Expression and purificationThe colo

Expression and purificationThe colonies were picked and yeast DNA was isolated (BMC,Biotechnology-2014) and expressed with inducer as methanol according to manufacturer’s protocol.

SDS-PAGE and silver staining was also used for the confirmation of expression.

His tag containing expressed protein was then purified with Ni-NTA column (QIAGEN,Germany) using affinity chromatography.

Protein was eluted with250 mM of imidazole containing elution buffer.

It was then dia-lyzed with MilliQ water and samples were collected and used for characterization.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อาณานิคมนิพจน์และ purificationThe ได้รับเลือก และดีเอ็นเอของเชื้อยีสต์แยกต่างหาก (BMC เทคโนโลยีชีวภาพ-2014) และแสดงกับ inducer เป็นเมทานอลตามโพรโทคอลของบริษัทผู้ผลิต หน้า SDS และย้อมสีเงินถูกใช้สำหรับการยืนยันของนิพจน์ ป้ายเขาประกอบด้วยโปรตีนแสดงถูกบริสุทธิ์ที่ มีคอลัมน์ Ni NTA (QIAGEN เยอรมนี) แล้วใช้ความสัมพันธ์ chromatography โปรตีนถูก eluted with250 mM ของอิมิดาโซลประกอบด้วยบัฟเฟอร์ elution ถูกแล้ว dia lyzed MilliQ น้ำ และเก็บรวบรวม และใช้สำหรับการจำแนกตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การแสดงออกและอาณานิคม purificationThe ถูกหยิบและดีเอ็นเอยีสต์ที่แยกได้ (BMC, เทคโนโลยีชีวภาพ-2014) และแสดงกับชักนำเป็นเมทานอลตามโปรโตคอลของผู้ผลิต. SDS-PAGE และย้อมสีเงินก็ยังใช้สำหรับการยืนยันในการแสดงออก. แท็กของเขาที่มีโปรตีนแสดงความเป็น บริสุทธิ์แล้วด้วยคอลัมน์ Ni-NTA (QIAGEN, เยอรมนี) โดยใช้โคสัมพันธ์ที่ใกล้ชิด. โปรตีนถูกชะ with250 มิลลิเมตร imidazole มีบัฟเฟอร์ชะ. มันถูกแล้ว dia-lyzed ด้วยน้ำ MilliQ และตัวอย่างถูกเก็บรวบรวมและใช้สำหรับตัวละคร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแสดงออกและ purificationthe อาณานิคมถูกเลือกและดีเอ็นเอ ยีสต์ที่แยก ( BMC ) , และ biotechnology-2014 ) ด้วยเอนไซม์เป็นเมทานอล ตามขั้นตอนของผู้ผลิต

ถูกเงินย้อมยังใช้สำหรับการยืนยันของการแสดงออก

ของเขาแท็กที่มีโปรตีนให้บริสุทธิ์ด้วยคอลัมน์แสดงแล้วฉัน NTA ( QIAGEN , เยอรมนี ) โดยใช้ affinity chromatography .

ตัวอย่างของโปรตีน with250 มม. อิมิดาโซล ( ที่มีบัฟเฟอร์

ก็เขา lyzed ด้วยน้ำ milliq และตัวอย่างมีจำนวนตัวละคร