2. Materials and Methods2.1. Collec

2. Materials and Methods
2.1. Collection of Plant Material. The fresh leaves of R. nasutus
were collected from Tirumala Hills, Tirupati, Chittoor
districts of Andhra Pradesh from July to October 2009. The
plant specimen was verified to be the correct species by Dr.
Madhava Setty, a botanist from the Department of Botany, S.
V. University, Tirupati, India.
2.2. Preparation of the Extract. Fresh leaves of R. nasutus
(500 g) were shade-dried and milled into fine powder using
a mechanical grinder (TTK Prestige, Chennai, India). The
powdered plant material was macerated and shaken in
methanol using a bath shaker (Thermo Scientific, Mumbai,
India) for 48 h.The extract was then filtered with filter paper
(Whatman no. 1) and evaporated to dryness under a vacuum
with reduced pressure using a rotary evaporator at 40∘C. The
concentrate was then placed on aluminum foil before freeze
drying. The residual extract was dissolved in 1mL of sterile
water before use.
2.3. Chemicals. Streptozotocin (STZ) was purchased from
Sigma (USA). All other chemicals and reagents used in
this study were of analytical grade. Glibenclamide (Sugatrol,
Hyderabad, India) was purchased from a local drug store.
2.4. Experimental Design. Adult male Wistar rats weighing
between 150 and 180 g were obtained from Sri Venkateswara
Enterprises, Bangalore, India. They were individually housed
in clean, sterile polypropylene cages under standard conditions
(12 h light/dark cycles) with free access to standard
chow (Hindustan Lever Ltd., Bangalore, India) and water
ad libitum. Before the commencement of experiments, the
animals were allowed to acclimatize to laboratory conditions
for one week. The animal experiments were designed
and performed in accordance with the ethical standards
approved by the local Ministry of Social Justices and
Empowerment, Government of India, and the Institutional
Animal Ethics Committee Guidelines (Resolution no.
05/(i)/a/CPCSEA/IAEC/SVU/MDN-PVR/dt.13.09.2010).
2.5. Induction of Experimental Diabetes. Diabetes was
induced by a single intraperitoneal injection of a freshly
prepared STZ solution (Sigma, no. 242-646-8) (50mg/kg
in citrate buffer 0.01 M, pH 4.5) to overnight-fasted rats.
Diabetes was confirmed by the presence of polydipsia and
polyurea as well as by measuring the nonfasting plasma
glucose levels 48h after STZ injection. Only animals that
were confirmed to have blood glucose levels greater than
250mg/dL were included in the study. All the animals were
allowed free access to tapwater and pellet chowin accordance
with the guidelines of the Institute Animal Ethics committee.
The rats were divided into five groups of six animals each
as follows.
Group I: normal rats (controls—animals receiving
only buffer).
