ntravenous or intraperitoneal admin

ntravenous or intraperitoneal administration (7, 19,
20), whereas in humans, HCA has only been taken
orally. This raises the possibility that the inefficacy or
inability of HCA to induce weight loss in humans could
be due to its limited absorption. Indeed, as for oxalate
and tetracycline, HCA’s polar functional groups could
render it susceptible to poor absorption due to possible
interactions with compounds in foods or drugs (21, 22).
If absorption is indeed limited, HCA may not be
present in the blood in concentrations sufficient for it to
exert its effects.
None of the human studies evaluating the effect of
HCA on body weight, fat oxidation, and DNL has ac-
tually reported HCA blood concentrations and a simple
method for its measurement is not currently available.
The development of a method to quantify HCA concen-
tration in plasma is critical because it will allow to
estimate the extent of HCA absorption, and thereby
the dose of HCA necessary to effectively inhibit DNL in
humans. This paper describes a new GC/MS method
that can be used to quantify HCA in blood, thereby
providing a tool for assessing HCA availability in hu-
mans.
MATERIALS AND METHODS
Materials.
[U-
13
C]Citrate was purchased form Iso-
tec Incorporated (Miamisburg, OH). Hydroxycitrate
(CitriMax HCA-600-SXG-P capsules,
;
500 mg) and
(
2
)-
threo
-hydroxycitric acid ethylenediamine salt, the
purified hydroxycitrate, were graciously provided by
InterHealth Nutraceuticals Incorporated (Benicia,
CA). The derivatizing reagent,
N,O
-bis-(trimethyl-
silyl)fluoroacetamide
1
10% trimethylchlorosilane
(BSTFA
1
10% TMCS), was purchased from Pierce
(Rockford, IL).
Subjects.
Four subjects, three males and one fe-
male, agreed to participate in the study (Table 1). They
were all healthy, nonsmokers that had no history of
cardiovascular disease or diabetes. Before taking part
in the study, subjects were asked to sign a consent form
approved by the Committee for Protection of Human
Subjects of the University of California at Berkeley.
Protocol.
Subjects came to the laboratory in the
fasting condition and were asked to tak
e2gofHCA.
Blood samples were collected 30 min after ingestion of
the HCA supplement and every 30 min thereafter over
a period of 3.5 to 4 h. A control subject, who did not
take HCA supplements, donated approximately 50 ml
of blood to be used to construct the standard curve. The
blood samples were centrifuged at 2500 rpm for 20 min
to separate the plasma, which was then stored at
2
80°C until processed.
In vitro preparation of the standard curve.
Nor-
mally, the labeled version of the compound of interest
would be the best internal standard for quantification.
However, labeled HCA is not commercially available
and it cannot be easily synthesized from other labeled
compounds. [U-
13
C]Citrate (CA*) was therefore chosen
as an internal standard because its structure and
chemical properties are similar to those of HCA. Also,
labeled citrate is easily distinguished from citrate,
which is naturally occurring in the human body. To
construct a standard curve, plasma samples (350
m
l)
from a control subject who had not taken HCA supple-
ments were mixed thoroughly with 10
m
g of CA* and a
gradient (0, 1, 2, 4, 6, 8, and 10
m
g) of purified HCA
ethylenediamine. The amount of purified HCA added
to the plasma samples was then plotted against the
corresponding ratio of peak areas of HCA to CA* ob-
tained from the mass spectra (observed ratio).
In preparation for GC/MS, all plasma samples were
deproteinized with 700
m
l of 7% perchloric acid and

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ntravenous หรือเยื่อบุช่องท้องการบริหาร (7, 19,
20) ในขณะที่ในมนุษย์ HCA มีเพียงถูกนำ
มารับประทาน นี้ทำให้เกิดความเป็นไปได้ว่า inefficacy หรือ
ไร้ความสามารถของ HCA จะทำให้เกิดการสูญเสียน้ำหนักในมนุษย์อาจ
จะเป็นเพราะการดูดซึม จำกัด แท้จริงเป็นสำหรับออกซาเลต
และ tetracycline, การทำงานเป็นกลุ่มขั้ว HCA อาจ
ทำให้มันไวต่อการดูดซึมไม่ดีเนื่องจากอาจมี
การสื่อสารกับสารประกอบในอาหารหรือยาเสพติด (21, 22).
