฟล์ carotenoid ต่าง ๆ พบในผลไม้สุกของWT, BT และ transformants ของพวกเขา (ตาราง 3) โดดเด่นที่สุดความแตกต่างของβ-แคโรทีนและ ketocarotenoids ได้WT-bkt9 และ WT bktbhy20 สะสม 1.5-fold และ 2.9-foldจำนวนสูงรวม carotenoids ใน WT ตามลำดับ ด้วยlycopene เป็น carotenoid หลักและ ketocarotenoids เป็นการคนเล็กน้อยเนื่องจากข้อจำกัดของβ-แคโรทีน ในทางตรงกันข้าม การค่าของ CrBKT ในผลไม้ประเภท B ให้เพิ่ม 5.1-foldของ carotenoids รวมกับ ketocarotenoids เป็นที่กันรวมทั้งเพิ่มปานกลางของที่ endogenous carotenoidscarotenoids โดยไม่คาดคิด bktbhy8 บีทีอยู่สูง 16-foldความเข้มข้นของ carotenoids รวมชนิดป่า และจำนวนastaxanthin (16.1 ล้าน mg/g เซลล์แห้งน้ำหนัก) คล้ายกับ H. pluvialis3.4 การนิพจน์ของยีนสังเคราะห์ isoprenoid และ carotenoidถูกสะสมเพิ่มของ carotenoids ในผลไม้เชื่อมโยงกับกฎระเบียบของ carotenoid biosynthetic มากที่สุดยีน (Fig. 6) ใน transformants ทั้งหมด ใบแสดงผลของ carotenogenicการเพิ่มขึ้นของยีนสำหรับการก่อตัวของ lycopeneระหว่าง 2 - และ 9-fold ตรวจพบระดับสูงสุดสำหรับการ DXSยีนที่เข้า deoxyxylulose 5-ฟอสเฟต synthase เกตเวย์เอนไซม์ในทางเดิน terpenoid, GGPPS รหัส geranylgeranylsynthase pyrophosphate ซึ่งเป็นสารตั้งต้นโดยตรงสำหรับกำเนิด carotenoid และ PSY1 (phytoene เฉพาะผลไม้ยีน synthase) ร่วมกับ PDS (phytoene desaturaseยีน) ซึ่งเริ่ม carotenogenesis กัน ในถั่วเหลือง BtypecycB (B bkt10 และ B bktbhy8) พืชยังเป็นอย่างยิ่ง upregulated(Fig. 2B) ในความคมชัด ใบแสดงผลของ BHY1 และ BHY2เก็บไว้ที่ระดับต่ำสุดในผลไม้ถั่วเหลืองบรรทัดและควบคุมซึ่งการสะสมสูงของ canthaxanthin แทนastaxanthin ในถั่วเหลือง B ชนิดบรรทัดแสดง CrBKT เท่านั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.2 การสร้าง astaxanthin ผลิตมะเขือเทศ
เราเตรียมสองเวกเตอร์ไบนารีที่มี CrBKT หรือยีนนี้
มี HpBHY (รูป. 3A) โปรโมเตอร์ CaMV 35S เป็นส่วนประกอบที่แข็งแกร่ง
ถูกนำมาใช้ในการผลักดันการแสดงออกของยีนในสองบรรทัดมะเขือเทศชนิดป่า
(น้ำหนัก) สะสมไลโคปีนและกลายพันธุ์ B-ประเภท (BT) ซึ่ง
ส่วนใหญ่สังเคราะห์βแคโรทีนไลโคปีนร่วมกับบางนี้
ผู้ก่อการเป็นที่แพร่หลาย เลือกที่จะเปรียบเทียบค่า
ก่อ astaxanthin ระหว่างใบและคลอโรพลา chromoplasts ผลไม้
ทางเดินที่แตกต่างกันและ carotenoid carotenoid
จัดเก็บข้อมูลที่เกิดขึ้น (Ronen et al., 2000).
ยี่สิบถึงสามสิบเส้นอิสระถูกสร้างขึ้นสำหรับแต่ละ
ของทั้งสองสร้างการแสดงออกในหมู่พวกเขาสี่หลัก
transformants กำหนดให้เป็น WT-bkt9, WT-bktbhy20, BT-bkt10,
และ BT-bktbhy8 ถูกตรวจสอบในรายละเอียด การแสดงตนและ
การแสดงออกของ transgenes ได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์ RT-PCR
(รูป. 3B) การทำเครื่องหมายการเปลี่ยนแปลงของสีฟีโนไทป์เป็นข้อสังเกต
ในพืชดัดแปรพันธุกรรมทั้งหมดซึ่งแสดงให้เห็นใบสีน้ำตาลและสีแดง
ดอกไม้แทนปกติสีเขียวและสีเหลือง (รูป. 3C และ D).