Group II: R. nasutus-treated normal rats (200mg/
kg/day) [13, 23].
Group III: diabetic rats (untreated).
Group IV: R. nasutus-treated diabetic rats (200mg/
kg/day).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. รวบรวมวัสดุโรงงาน ใบสดของ R. พันชั่งถูกรวบรวมไว้จาก ภูเขา Tirumala, Chittoor ทิรูปาติเขตของรัฐอานธรประเทศตั้งแต่เดือนกรกฎาคมถึง 2552 ตุลาคม ที่ตัวอย่างพืชถูกตรวจสอบเป็น สายพันธุ์ที่ถูกต้อง โดย DrMadhava Setty, botanist จากภาควิชาพฤกษศาสตร์ S.V. มหาวิทยาลัย ติรูปัติ อินเดีย2.2 การเตรียมสารสกัด ใบสดของ R. พันชั่ง(500 กรัม) สีแห้ง และปลายเป็นผงดีใช้เป็นเครื่องบด (TTK เพรสทีจ เจนไน อินเดีย) ที่โรงงานผงวัสดุ macerated และเขย่าในเมทานอลโดยใช้เชคเกอร์น้ำ (วิทยาศาสตร์เทอร์โม มุมไบอินเดีย) สำหรับ 48 h.The แยกถูกแล้วกรอง ด้วยกระดาษกรอง(Whatman หมายเลข 1) และหายไปในความแห้งกร้านภายใต้สุญญากาศกับลดความดันที่ใช้ evaporator โรตารี่ที่ 40∘C ที่ข้นจากนั้นได้ถูกวางบนอลูมิเนียมฟอยล์ก่อนหยุดแห้ง สารสกัดจากส่วนที่เหลือถูกละลายใน 1mL ของกอซน้ำก่อนใช้2.3. เคมี ร้าน streptozotocin (STZ) จากซิก (สหรัฐอเมริกา) สารเคมีและ reagents ใช้อื่น ๆ ทั้งหมดการศึกษานี้ได้วิเคราะห์เกรด Glibenclamide (Sugatrolไฮเดอราบัด อินเดีย) ที่ซื้อจากร้านขายยาในท้องถิ่น2.4 การทดลองออกแบบ ผู้ใหญ่ชาย Wistar หนูชั่งระหว่าง 150 และ 180 g ได้รับมาจากครอบคลุมบนศรีวิสาหกิจ บังกาลอร์ อินเดีย พวกเขาได้แต่ละห้องพักในการทำความสะอาด ฆ่าเชื้อกรงที่ polypropylene ภายใต้เงื่อนไขมาตรฐาน(วงจรไฟ/ดำ 12 h) ถึงมาตรฐานฟรีเชา (ฮินดัสแตนคาน จำกัด บังกาลอร์ อินเดีย) และน้ำad libitum ก่อนเริ่มการทดลอง การสัตว์ที่สามารถ acclimatize เงื่อนไขปฏิบัติในหนึ่งสัปดาห์ มีการออกแบบการทดลองสัตว์และดำเนินการตามมาตรฐานทางจริยธรรมอนุมัติตามท้องถิ่นกระทรวงของสังคม Justices และอำนาจ รัฐบาลอินเดีย และที่สถาบันแนวทางของคณะกรรมการจริยธรรมสัตว์ (ความละเอียดไม่05/(i)/a/CPCSEA/IAEC/SVU/MDN-PVR/dt.13.09.2010)2.5 การเหนี่ยวนำของโรคเบาหวานทดลอง โรคเบาหวานได้เกิดจากการฉีด intraperitoneal เดียวของสดใหม่เตรียม STZ โซลูชัน (ซิก หมายเลข 242-646-8) (50mg/kgในซิเตรตบัฟเฟอร์ 0.01 M, pH 4.5) ให้หนูอดแอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์โรคเบาหวานได้รับการยืนยัน โดยสถานะของ polydipsia และเช่นกันเนื่อง ด้วยวัดพลา nonfasting polyurea ริดที่น้ำตาลในระดับ 48h หลังจากฉีด STZ สัตว์เฉพาะที่ได้ยืนยันให้ระดับน้ำตาลในเลือดมากกว่า250mg/dL ได้รวมอยู่ในการศึกษา มีสัตว์ทั้งหมดอนุญาตให้ใช้ฟรีถึง tapwater เม็ด chowin สามัคคีมีคำแนะนำของคณะกรรมการจรรยาบรรณสถาบันสัตว์หนูถูกแบ่งออกเป็น 5 กลุ่มหกสัตว์ดังนี้กลุ่ม i:หนูปกติ (ควบคุมโดยสัตว์ที่ได้รับเพียงบัฟเฟอร์)กลุ่ม II: R. พันชั่งถือว่าปกติหนู (200 มิลลิกรัม /กิโลกรัม/วัน) [13, 23]กลุ่มที่ III: (ไม่ถูกรักษา) หนูการเป็นโรคเบาหวานกลุ่ม IV: R. พันชั่งรักษาเบาหวานหนู (200 มิลลิกรัม /กิโลกรัม/วัน)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 คอลเลกชันของพืชวัสดุ ใบใหม่ของอาร์ทองพันชั่งถูกเก็บรวบรวมจากมาลาฮิลส์, ฟลอ Chittoor เขตของรัฐอานธรประเทศตั้งแต่เดือนกรกฎาคมถึงเดือนตุลาคม 