ถ้าการดูดซึมจะถูก จำกัด แน่นอน HCA อาจจะไม่
อยู่ในเลือดใน ความเข้มข้นพอเพียงให้มัน
ออกแรงผลกระทบของมัน.
ไม่มีการศึกษาของมนุษย์การประเมินผลกระทบของ
HCA ต่อน้ำหนักตัวออกซิเดชันไขมันและมี DNL ทํา
รายงาน tually ความเข้มข้นของเลือด HCA และง่าย
วิธีการวัดของมันไม่ได้มีอยู่ในปัจจุบัน.
การพัฒนา วิธีการที่จะหาจำนวน HCA เข้มข้น
เคี้ยวในพลาสม่าเป็นสิ่งสำคัญเพราะมันจะช่วยให้การ
ประเมินขอบเขตของการดูดซึม HCA และจึง
ปริมาณของ HCA ที่จำเป็นในการได้อย่างมีประสิทธิภาพยับยั้งการ DNL ใน
มนุษย์ กระดาษนี้จะอธิบาย GC / MS วิธีการใหม่
ที่สามารถนำมาใช้ในการวัดปริมาณ HCA ในเลือดจึงช่วย
ให้เครื่องมือสำหรับการประเมินความพร้อมใน HCA hu-
Mans.
วัสดุและวิธีการ
วัสดุ.
[U-
13
รูปแบบ C] ซิเตรตถูกซื้อ Iso-
Tec Incorporated (Miamisburg โอ) Hydroxycitrate
(CitriMax แคปซูล HCA-600-SXG-P,
;
500 mg) และ
(
2
) -
threo
เกลือกรด ethylenediamine -hydroxycitric ที่
hydroxycitrate บริสุทธิ์ได้ให้พระกรุณาโปรดเกล้าฯโดย
InterHealth Nutraceuticals Incorporated (เบนี
CA) น้ำยา derivatizing,
N, O
-bis- (trimethyl-
silyl) fluoroacetamide
1
10% trimethylchlorosilane
(BSTFA
1
10% TMCs) ซื้อมาจากเพียร์ซ
(ฟอร์ด, IL).
วิชา.
สี่วิชาสามชายและหนึ่ง fe-
ชาย ตกลงที่จะมีส่วนร่วมในการศึกษา (ตารางที่ 1) พวกเขา
ทุกคนมีสุขภาพดีไม่สูบบุหรี่ที่มีประวัติของการไม่มี
โรคหลอดเลือดหัวใจหรือโรคเบาหวาน ก่อนที่จะมีส่วนร่วม
ในการศึกษาวิชาที่ถูกถามจะลงนามในใบยินยอม
รับการอนุมัติจากคณะกรรมการเพื่อการคุ้มครองของมนุษย์
เรื่องของมหาวิทยาลัยแห่งแคลิฟอร์เนียที่เบิร์กลีย์.
พิธีสาร.
วิชามาไปยังห้องปฏิบัติการในส่วน
เงื่อนไขการอดอาหารและได้ขอให้ตาก
e2gofHCA
เก็บตัวอย่างเลือด 30 นาทีหลังการกลืนกิน
อาหารเสริม HCA และทุก 30 นาทีหลังจากนั้นในช่วง
ระยะเวลาของการ 3.5 ถึง 4 ชั่วโมง เรื่องการควบคุมที่ไม่ได้
ใช้ผลิตภัณฑ์เสริมอาหาร HCA บริจาคประมาณ 50 มล.
ของเลือดไปใช้ในการสร้างเส้นโค้งมาตรฐาน
ตัวอย่างเลือดหมุนเหวี่ยงที่ 2,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที
ในการแยกพลาสม่าซึ่งได้รับการจัดเก็บไว้ที่
2
80 ° C จนการประมวลผล.