ผลไม้พันธุ์ที่พัฒนาตามปกติยกเว้นว่าผลของ
transformants B-ประเภทแสดงให้เห็นว่า ที่รุนแรงมากขึ้นสีแดง
เมื่อเทียบกับสีส้มมากขึ้นในการควบคุม
(รูปที่. 3 มิติและ F).
3.3 เนื้อหา carotenoid และองค์ประกอบในใบและผลไม้
ใบและผลของการดัดแปรพันธุกรรมและสายควบคุมที่ถูก
ยัดเยียดให้ carotenoid สกัดและของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูง
โค (HPLC) เพื่อตรวจสอบประวัติของพวกเขา carotenoid
(2 ตารางและ 3) ใบของ WT และส่วนแบ่ง B-ประเภทที่คล้ายกัน
รายละเอียด carotenoid ที่มีลูทีน, violaxanthin, βแคโรทีนและ neoxanthin
เป็นนอยด์ที่สำคัญ สายการดัดแปรพันธุกรรม overexpressing
CrBKT (WT-bkt9, BT-bkt10) สะสมส่วนใหญ่ที่ไม่ใช่เจ้าของภาษา
canthaxanthin ketocarotenoids และอื่น ๆ รวมทั้ง astaxanthin
(ถึง 86.7% ของ carotenoids ทั้งหมด) ค่าใช้จ่ายของภายนอก
carotenoids เนื้อหาต่ำของ astaxanthin (แคลิฟอร์เนียได้ 10% จากทั้งหมด
carotenoids) ในใบของสายพันธุ์ที่เกี่ยวข้อง
กับกิจกรรมของเอนไซม์ที่ดีของ BHY1 ภายนอก (ยังเป็น
ที่รู้จักกันเป็น CrtR-b1) ในการแปลง canthaxanthin เพื่อ astaxanthin (ข้อมูล
ไม่แสดง) . นี้ได้รับการสนับสนุนต่อไปโดย transformants (WTbktbhy20
และ BT-bktbhy8) ร่วมแสดงความ CrBKT HpBHY และการ
เสริมสร้างกิจกรรม hydroxylase ที่นำไปสู่การเพิ่มขึ้น 6 9 เท่าของ
astaxanthin และเพิ่มขึ้น 1.8 เท่าของ carotenoids ทั้งหมด B-bktbhy8
สะสม 3.12 mg / g (น้ำหนักแห้ง DW) ของ astaxanthin ใน
ใบคิดเป็น 59% ของนอยด์รวมกับ 90% ในรูปแบบฟรี
และ 10% ในรูปแบบ esterified แม้ว่าการสะสมที่แข็งแกร่งของ
ketocarotenoids ในใบพันธุ์ที่มาพร้อมกับการลดลง
ของเนื้อหาคลอโรฟิล (ไม่เกิน 30%) มีประสิทธิภาพในการสังเคราะห์แสง
การดูดซึม CO2 ไม่ได้รับผลกระทบหรือแสดงให้เห็นว่าพืชดัดแปรพันธุกรรม
ที่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญในที่สูง (รูป. 4A และ B)
โปรไฟล์ carotenoid ที่แตกต่างกันที่พบในผลไม้สุกของ
WT, BT และ transformants ของพวกเขา (ตารางที่ 3) ที่โดดเด่นที่สุด
ความแตกต่างเนื้อหาของβแคโรทีนและ ketocarotenoids.
WT-bkt9 และ WT-bktbhy20 สะสม 1.5 เท่าและ 2.9 เท่า
ในปริมาณที่สูงขึ้นของ carotenoids รวมใน WT ตามลำดับโดยมี
ไลโคปีนเป็น carotenoid ที่สำคัญและเป็น ketocarotenoids
เล็กน้อย คนเนื่องจากข้อ จำกัด ของβแคโรทีน ในทางตรงกันข้าม
การแสดงออกของ CrBKT ในผลไม้ชนิด B มีผลในการเพิ่มขึ้น 5.1 เท่า
ของ carotenoids รวมกับ ketocarotenoids เป็นที่โดดเด่น
รวมทั้งการเพิ่มขึ้นของ carotenoids ปานกลางภายนอก
carotenoids โดยไม่คาดคิด BT-bktbhy8 มี 16 เท่าสูงกว่า
ความเข้มข้นของป่าประเภท carotenoids รวมและปริมาณของ
astaxanthin (16.1 มิลลิกรัม / กรัมน้ำหนักเซลล์แห้ง) คล้ายกับเอช pluvialis.