2009 ตัวอย่างพืชที่ถูกตรวจสอบจะเป็นสปีชีส์ที่ถูกต้องโดยดรMadhava Setty เป็นนักพฤกษศาสตร์จากกรมพฤกษศาสตร์ เอสโวลต์ มหาวิทยาลัยฟลอินเดีย. 2.2 เตรียมความพร้อมของการแยก ใบสดของอาร์ทองพันชั่ง(500 กรัม) เป็นสีที่แห้งและบดเป็นผงที่ดีโดยใช้เครื่องบดกล(TTK Prestige เชนไนอินเดีย) วัสดุปลูกผงหมักและถูกเขย่าในเมทานอลโดยใช้เครื่องปั่นบาท (เทอร์โมวิทยาศาสตร์, มุมไบ, อินเดีย) สำหรับสารสกัดจาก 48 h.The ถูกกรองด้วยกระดาษกรอง(Whatman no. 1) และระเหยแห้งภายใต้สูญญากาศที่มีความดันลดลงโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุนที่40∘C สมาธิถูกวางไว้แล้วในลูมิเนียมฟอยล์ก่อนที่จะแช่แข็งอบแห้ง สารสกัดที่เหลือก็เลือนหายไปใน 1 mL ของการฆ่าเชื้อในน้ำก่อนการใช้งาน. 2.3 สารเคมี streptozotocin (STZ) ซื้อมาจากซิกม่า(USA) สารเคมีอื่น ๆ ทั้งหมดและสารเคมีที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มีเกรดการวิเคราะห์ glibenclamide (Sugatrol, Hyderabad, อินเดีย) ซื้อมาจากร้านขายยาในท้องถิ่น. 2.4 การออกแบบการทดลอง ผู้ใหญ่หนูวิสตาร์ชายชั่งน้ำหนักระหว่าง 150 และ 180 กรัมที่ได้รับจากศรีวาระ Enterprises, บังกาลอร์, อินเดีย พวกเขาถูกตั้งเป็นรายบุคคลในการทำความสะอาดกรงโพรพิลีนผ่านการฆ่าเชื้อภายใต้เงื่อนไขมาตรฐาน(12 ชั่วโมงแสง / รอบเข้ม) มีอิสระที่จะเข้าถึงมาตรฐานเชา(Hindustan Lever จำกัด บังกาลอร์, อินเดีย) และน้ำโฆษณาlibitum ก่อนที่จะเริ่มการทดลองที่สัตว์ได้รับอนุญาตให้ปรับตัวให้เข้ากับสภาพห้องปฏิบัติการเป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ การทดลองในสัตว์ได้รับการออกแบบและดำเนินการให้สอดคล้องกับมาตรฐานทางจริยธรรมได้รับการอนุมัติจากกระทรวงท้องถิ่นของผู้พิพากษาทางสังคมและเพิ่มขีดความสามารถของรัฐบาลอินเดียและสถาบันคณะกรรมการจริยธรรมสัตว์แนวทาง(มติ no. 05 / (i) / a / CPCSEA / IAEC /SVU/MDN-PVR/dt.13.09.2010). 2.5 การชักนำให้เกิดโรคเบาหวานการทดลอง โรคเบาหวานได้ที่เกิดจากการฉีดเข้าช่องท้องเดียวของสดใหม่แก้ปัญหาSTZ เตรียม (ซิกม่าไม่มี. 242-646-8) (50mg / kg ในบัฟเฟอร์ซิเตรต 0.01 M ค่า pH 4.5) หนูค้างคืน-Fasted. โรคเบาหวานได้รับการยืนยันจากการปรากฏตัว ของ polydipsia และPolyurea เช่นเดียวกับวัดพลาสม่า nonfasting ระดับน้ำตาลใน 48 ชั่วโมงหลังจากการฉีด STZ สัตว์ชนิดเดียวที่ได้รับการยืนยันว่าจะมีระดับน้ำตาลในเลือดสูงกว่า250mg / dL ถูกรวมอยู่ในการศึกษา ทั้งหมดสัตว์ที่ถูกได้รับอนุญาตให้ใช้บริการฟรีที่ tapwater และเม็ด chowin ตามแนวทางของคณะกรรมการสถาบันจริยธรรมสัตว์. หนูถูกแบ่งออกเป็นห้ากลุ่มของสัตว์หกแต่ละดังนี้. กลุ่ม: หนูปกติ (ควบคุม-สัตว์ที่ได้รับเพียงบัฟเฟอร์) . กลุ่มที่สอง: อาร์ทองพันชั่งรับการรักษาหนูปกติ (200 มก / กก. / วัน) [13, 23]. กลุ่มที่สาม: หนูเบาหวาน (ได้รับการรักษา). กลุ่มที่สี่: อาร์ทองพันชั่งรับการรักษาหนูเบาหวาน (200 มก / กก. / วัน) .

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . คอลเลกชันของวัสดุพืช ใบสดของ nasutus
เก็บจากทิรูมาลา Hills , ติรูปัติ chittoor
, เขตของรัฐอานธรประเทศ ตั้งแต่เดือนกรกฎาคมถึงตุลาคม 2552
ตัวอย่างพืช ยืนยันจะแก้ไขชนิดโดยดร.
มเธวะ Setty , นักพฤกษศาสตร์จากภาควิชาพฤกษศาสตร์ , S .
