5.3. Analysis of PS exposure versus cell permeability by flow
fluorocytometry
The exposure of phosphatidylserine (PS) on the surface of dying
cells is one of the best-characterized surface changes that facilitate
recognition and engulfment of dying cells. Plasma membranes of
viable cells exhibit substantial phospholipid asymmetry, with most
of the PS residing on the inner, cytoplasmic leaflet of the membrane.
For long it was believed that apoptotic cells uniquely expose
PS before plasma membrane rupture, in contrast to necrosis where
these events occur simultaneously [3,48]. However, more and
more reports describe PS exposure in non-apoptotic conditions,
such as in necrosis, autophagy and ER stress [49,50]. Annexin V,
a Ca2+-dependent phospholipid-binding protein, preferentially
binds to negatively charged phospholipids such as PS [51]. Using,
e.g. Alexa Fluor 488-conjugated Annexin V in combination with
PI uptake, one can determine PS exposure versus loss of membrane
integrity in function of time [51]. Classically, PS positivity precedes
PI positivity in apoptotic cells but in necrotic cells the two events
coincide. However, it is important to mention that in some conditions
necrotic cells remain PI negative but also externalize PS [49]
(Fig. 3). This could depend on the strength and type of the stimulus
as well as on the cellular necrotic model used. To discriminate
between apoptosis and necrosis, other morphological and biochemical
parameters should be analyzed
5.3. Analysis of PS exposure versus cell permeability by flowfluorocytometryThe exposure of phosphatidylserine (PS) on the surface of dyingcells is one of the best-characterized surface changes that facilitaterecognition and engulfment of dying cells. Plasma membranes ofviable cells exhibit substantial phospholipid asymmetry, with mostof the PS residing on the inner, cytoplasmic leaflet of the membrane.For long it was believed that apoptotic cells uniquely exposePS before plasma membrane rupture, in contrast to necrosis wherethese events occur simultaneously [3,48]. However, more andmore reports describe PS exposure in non-apoptotic conditions,such as in necrosis, autophagy and ER stress [49,50]. Annexin V,a Ca2+-dependent phospholipid-binding protein, preferentiallybinds to negatively charged phospholipids such as PS [51]. Using,e.g. Alexa Fluor 488-conjugated Annexin V in combination withPI uptake, one can determine PS exposure versus loss of membraneintegrity in function of time [51]. Classically, PS positivity precedesPI positivity in apoptotic cells but in necrotic cells the two eventscoincide. However, it is important to mention that in some conditionsnecrotic cells remain PI negative but also externalize PS [49](Fig. 3). This could depend on the strength and type of the stimulusas well as on the cellular necrotic model used. To discriminatebetween apoptosis and necrosis, other morphological and biochemicalparameters should be analyzed
การแปล กรุณารอสักครู่..

5.3 การวิเคราะห์ของการเปิดรับ PS เมื่อเทียบกับการซึมผ่านเซลล์โดยการไหล
fluorocytometry
การสัมผัสของ phosphatidylserine (PS) บนพื้นผิวของการตาย
ของเซลล์เป็นหนึ่งในการเปลี่ยนแปลงพื้นผิวที่ดีที่สุดลักษณะที่อำนวยความสะดวก
การรับรู้และการทนของเซลล์ที่กำลังจะตาย พลาสม่าของเยื่อหุ้ม
เซลล์ทำงานได้แสดงความไม่สมดุลเรียมที่สำคัญส่วนใหญ่
ของ PS ที่อาศัยอยู่บนชั้นใน, ใบนิวเคลียสของเมมเบรน.
นานก็เชื่อว่าเซลล์ apoptotic ไม่ซ้ำกันเปิดเผย
PS ก่อนที่จะเกิดการแตกเยื่อหุ้มในทางตรงกันข้ามกับเนื้อร้ายที่
เหตุการณ์เหล่านี้เกิดขึ้น พร้อมกัน [3,48] แต่มากขึ้นและ
มากขึ้นรายงานอธิบายการสัมผัส PS ในสภาพที่ไม่ apoptotic,
เช่นในเนื้อร้าย autophagy และความเครียด ER [49,50] Annexin V,
Ca2 + -dependent โปรตีนเรียมผูกพิเศษ
ผูกกับประจุลบ phospholipids เช่น PS [51] ใช้
เช่น Alexa Fluor Annexin 488-V ผันร่วมกับ
การดูดซึม PI หนึ่งสามารถตรวจสอบการเปิดรับ PS เมื่อเทียบกับการสูญเสียของเมมเบรน
ความซื่อสัตย์ในการทำงานของเวลา [51] คลาสสิก, positivity PS แจ๋ว
positivity PI ในเซลล์ apoptotic แต่ในเซลล์ตายทั้งสองเหตุการณ์
ตรง แต่ก็เป็นสิ่งสำคัญที่จะพูดถึงว่าในเงื่อนไขบางอย่าง
เซลล์ตายยังคง PI เชิงลบ แต่ยัง externalize PS [49]
(รูปที่. 3) ซึ่งอาจขึ้นอยู่กับความแข็งแรงและประเภทของการกระตุ้นเศรษฐกิจ
เช่นเดียวกับรูปแบบการตายของเซลล์ที่ใช้ เพื่อให้เห็นความแตกต่าง
ระหว่างการตายและเนื้อร้ายก้านและชีวเคมีอื่น ๆ
พารามิเตอร์ควรจะวิเคราะห์
การแปล กรุณารอสักครู่..
