Protein spots with differential abu

Protein spots with differential abundance patterns on gels
were manually excised from gels, washed with Millipore pure
water for three times, destained twice with 30 mM K3Fe (CN) 6
for silver staining spots, reduced with 10 mM DTT in 50 mM
NH4HCO3, alkylated with 40 mM iodoacetamide in 50 mM
NH4HCO3, driedtwice with 100% acetonitrile and digested
overnight at 37 ◦C with sequencing grade modified trypsin
(Promega, Madison, WI, USA) in 50 mM NH4HCO3.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จุดโปรตีน มีรูปแบบแตกต่างมากมายบนได้ด้วยตนเอง excised จากเจ ล้าง ด้วยมากบริสุทธิ์น้ำสำหรับสามครั้ง destained สองกับ 30 มม. K3Fe (CN) 6จุด ลดลงกับ 10 มม. DTT ใน 50 มม.ย้อมสีเงินNH4HCO3, alkylated กับ iodoacetamide 40 มม. 50 มม.NH4HCO3, driedtwice ด้วย acetonitrile 100% และต้องค้างคืนที่ ◦C 37 กับลำดับชั้นที่ปรับเปลี่ยนทริปซิน(Promega เมดิสัน WI สหรัฐอเมริกา) ใน NH4HCO3 50 mM

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุดโปรตีนที่มีรูปแบบความอุดมสมบูรณ์ที่แตกต่างกันเกี่ยวกับการเจลถูกตัดด้วยตนเองจากเจลล้างด้วยคบริสุทธิ์น้ำสามครั้งdestained ครั้งที่สองกับ 30 มิลลิ K3Fe (CN) 6 จุดย้อมสีเงินลดลง 10 มิลลิ DTT 50 มิลลิNH4HCO3, alkylated กับ 40 มิลลิ iodoacetamide 50 มิลลิNH4HCO3, driedtwice กับ acetonitrile 100% และย่อยค้างคืนที่37 ◦Cกับ trypsin ปรับเปลี่ยนลำดับชั้น(Promega เมดิสันวิสคอนซินสหรัฐอเมริกา) ใน 50 มิลลิ NH4HCO3

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรตีนจุดที่มีความแตกต่างในความอุดมสมบูรณ์รูปแบบเจล
ได้ด้วยตนเอง ที่ตัดจากเจล , การล้างด้วยน้ำบริสุทธิ์มิลลิ
3 ครั้ง destained สองครั้ง 30 มม. k3fe ( CN ) 6
เงินคราบจุด ลดลง 10 - 20 ใน nh4hco3 50 mm
, alkylated 40 มม. iodoacetamide ใน nh4hco3 50 mm
, driedtwice 100% และย่อย
ไนค้างคืนที่ 37 องศาเซลเซียส การแก้ไขเปลี่ยนแปลง◦เกรด
( promega เมดิสัน , WI , USA ) ใน nh4hco3 50 มิลลิเมตร