V มหาวิทยาลัย , Tirupati , อินเดีย .
2.2 . การเตรียมสารสกัด .ใบสดของ nasutus
( 500 กรัม ) สีแห้งและบดเป็นผงละเอียดใช้
โม่กล ( TTK Prestige , เชนไน , อินเดีย ) วัสดุและผงพืช
macerated ระส่ำระสาย
เมทานอลโดยใช้อ่าง shaker ( เทอร์โมวิทยาศาสตร์ , มุมไบ ,
อินเดีย ) 48 ชั่วโมง แล้วกรองด้วยกระดาษกรอง g
( whatman หมายเลข 1 ) และระเหยแห้งภายใต้สูญญากาศ
กับการลดความดัน โดยใช้เครื่องระเหยแบบที่ 40 ∘ C
สมาธิถูกวางไว้แล้วในอลูมิเนียมฟอยล์ก่อน
แห้งแข็ง สารสกัดที่เหลือถูกละลายในน้ำก่อนใช้ 1ml เป็นหมัน
.
2.3 เคมีภัณฑ์ streptozotocin ( เบาหวาน ) ซื้อมาจาก
Sigma ( USA ) ทั้งหมดอื่น ๆ สารเคมี และสารเคมีที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้วิเคราะห์
เกรด ไกลเบนคลาไมด์ ( sugatrol
, Hyderabad ,อินเดีย ) ซื้อจากร้านขายยาท้องถิ่น
2.4 . การออกแบบการทดลอง ผู้ใหญ่ใช้หนูพันธุ์วิสตาร์เพศผู้น้ำหนัก
ระหว่าง 150 และ 180 กรัม ได้จาก บริษัท ศรีหลั่ง
, Bangalore , อินเดีย พวกเขาถูกแยกอยู่
ในสะอาด ปลอดเชื้อ โพรพิลีน กรงภายใต้เงื่อนไขมาตรฐาน ( 12 H
แสง / มืดรอบ ) กับการเข้าถึงฟรีเพื่อ Chow มาตรฐาน
( Hindustan คันโยก จำกัด , บังกาลอร์ , อินเดีย ) และน้ำ
อย่างเต็มที่ ก่อนเริ่มการทดลอง
สัตว์ สามารถปรับตัวเข้ากับสภาพห้องปฏิบัติการ
เป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ สัตว์ทดลองออกแบบ
และดำเนินการตามมาตรฐานจริยธรรม
รับรองโดยกระทรวงท้องถิ่นของตุลาการและสังคม
พลังของรัฐบาลอินเดีย และคณะกรรมการจรรยาบรรณการใช้สัตว์ของสถาบัน ( ความละเอียดไม่

แนวทาง05 / ( ) / / / / / cpcsea iaec svu mdn-pvr / DT . 13.09.2010 ) .
2.5 การทดลองเบาหวาน โรคเบาหวาน คือ การฉีดเข้าช่องท้อง

เตรียมสดเดี่ยวของเบาหวาน โซลูชั่น ( ซิกม่า ไม่ 242-646-8 ) ( 50 กิโลกรัม
ในซิเตรทบัฟเฟอร์ 0.01 M pH 4.5 ) ค้างคืนอดอาหารหนู
โรคเบาหวานได้รับการยืนยันโดยการปรากฏตัวของ polydipsia และ
โพลียูเรีย ตลอดจนวัด
nonfasting พลาสมาเลี้ยงระดับกลูโคสหลังต่อการฉีด แต่สัตว์ที่
ได้รับการยืนยันจะมีระดับน้ำตาลในเลือดมากกว่า
250mg / dl ถูกรวมอยู่ในการศึกษา สัตว์ทุกชนิดมี
อนุญาตให้เข้าฟรี และตาม tapwater เม็ด chowin
กับแนวทางของคณะกรรมการจริยธรรมของสถาบันสัตว์ .
หนูถูกแบ่งออกเป็นห้ากลุ่มของหกสัตว์แต่ละ

กลุ่ม 1 ดังนี้หนูปกติ ( การควบคุมสัตว์รับ

เพียงบัฟเฟอร์ ) กลุ่ม 2 : R . nasutus ถือว่าหนูปกติ ( 200 มก. / กก. / วัน ที่ 13
) [ 23 ] .
3 : กลุ่มหนูเบาหวาน ( ดิบ )
4 R . nasutus รักษากลุ่มหนูเบาหวาน (
200 มก. / กก. / วัน )