การเตรียมความพร้อมในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อของเส้นโค้งมาตรฐาน.
Nor-
Mally รุ่นที่มีป้ายกำกับของสารประกอบที่น่าสนใจ
จะเป็น มาตรฐานภายในที่ดีที่สุดสำหรับปริมาณ.
อย่างไรก็ตามป้าย HCA ไม่สามารถใช้ได้ในเชิงพาณิชย์
และไม่สามารถสังเคราะห์ได้อย่างง่ายดายจากที่มีข้อความอื่น ๆ
สารประกอบ [U-
13
C] ซิเตรต (CA *) จึงได้รับเลือกให้
เป็นมาตรฐานภายในเพราะโครงสร้างและ
คุณสมบัติทางเคมีที่มีความคล้ายคลึงกับของ HCA นอกจากนี้ยัง
มีป้ายกำกับซิเตรตเป็นอย่างแตกต่างจากซิเตรท
ซึ่งเป็นที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติในร่างกายมนุษย์ เพื่อ
สร้างเส้นโค้งมาตรฐานตัวอย่างพลาสมา (350
ม.
L)
จากเรื่องการควบคุมที่ไม่ได้ถ่าย HCA นิ่มนวล
ments ถูกผสมกับ 10
เมตร
กรัมของ CA * และ
การไล่ระดับสี (0, 1, 2, 4, 6, 8 และ 10
ม
ก.) ของ HCA บริสุทธิ์
ethylenediamine ปริมาณของ HCA บริสุทธิ์เพิ่ม
ตัวอย่างพลาสมาเป็นพล็อตแล้วกับ
อัตราส่วนที่สอดคล้องกันของพื้นที่จุดสูงสุดของ HCA กับ Ca * สังเกต
tained จากสเปกตรัมมวล (อัตราส่วนปฏิบัติ).
ในการเตรียมตัวสำหรับ GC / MS, ตัวอย่างพลาสมาทั้งหมดถูก
โปรตีนต่ำด้วย 700
เมตร
L ของกรดเปอร์คลอริก 7% และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ntravenous หรือในการบริหาร ( 7 , 1920 ) ส่วนในมนุษย์ , HCA ได้ถูกถ่ายแลกเปลี่ยน นี้จะเพิ่มความเป็นไปได้ที่การไร้ประโยชน์หรือการไร้ความสามารถของ HCA ที่ทำให้เกิดการสูญเสียน้ำหนักในมนุษย์เป็นเนื่องจากการดูดซึมที่ จำกัด ของมัน แน่นอน สำหรับ ซาเลทกับ tetracycline HCA ของขั้วโลกหมู่ฟังก์ชันได้ทำให้มันไวต่อการดูดซึมเนื่องจากเป็นไปได้ไม่ดีปฏิกิริยากับสารประกอบในอาหาร หรือ ยา ( 21 , 22 )จริงๆถ้าดูดซึม HCA ไม่อาจจำกัดอยู่ในเลือดในระดับที่เพียงพอสำหรับให้ออกแรงผลกระทบของมันไม่มีของมนุษย์การศึกษาประเมินผลของHCA ในน้ำหนักการออกซิเดชันไขมัน และ dnl มี AC -รายงาน tually HCA ความเข้มข้นเลือดและเรียบง่ายวิธีการวัดของที่ไม่สามารถใช้ได้ในขณะนี้การพัฒนาวิธีการตรวจวัด HCA concen -มลภาวะในพลาสมาเป็นสิ่งสำคัญเพราะจะช่วยให้ประมาณขอบเขตของ HCA การดูดซึม จึงปริมาณของ HCA ยับยั้ง dnl ในจำเป็น ได้อย่างมีประสิทธิภาพมนุษย์ บทความนี้อธิบายวิธี GC / MS ใหม่ที่สามารถใช้ให้ปริมาณ HCA ในเลือด จึงให้เครื่องมือสำหรับการประเมิน HCA ห้องพักในหู -Mans .