4. Discussion This paper describes

4. Discussion This paper describes an mRT-PCR assay for the simultaneous detection of three viruses infecting pear trees. Pear is a perennial fruit crop, in which viruses can replicate and spread to the whole plant, and then persistently affect its development. Although more than ten viruses and virus-like pathogens have been reported, Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV), Apple stem pitting virus (ASPV) and Apple stem grooving virus (ASGV) are the most commonly occurring viruses in commercially cultivated pear plants, and these viruses are also commonly present in apple plants. They have been included in the lists of pathogens requiring tests in certification schemes in many countries (EPPO, 1999). The mRT-PCR assay described above provides a sensitive tool for the simultaneous detection of these viruses in a large number of pear materials. For the effective application of mRT-PCR assay for virus detection in specific hosts, it is important to determine experimentally the specificity and sensitivity of the primers and to optimize the PCR conditions in those hosts. In this study, serial PCRs were tried by using different annealling temperatures, primer concentration ratios, and primer pairs to determine the best reaction program and primer combination for the mRT-PCR assay. Using the optimized mRT-PCR assay, the expected fragments of 500 bp, 358 bp and 247 bp specific for ASGV,ACLSV and ASPV could be identified clearly in agarose gel, andthere was not the interference of un-specific products in the PCR products. The results indicated that the primer pairs selected were virus-specific, and that the optimized PCR conditions were ideal for the rapid detection and discrimination of those three viruses in RNA preparations from pear plants.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

4. สนทนาเอกสารนี้อธิบายการทดสอบรถไฟ PCR ตรวจไวรัสสามติดต้นไม้ต้นพร้อม ลูกแพร์เป็นพืชยืนต้นผลไม้ ที่ไวรัสสามารถจำลอง และแพร่กระจายไปยังโรงงานทั้งหมด และจากนั้น สามารถส่งผลกระทบต่อการพัฒนา ถึงแม้ว่าไวรัสมากกว่าสิบและโรคไวรัสเช่นรายงาน แอปเปิ้ลปากใบจุดไวรัส (ACLSV), แอปเปิ้ลเกิด pitting ไวรัส (ASPV) และแอปเปิ้ลสเต็ม grooving ไวรัส (ASGV) เป็นไวรัสมักเกิดขึ้นในพืชต้นปลูกในเชิงพาณิชย์ และไวรัสเหล่านี้มีอยู่ทั่วไปในพืชแอปเปิ้ล พวกเขาได้ถูกรวมในรายชื่อของโรคที่ต้องการทดสอบในรูปแบบใบรับรองในประเทศ (สนพ. 1999) วิเคราะห์รถไฟ PCR ที่อธิบายไว้ข้างต้นให้เป็นเครื่องมือสำคัญสำหรับการตรวจพบไวรัสเหล่านี้ในจำนวนวัสดุลูกแพร์ขนาดใหญ่พร้อม สำหรับการประยุกต์ใช้วิเคราะห์รถไฟ PCR สำหรับการตรวจหาไวรัสในโฮสต์เฉพาะ มันเป็นสิ่งสำคัญ เพื่อพิจารณา experimentally specificity และความไวของไพรเมอร์ที่ และปรับเงื่อนไข PCR ในโฮสต์ดังกล่าว ในการศึกษานี้ PCRs ประจำได้พยายาม โดยใช้อุณหภูมิแตกต่างกัน annealling อัตราส่วนความเข้มข้นของสีรองพื้น และคู่รองพื้นเพื่อกำหนดปฏิกิริยาโปรแกรมและสีรองพื้นกันสำหรับทดสอบรถไฟ PCR ใช้เพิ่มประสิทธิภาพรถไฟ PCR assay ชิ้นส่วนที่คาดไว้ของ 500 bp, 358 bp และ 247 bp เฉพาะสำหรับ ASGV, ACLSV และ ASPV สามารถระบุอย่างชัดเจนใน agarose เจล andthere ไม่มีสัญญาณรบกวนของผลิตภัณฑ์ยังไม่ได้ระบุในผลิตภัณฑ์ PCR ผลระบุว่า คู่รองพื้นเลือกได้เฉพาะไวรัส และว่า เงื่อนไข PCR ให้เหมาะก็เหมาะสำหรับการตรวจสอบอย่างรวดเร็วและการเลือกปฏิบัติของไวรัสที่สามในอาร์เอ็นเอเตรียมจากพืชลูกแพร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