3.4 การแสดงออกของ isoprenoid และ carotenoid ยีนสังเคราะห์
การสะสมเพิ่มขึ้นของนอยด์ในผลไม้ได้รับการ
ที่เกี่ยวข้องกับการขึ้นระเบียบของ carotenoid ที่สุดชีวสังเคราะห์
ยีน (รูปที่. 6) ใน transformants ทุกใบของ carotenogenic
ยีนที่รับผิดชอบในการก่อตัวของไลโคปีนที่เพิ่มขึ้น
ระหว่าง 2 และ 9 เท่า ระดับสูงสุดที่ถูกพบ DXS
ยีน deoxyxylulose เทส 5 ฟอสเฟตประตู
เอนไซม์ทางเดิน terpenoid เข้ารหัส GGPPS geranylgeranyl
เทส pyrophosphate ซึ่งมีสารตั้งต้นโดยตรง
สำหรับการก่อ carotenoid และ PSY1 (phytoene ผลไม้เฉพาะ
ยีนเทส) ร่วมกับ PDS (phytoene desaturase
ยีน) ซึ่งร่วมกันเริ่มต้น carotenogenesis ใน Btype พันธุ์
พืช (B-bkt10 B-bktbhy8) cycB ก็ยังขอ upregulated
(รูป. 2B) ในทางตรงกันข้ามใบรับรองผลการเรียนของ BHY1 BHY2 และ
เก็บไว้ที่ระดับต่ำในผลไม้สายพันธุ์ทั้งสองและการควบคุม
มีความสัมพันธ์กับการสะสมสูงของ canthaxanthin แทน
astaxanthin ในสาย B ชนิดพันธุ์แสดงเพียง CrBKT

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.2 . รุ่นของแอสตาแซนทินการผลิตพืชมะเขือเทศ
เราเตรียมไว้สองไบนารีเวกเตอร์ที่มี crbkt หรือยีนด้วย hpbhy
( รูปที่ 3 ) ที่แข็งแกร่งและใช้ 35S CaMV promoter
ขับรถการแสดงออกของยีนใน 2 เส้น มะเขือเทศ มีไลโคพีนสะสมของ
( WT ) และประเภทกลายพันธุ์ ( BT ) สังเคราะห์บีตา - แคโรทีนซึ่ง
ส่วนใหญ่ด้วยกันกับไลโคปีนนี้
โปรโมเตอร์ที่แพร่หลายคือเลือกเปรียบเทียบความแตกต่างระหว่างคลอโรพลาสต์และแอสตาแซนทินก่อตัว
ใบผลไม้โครโมพลา
ที่เส้นทางที่แตกต่างกันและแคโรทีนแคโรทีนอยด์
กระเป๋าเกิดขึ้น ( Ronen et al . , 2000 ) .
ยี่สิบถึงสามสิบเส้นอิสระถูกสร้างขึ้นสำหรับแต่ละ
ของทั้งสองสีหน้าโครงสร้างในหมู่พวกเขาสี่หลัก
transformants เป็น wt-bkt9 , เขต , wt-bktbhy20 bt-bkt10
, ,bt-bktbhy8 และศึกษาในรายละเอียด การแสดงและ
การแสดงออกของ transgenes ได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์ 4
( รูปที่ 3B ) เป็นเครื่องหมายการเปลี่ยนแปลงของสีที่มีค่า
ในพืชข้ามพันธุ์ โดยมีใบไม้สีน้ำตาลและสีแดงดอกไม้
แทนปกติสีเขียวและสีเหลือง ( รูปที่ 3 C และ D )
ผลไม้พันธุ์พัฒนาตามปกติ ยกเว้นผลไม้
ประเภทพลาสมิดพบ pigmentation สีแดงเข้มมาก
เมื่อเทียบกับเพิ่มเติมส้มสีในการควบคุม
( ภาพ 3D และ F )
3 . ในเนื้อหาของใบและผลไม้
ใบและผลสายพันธุกรรมและการควบคุมภายใต้การสกัดแคโรทีนอยด์ได้

และโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) เพื่อตรวจสอบของพวกเขาในโปรไฟล์
( ตารางที่ 2 และ 3 )ใบของ WT และประเภทใช้เหมือนกัน
ในโปรไฟล์ด้วยไวโอลาแซนทินบีตา - แคโรทีน , ลูทีน , และนีโอแซนทิน
เป็นแคโรทีนอยด์ที่สำคัญ ต้นสาย overexpressing
crbkt ( wt-bkt9 bt-bkt10 , ) เด่นสะสมและชาวต่างประเทศ