วัสดุและวิธีการวัสดุ[ - U13 .C ] ซิเตรตซื้อ ISO - แบบฟอร์มTEC Incorporated ( ไมอามีส์เบิร์ก โอ ) hydroxycitrate( hca-600-sxg-p Citrimax แคปซูล;500 มิลลิกรัม ) และ(2)ทรีโอ- hydroxycitric ลลีนไดแอมกรดเกลือhydroxycitrate บริสุทธิ์ ได้รับพระราชทานโดยinterhealth Incorporated ( Benicia nutraceuticals ,แคลิฟอร์เนีย ) การ derivatizing รีเอเจนต์N , o- บิส ( ไตร -silyl ) ฟลูอ รอะเซทตาไมด์1trimethylchlorosilane 10%( bstfa110 % tmcs ) ซื้อมาจาก เพียซ( Rockford , อิลลินอยส์ )วิชาสี่คน สามคนและหนึ่งเฟ -ชาย , ได้ตกลงที่จะเข้าร่วมในการศึกษา ( ตารางที่ 1 ) พวกเขาทั้งหมดสุขภาพ , สูบบุหรี่ที่ไม่มีประวัติโรคหัวใจ หรือเบาหวาน ก่อนการมีส่วนร่วมในการศึกษา กลุ่มตัวอย่างต้องเซ็นยินยอมได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการเพื่อการปกป้องมนุษย์วิชาของมหาวิทยาลัยแห่งแคลิฟอร์เนียที่เบิร์กลีย์โปรโตคอลคน มาปฏิบัติการในการอดอาหารและสภาพขอให้ตากe2gofhca .การเก็บตัวอย่างเลือดหลังรับประทาน 30 นาทีการเสริม HCA และทุก 30 นาทีหลังจากนั้นมากกว่าระยะเวลา 3.5 ถึง 4 ชั่วโมง ควบคุมเรื่องที่ไม่ใช้ HCA อาหารเสริมบริจาคประมาณ 50 มิลลิลิตรของเลือดที่ต้องใช้ในการสร้างกราฟมาตรฐาน ที่ตัวอย่างเลือดระดับที่ 2500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีแยกพลาสมาซึ่งถูกเก็บไว้ที่280 ° C จนถึงแปรรูปการเตรียมตัวของเส้นโค้งมาตรฐานหรือ -มอลลี่ , ชื่อรุ่นของสารประกอบที่น่าสนใจจะดีที่สุดภายในมาตรฐานสำหรับปริมาณ .แต่ติดป้ายว่า HCA ไม่พร้อมใช้งานในเชิงพาณิชย์และมันไม่สามารถสังเคราะห์จากข้อความอื่น ๆได้อย่างง่ายดายสารประกอบ [ - U13 .C ] ซิเตรต ( CA ) จึงเลือกเพราะเป็นมาตรฐานภายในและโครงสร้างคุณสมบัติของสารเคมีที่คล้ายกับบรรดาของ HCA . นอกจากนี้ป้ายซิเตรตได้อย่างง่ายดายแตกต่างจากซิเตรตซึ่งเกิดขึ้นตามธรรมชาติในร่างกายมนุษย์ เพื่อสร้างเส้นโค้งมาตรฐาน ตัวอย่างพลาสมา ( 350เมตรฉัน )จากเรื่องที่ควบคุมไม่ได้ถ่าย - HCA นิ่มนวลments ละเอียดผสมกับ 10 คือเมตรกรัมของ CA * และไล่ระดับ ( 0 , 1 , 2 , 4 , 6 , 8 และ 10เมตรกรัม ) ของ HCA บริสุทธิ์ลลีนไดแอม . ปริมาณของ HCA เพิ่ม ?ในตัวอย่างพลาสมาจึงวางแผนกับอัตราส่วนของพื้นที่ที่ยอดของ HCA จะ CA * OB -tained จากมวลสเปกตรัม ( สังเกตอัตราส่วน )ในการเตรียมการสำหรับ GC / MS , ตัวอย่างพลาสมาคือdeproteinized 700 กับเมตรชั้น 7 % เปอร์คลอริกแอซิด และ