4. พูดคุยเรื่องกระดาษนี้จะอธิบายถึงการวิเคราะห์ MRT-PCR สำหรับการตรวจสอบพร้อมกันของสามไวรัสติดไวรัสต้นไม้ลูกแพร์ ลูกแพร์เป็นพืชผลไม้ยืนต้นที่ไวรัสสามารถทำซ้ำและแพร่กระจายไปยังโรงงานทั้งหมดและจากนั้นเสมอส่งผลกระทบต่อการพัฒนาของ แม้ว่าไวรัสมากกว่าสิบและเชื้อโรคไวรัสเช่นได้รับการรายงานว่าแอปเปิ้ลใบจุด chlorotic ไวรัส (ACLSV), แอปเปิ้ลออกมาบ่อไวรัส (ASPV) และแอปเปิ้ลออกมาเซาะร่องไวรัส (ASGV) เป็นไวรัสที่เกิดขึ้นมากที่สุดในพืชลูกแพร์ที่ปลูกในเชิงพาณิชย์ และไวรัสเหล่านี้ยังเป็นปกติท​​ี่มีอยู่ในพืชแอปเปิ้ล พวกเขาได้รับการรวมอยู่ในรายชื่อของเชื้อโรคที่ต้องทดสอบในโครงการได้รับการรับรองในหลายประเทศ (สนพ. , 1999) ทดสอบ MRT-PCR ที่อธิบายข้างต้นให้เป็นเครื่องมือที่มีความสำคัญสำหรับการตรวจสอบพร้อมกันของไวรัสเหล่านี้ในจำนวนมากของวัสดุลูกแพร์ สำหรับโปรแกรมที่มีประสิทธิภาพของการทดสอบ MRT-PCR ในการตรวจหาไวรัสในโฮสต์ที่เฉพาะเจาะจงเป็นสิ่งสำคัญในการตรวจสอบการทดลองจำเ​​พาะและความไวของไพรเมอร์เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพและเงื่อนไข PCR ในครอบครัวที่ ในการศึกษานี้ PCRs อนุกรมกำลังพยายามโดยใช้อุณหภูมิที่แตกต่างกัน annealling อัตราส่วนความเข้มข้นของไพรเมอร์และคู่ไพรเมอร์เพื่อตรวจสอบโปรแกรมการตอบสนองที่ดีที่สุดและการรวมกันไพรเมอร์สำหรับการวิเคราะห์ MRT-PCR การใช้ที่ดีที่สุด MRT-PCR ทดสอบ, ชิ้นส่วนที่คาดว่าจะ 500 bp, 358 bp และ 247 bp ที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ ASGV, ACLSV และ ASPV อาจจะระบุไว้อย่างชัดเจนในเจล agarose, andthere ไม่รบกวนของผลิตภัณฑ์ยกเลิกเฉพาะในผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ ผลการวิจัยพบว่าคู่ไพรเมอร์ที่เลือกเป็นไวรัสที่เฉพาะเจาะจงและที่ดีที่สุดเงื่อนไข PCR เป็นที่เหมาะสำหรับการตรวจสอบอย่างรวดเร็วและการเลือกปฏิบัติของผู้ที่สามในการเตรียมไวรัสอาร์เอ็นเอจากพืชลูกแพร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

4 . การอภิปรายในบทความนี้จะกล่าวถึงการใช้ MRT PCR ตรวจหาพร้อมกันสามไวรัสติดต้นไม้ลูกแพร์ ลูกแพร์เป็นไม้ผลยืนต้น ซึ่งไวรัสจะคัดลอกและแพร่กระจายไปยังโรงงานทั้งหมด และไม่ส่งผลกระทบต่อการพัฒนาของ ถึงแม้ว่ามากกว่าสิบไวรัสและไวรัส เช่น เชื้อโรคมีการรายงาน , แอปเปิ้ล chlorotic ไวรัสใบจุด ( aclsv )ก้านแอปเปิ้ลแบบไวรัส ( aspv ) และก้านแอปเปิ้ลเซาะไวรัส ( asgv ) ส่วนใหญ่มักเกิดขึ้นไวรัสในลูกแพร์ปลูกในเชิงพาณิชย์พืชและไวรัสเหล่านี้ยังมักมีอยู่ในพืชแอปเปิ้ล พวกเขาได้รับการรวมอยู่ในรายการของเชื้อโรคที่ต้องการทดสอบในการรับรองรูปแบบในหลายประเทศ ( สนพ. , 1999 )MRT PCR assay ที่อธิบายข้างต้นจะให้เครื่องมือที่สําคัญสําหรับพร้อมกันการตรวจหาไวรัสเหล่านี้เป็นจำนวนมากของวัสดุที่ลูกแพร์ สำหรับประสิทธิภาพการประยุกต์ใช้รถไฟใต้ดิน PCR assay สำหรับการตรวจจับไวรัสเฉพาะในครอบครัว มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะตรวจสอบโดยเฉพาะและความไวของวิธี PCR และปรับสภาพในครอบครัวนั้น ในการศึกษานี้pcrs ต่อเนื่องได้โดยใช้ที่แตกต่างกัน annealling อุณหภูมิ อัตราส่วนความเข้มข้นของรองพื้นและ primer คู่เพื่อหาที่ดีที่สุดโปรแกรมเมอร์และปฏิกิริยารวม MRT PCR assay . ใช้ปรับ MRT PCR โดยคาดว่า เศษของ 500 BP , 358 BP และ 247 BP เฉพาะ asgv aclsv aspv , และอาจจะระบุไว้อย่างชัดเจนในกาโรสเจลandthere ไม่ใช่การแทรกแซงของผลิตภัณฑ์ที่เฉพาะเจาะจงและในผลิตภัณฑ์ PCR พบว่าไพรเมอร์คู่เลือก ได้แก่ ไวรัสที่เฉพาะเจาะจงและเงื่อนไขที่เหมาะสมและเหมาะสำหรับการตรวจสอบอย่างรวดเร็วและการเลือกปฏิบัติของทั้งสามชนิดซึ่งเตรียมจากพืชลูกแพร์