2.6 Construction of the expression

2.6 Construction of the expression vector
The yeast expression vector pSFAU was opened at the unique EcoRI/ BamHI site downstream of the SFA gene, which positions downstream of ADH2 promoter. Then the XYL2 gene of C. shehatae was inserted as an EcoRI/ BamHI fragment to generate the plasmid pSFAU-XDH (Figure 2). The recombinant plasmid was sent to sequencing at 1st Base Laboratory (Malaysia) in order to confirm the correction of the inserted gene. The primers Seq_SFA_1102-1121 (5’GAAGATTTGCATAACGGTG3’) and Seq_p GBDU_EcoRI50_RV (5¢GAACTTGCGGGGTTTTTC3’) were used for the sequencing reaction.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 ก่อสร้างของเวกเตอร์นิพจน์เปิด pSFAU เวกเตอร์นิพจน์ยีสต์ที่ EcoRI เฉพาะ / BamHI ไซต์น้ำของยีน SFA ซึ่งตำแหน่งน้ำของโปรโมเตอร์ ADH2 แล้วยีน XYL2 ของ C. shehatae ถูกแทรกเป็น EcoRI มี / BamHI แยกส่วนในการสร้าง plasmid pSFAU-XDH (2 รูป) Recombinant plasmid ถูกส่งไปที่ลำดับที่ 1 ฐานปฏิบัติ (มาเลเซีย) เพื่อยืนยันการแก้ไขยีนแทรก ป.ณ. 1121 Seq_SFA_1102 ไพรเมอร์ (5' GAAGATTTGCATAACGGTG3') และ Seq_p GBDU_EcoRI50_RV (GAACTTGCGGGGTTTTTC3 เลข 5') ใช้สำหรับปฏิกิริยาลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 การก่อสร้างเวกเตอร์แสดงออก
แสดงออกยีสต์เวกเตอร์ pSFAU ถูกเปิดที่เว็บไซต์ EcoRI ไม่ซ้ำกัน / BamHI ปลายน้ำของยีน SFA ซึ่งตำแหน่งปลายน้ำของโปรโมเตอร์ ADH2 จากนั้นยีน XYL2 ซี shehatae ถูกแทรกเป็นส่วน EcoRI / BamHI เพื่อสร้างพลาสมิด pSFAU-XDH (รูปที่ 2) พลาสมิด recombinant ถูกส่งไปลำดับที่ 1 ฐานปฏิบัติการ (มาเลเซีย) เพื่อยืนยันการแก้ไขของยีนที่ใส่ ไพร Seq_SFA_1102-1121 (5'GAAGATTTGCATAACGGTG3 ') และ Seq_p GBDU_EcoRI50_RV (5 ¢ GAACTTGCGGGGTTTTTC3') ถูกนำมาใช้สำหรับการเกิดปฏิกิริยาลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 การก่อสร้างเวกเตอร์การแสดงออก
ยีสต์เวกเตอร์การแสดงออก psfau เปิดที่โดดเด่นด้วย BamHI ของ SFA / เว็บไซต์ด้านยีน ซึ่งตำแหน่งของโปรโมเตอร์ปลายน้ำ adh2 . แล้วยีน xyl2 C . shehatae แทรกเป็นชิ้นส่วน / ชิ้นส่วนในการสร้าง xdh BamHI psfau พลาสมิด ( รูปที่ 2 )รีคอมบิแนนท์พลาสมิดที่ถูกส่งไปยังลำดับที่ 1 ฐานปฏิบัติการ ( มาเลเซีย ) เพื่อยืนยันการแก้ไขของการแทรกยีน ไพรเมอร์ seq_sfa_1102-1121 ( 5'gaagatttgcataacggtg3 ' ) และ seq_p gbdu_ecori50_rv ( 5 ¢ gaacttgcggggtttttc3 ' ) ถูกใช้สำหรับการเกิดปฏิกิริยา