2.3. Hydrolysis testsHydrolysis was

2.3. Hydrolysis tests
Hydrolysis was carried out in duplicate under mild agitation at
180 rpm in 125-mL flasks. Hydrolysis was performed using the solid
fraction obtained after pretreatment of the substrate at 8% (w/v)
concentration suspended in 30 mL of the fermentation medium
(yeast extract, 2.5 g/L; peptone, 2.5 g/L; NH4Cl, 2 g/L; KH2PO4,
1 g/L and MgSO47H2O, 0.3 g/L) in citrate buffer (50 mM, pH 4.8),
supplemented with 15 Filter Paper Units (FPU) per gram of substrate.
The commercial cellulase preparation used in this work
was Celluclast 1.5 L (Sigma–Aldrich, Brazil). Samples were collected
every 12 h and centrifuged for 15 min at 10,000g, and
the supernatants were used to quantify carbohydrates by high performance
liquid chromatography (HPLC).
2.4. Saccharification and fermentation tests
SSF (simultaneous saccharification and fermentation) and SHF
(separate hydrolysis and fermentation) experiments were carried
out according to the pretreatment and presaccharification conditions
described above. In the SSF and SHF assays, flasks were inoculated
with yeast cultures using the following presaccharification
conditions: 0, 24 or 72 h at 37, 42 or 50 C. The fermentation was
initiated by adding yeast culture to an OD600nm of 2. SSF assays
were conducted under sterile conditions at 37 or 42 C for 24 h.
Samples were collected every 2 h and centrifuged for 15 min at
10,000g. The supernatants were used to quantify carbohydrates
and ethanol by HPLC. In the SHF assays the supernatants of hydrolysis
were separated from biomass by centrifuging prior the yeast
inoculation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3
การทดสอบการย่อยสลายการย่อยสลายได้ดำเนินการในที่ซ้ำกันภายใต้ความปั่นป่วนรุนแรงที่
180 รอบต่อนาทีในขวด 125 มิลลิลิตร ย่อยสลายได้รับการดำเนินการโดยใช้ของแข็งส่วนได้รับหลังจากการปรับสภาพของพื้นผิวที่ 8% (w / v) ความเข้มข้นที่ถูกระงับใน 30 มิลลิลิตรของกลางหมัก(สารสกัดจากยีสต์ 2.5 กรัม / ลิตร; เปปโตน 2.5 กรัม / ลิตร; NH4Cl, 2 กรัม / L; KH2PO4,? 1 กรัม L / และ MgSO4 7H2O 0.3 กรัม / ลิตร) ในบัฟเฟอร์ซิเตรต (50 มิลลิค่า pH 4.8). เสริมด้วย 15 ยูนิตกระดาษกรอง (FPU) ต่อกรัมของพื้นผิวการเตรียมเซลลูเลสในเชิงพาณิชย์ที่ใช้ในการงานนี้เป็น Celluclast 1.5 ลิตร (Sigma-Aldrich, บราซิล) เก็บตัวอย่างทุก 12 ชั่วโมงและปั่นเป็นเวลา 15 นาทีที่ 10,000? กรัมและ supernatants ถูกนำมาใช้ในการวัดปริมาณคาร์โบไฮเดรตโดยมีประสิทธิภาพสูงของเหลวchromatography (HPLC). 2.4 saccharification และการทดสอบการหมักSSF (saccharification พร้อมกันและหมัก) และ SHF (ไฮโดรไลซิแยกต่างหากและหมัก) ทดลองออกไปตามการปรับสภาพและเงื่อนไขpresaccharification อธิบายไว้ข้างต้น ในการตรวจ SSF และ SHF ขวดถูกเชื้อกับวัฒนธรรมยีสต์ใช้ต่อไปนี้presaccharification เงื่อนไข: 0, 24 หรือ 72 ชั่วโมงที่ 37, 42 หรือ 50 องศาเซลเซียส หมักถูกริเริ่มโดยการเพิ่มเชื้อยีสต์กับ OD600nm 2. ตรวจ SSF ได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ผ่านการฆ่าเชื้อที่ 37 หรือ 42 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง. เก็บตัวอย่างทุก 2 ชั่วโมงและปั่นเป็นเวลา 15 นาทีที่10,000? กรัม supernatants ถูกนำมาใช้ในการวัดปริมาณคาร์โบไฮเดรตและเอทานอลโดยวิธีHPLC ในการตรวจ SHF supernatants ของไฮโดรไลซิถูกแยกออกจากชีวมวลโดยเหวี่ยงก่อนยีสต์การฉีดวัคซีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การทดสอบการย่อยเอนไซม์
ได้ดําเนินการในซ้ำภายใต้อ่อนการกวนที่
180 rpm ใน 125 มล. ขวด . การกระทำใช้ของแข็ง
เศษส่วนที่ได้รับหลังจากการพื้นผิวที่ 8 % ( w / v )
สมาธิระงับใน 30 ml ของการหมัก (
( สารสกัดยีสต์ 2.5 กรัม / ลิตร ตามลำดับ เท่ากับ 2.5 กรัม / ลิตร ; 4 . 2 กรัม / ลิตร kh2po4
1 กรัม / ลิตร ,  MgSO4 ใ 7h2o , 0 .3 กรัม / ลิตร ) ในซิเตรตบัฟเฟอร์ ( 50 มม. , pH 4.8 )
เสริม 15 หน่วยกรองกระดาษ ( FPU ) ต่อกรัมค่า

ใช้ในการเตรียมเอนไซม์ทางการค้านี้ celluclast 1.5 ลิตร ( Sigma ) ดิช , บราซิล ) ตัวอย่าง
ทุก 12 ชั่วโมง ไฟฟ้า 15 นาทีที่ 10 , 000  g ,
supernatants ใช้ปริมาณคาร์โบไฮเดรตโดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC )
.
2.4 .ที่ถูกหมักและการทดสอบ
SSF ( เส้นพร้อมกันและหมัก ) และ shf
( การแยกและกระบวนการหมัก ) การทดลอง
ตามภาวะและเงื่อนไข presaccharification
ที่อธิบายข้างต้น และใน shf SSF ) , flasks ปลูกเชื้อด้วยยีสต์วัฒนธรรมการใช้ต่อไป

presaccharification เงื่อนไข : 0 , 24 หรือ 72 H ที่ 3742 หรือ 50  C หมักคือ
ริเริ่มโดยการเพิ่มยีสต์วัฒนธรรมการ od600nm 2 SSF )
ได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขหมันที่ 37 หรือ 42  เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ทำการเก็บตัวอย่างทุก 2 ชั่วโมง

ไฟฟ้า 15 นาทีที่ 10 , 000  G supernatants ใช้ปริมาณคาร์โบไฮเดรต
และเอทานอลโดย HPLC ใน shf ) ที่ supernatants การย่อย
แยกจากชีวมวลโดยสารก่อน
เชื้อยีสต์ .