แคนทาแซนทิน ketocarotenoids อื่นๆ รวมทั้ง แอสตาแซนทิน
( ขึ้น 2.2 % ของแคโรทีนอยด์ทั้งหมด ) ที่ค่าใช้จ่ายของแคโรทีนอยด์ใน
.เนื้อหาน้อยของแอสตาแซนทิน ( ประมาณ 10% ของแคโรทีนอยด์รวม
) ในใบของต้นสายสัมพันธ์
กับเอนไซม์ที่น่าสงสารของ bhy1 ภายนอก (
เรียกว่า crtr-b1 ) ในการแปลงแคนทาแซนทินกับแอสตาแซนทิน ( ข้อมูล
ไม่แสดง ) นี้การสนับสนุนเพิ่มเติมโดยพลาสมิด ( wtbktbhy20
และ bt-bktbhy8 ) ร่วมแสดง crbkt hpbhy และเสริมสร้างกิจกรรม hydroxylase

,นำ 6 - 9-fold เพิ่ม
แอสทาแซนทินและ 1.8-fold เพิ่มแคโรทีนอยด์ทั้งหมด b-bktbhy8
สะสม 3.12 มิลลิกรัม / กรัมน้ำหนักแห้ง แห้ง ) ของแอสตาแซนธินใน
ใบ , การบัญชีสำหรับ 59% ของแคโรทีนอยด์รวมกับ 90%
ฟรีฟอร์มและ 10% ใน esterified แบบฟอร์ม ถึงแม้ว่าการสะสมแรง
ketocarotenoids ในใบต้นพร้อมกับลด
ของคลอโรฟิลล์ ( 30% ) , ประสิทธิภาพในการสังเคราะห์แสง
CO2 ผสมกลมกลืน ได้รับผลกระทบ หรือมีพืชดัดแปรพันธุกรรม การความแตกต่างในความสูง ( รูปที่ 4 และ B )
โปรไฟล์เชื้อที่พบในผลไม้สุก
โดยน้ำหนัก สำหรับพลาสมิด ( ตารางที่ 3 ) ความแตกต่างที่โดดเด่น
ส่วนใหญ่เป็นเนื้อหาของบีตา - แคโรทีน และ ketocarotenoids .
wt-bkt9 wt-bktbhy20 1.5-fold และสะสม และ 2.9-fold
ปริมาณที่สูงขึ้นของแคโรทีนอยด์ในทั้งหมดโดยน้ำหนัก ตามลำดับ มีไลโคพีนเป็นหลัก

และแคโรทีนอยด์ ketocarotenoids เป็นผู้เยาว์ที่เนื่องจากข้อจำกัดของบีตา - แคโรทีน ในทางตรงกันข้าม ,
การแสดงออกของ crbkt ในผลไม้ประเภทผลใน 5.1-fold เพิ่ม
รวมกับ ketocarotenoids เป็นโดด
คาโรทีนอยด์แคโรทีนอยด์ ( carotenoids ภายนอกรวมทั้งเพิ่ม

โดยไม่คาดคิด bt-bktbhy8 บรรจุ 16 พับสูง
ความเข้มข้นของป่าประเภทรวม carotenoids และปริมาณ
แอสตาแซนทิน ( 16.1 มก. / กรัมน้ำหนักเซลล์แห้งคล้ายกับสีเขียว H .
3.4 . และการแสดงออกของยีนในระดับซปรีนอยด์
เพิ่มสะสมคาโรทีนอยด์ในผลไม้
ที่เกี่ยวข้องกับกฎระเบียบของแคโรทีนมากที่สุดขึ้นร่วม
ยีน ( ภาพที่ 6 ) ในพลาสมิด , ประวัติของ carotenogenic
ยีนที่รับผิดชอบในการก่อตัวของไลโคปีนเพิ่มขึ้น
ระหว่าง 2 - 9-fold . ระดับสูงสุดที่พบใน dxs
ยีน deoxyxylulose 5-phosphate และเข้ารหัส , เอนไซม์เกตเวย์
สำหรับทางเดินเทอร์ปีนอยด์ ggpps geranylgeranyl
, การเข้ารหัสไพโร synthase ซึ่งมีสารแคโรทีนอยด์โดยตรง
สำหรับการ psy1 ( เฉพาะผลไม้และโปรตีนไฟโทอีน
ยีน ) ร่วมกับโปรดักชั่น ( ไฟโทอีน desaturase
ยีน ) ซึ่งร่วมกันเริ่มต้น carotenogenesis . ในพืช btype
( b-bkt10 ยีน และ b-bktbhy8 ) cycb ก็ขอ upregulated
( รูปที่ 2B ) ในทางตรงกันข้าม หลักฐานของ bhy1 bhy2
และไว้ที่ระดับต่ำในผลไม้ของทั้งสองสายพันธุ์และการควบคุม
สัมพันธ์กับสูง , การสะสมของแคนทาแซนทินแทน
แอสตาแซนธินในอุตสาหกรรมประเภทเส้นแสดงเพียง crbkt .