L. sakei subspecies sakei JCM 1157 and L. mesenteroides subspecies mesenteroides NBRC 100496 were adhered by drying onto stainless steel dishes. To produce cultures, the bacterial cells were inoculated into 20 mL Gifu Anaerobic Medium (GAM) broth (Nissui Pharmaceutical, Tokyo) and incubated at 30 °C for 72 h. Under these conditions, the cultures reached stationary phase.
Dairy (cow) milk, soy milk, beef, pork, and eggs were purchased from retail shops in Tokyo. The beef and pork were minced separately with an equal amount of distilled water (DW) for 60 s in a blender (16-Speed Blender; Osaka Chemical; Osaka) and shaken for 60 min at room temperature. The gravies were collected by centrifugation (5000 × g for 10 min) and sterilized by filtration with a 0.2 μm pore filter (Minisart, Sartorius, Goettingen). The gravies, dairy milk, soy milk, egg albumen, egg yolk, and whole egg samples were serial-diluted by 10-fold increments in DW to a maximum dilution of 10−5 (100000-fold).
L. sakei ช่ำชอง sakei JCM 1,157 ลิตรและ mesenteroides ช่ำชอง mesenteroides NBRC 100,496 ถูกยึดติดกับการอบแห้งลงบนจานสแตนเลส วัฒนธรรมในการผลิตเซลล์แบคทีเรียถูกเชื้อเข้าสู่ 20 มลกิ Anaerobic ปานกลาง (GAM) น้ำซุป (Nissui ยา, โตเกียว) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง ภายใต้เงื่อนไขเหล่าวัฒนธรรมถึงเฟส. นม (วัว) นม, นมถั่วเหลือง, เนื้อวัว, เนื้อหมูและไข่ที่ซื้อมาจากร้านค้าปลีกในกรุงโตเกียว เนื้อวัวและเนื้อหมูที่ถูกสับแยกต่างหากกับจำนวนเงินที่เท่ากันของน้ำกลั่น (DW) 60 ในเครื่องปั่น (16 ความเร็วปั่น; โอซาก้าเคมีโอซาก้า) และเขย่าเป็นเวลา 60 นาทีที่อุณหภูมิห้อง เกรวี่ที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยง (5000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที) และผ่านการฆ่าเชื้อโดยการกรองที่มีรูขุมขนกรอง 0.2 ไมครอน (Minisart, Sartorius, Goettingen) เกรวี่, นม, นมถั่วเหลือง, ไข่ขาวไข่ไข่แดงและตัวอย่างไข่ทั้งถูกอนุกรมเจือจางลงด้วยการเพิ่มขึ้น 10 เท่าใน DW เพื่อเจือจางสูงสุด 10-5 (100000 เท่า)
การแปล กรุณารอสักครู่..
