2.2. Preparation of water-in-algae

2.2. Preparation of water-in-algae oil (w/o) emulsion with hydrophilic
antioxidants
The antioxidants and/or metal chelators were dissolved directly into
the double distilled water before mixing with algae oil. This solution
was referred to as the stock antioxidants solution.
Surfactant solution (30 wt%) was prepared by heating the mixture of
6 g surfactant (PGPR, PC75, PC50, lyso-PC and MAG-DAG) and 14 g medium chain triacylglycerides (MCT) at 65 °C to ensure complete dispersion. Stock algae oil was prepared by dispersing surfactant solution
(0.5 wt%) into algae oil. A 2 wt% water-in-algae oil emulsion was then
prepared by homogenizing antioxidants solution (2 wt%) and stock
algae oil (98 wt%) using a high-speed blender (M133/128-0, Biospec
Products, Inc., ESGC, Switzerland) for 2 min followed by further homogenization with a Microfluidizer (model M-110 L Microfluidizer Processor, Microfluidics, Newton, MA) for three passes at a pressure of
68 MPa. The sample without antioxidants solution (0 wt% water) prepared by the same procedure was used as a blank. The samples were
kept in an ice container during the whole procedure to minimize
oxidation.
Sample vial preparation for lipid oxidation studies followed the previous procedure, and stored in a 45 °C incubator room in the dark for up
to 10 days. For storage stability study, 10 mL of sample were transferred
into a test tube (internal diameter 15 mm, height 125 mm), tightly
sealed with a plastic cap, and then stored at room temperature. Photographs of the emulsions were recorded after 24 h using a digital camera.
The microstructure of selected emulsions was evaluated using optical
microscopy after 24 h (Nikon microscope Eclipse E400, Nikon Corporation, Japan).
2.3. Measurement of lipid oxidation products
Lipid hydroperoxides were measured as the primary oxidation product using a method adapted from Shanta and Decker (Shantha & Decker,
1994). Secondary oxidation product marker propanal was monitored
using a GC-17A Shimadzu gas chromatograph bundled with an AOC-
5000 autosampler (Shimadzu, Kyoto, Japan). Oil samples (1 mL) in
10 mL capped GC glass vials were preheated at 45 °C for 15 min in
AOC-5000 autosampler heating block. A 50/30 μm Divinylbenzene/
Carboxen/Polydimethylsiloxane solid-phase microextraction (SPME)
fiber needle (Supelco, Bellefonte, PA) was injected into the vial absorbing volatiles for 2 min, and then was transferred to the injector port
(250 °C) for 3 min. Split mode was selected at the ratio of at 1:5 for
the injection port. Volatiles were identified on a Supelco
30 m × 0.32 mm Equity DB-1 column with a 1 μm film thickness at constant 65 °C for 10 min. The carrier gas was helium and the flow rate was
15.0 mL/min. A flame ionization detector (FID) was set at a temperature
of 250 °C. The concentration of propanal was calculated from its peak
areas using a standard curve prepared from an authentic standard.
The lag phase is defined as the time required to observe a sudden increase of propanal formation.
2.4. Determination of tocopherol concentration in base algae oil
The concentration of tocopherol in base algae oil during storage time
was determined by normal phase HPLC. For HPLC analysis, weighted oil
sample (approximately 0.1 g) was dissolved in 5 mL hexane. The solution was passed through a 0.45 μm filter after vortexing. A 20 μL aliquot
of the solution was separated using a Shimadzu (10A, Shimadzu Co.,
Kyoto, Japan) HPLC system with a 250 mm × 4.6 mm i.d., 5 μm,
ZORBAX Rx-SIL analytical column. The mobile phase of the HPLC system
consisted of hexane:isopropyl alcohol (99:1 v/v) using isocratic gradient at a flow rate of 1 mL/min. Column temperature was maintained
at 40 °C. Detection of tocopherol was conducted using both a Shimadzu
diode array detector (DAD) at 295 nm, and a Waters 474 scanning fluorescence detector at an excitation wavelength of 290 nm and an

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. การเตรียมน้ำในสาหร่ายน้ำมัน (w/o) อิมัลชันกับน้ำสารต้านอนุมูลอิสระสารต้านอนุมูลอิสระหรือ chelators โลหะละลายน้ำเข้าโดยตรงน้ำกลั่นคู่ก่อนการผสมกับสาหร่ายน้ำมัน แก้ไขปัญหานี้ถูกเรียกว่าสารต้านอนุมูลอิสระสินค้าโซลูชันชุดโซลูชัน (30 wt %) จัดทำ โดยส่วนผสมของเครื่องทำความร้อนชุด g (PGPR, PC75, PC50, lyso PC และ MAG DAG) 6 และ 14 กรัมขนาดกลางโซ่ triacylglycerides (MCT) 65 ° c ให้กระจายสมบูรณ์ จัดทำสต็อกสาหร่ายน้ำมัน โดยสลายชุดโซลูชัน(0.5 wt %) เป็นน้ำมันสาหร่าย อิมัลชันแบบน้ำในสาหร่ายน้ำมัน% wt 2 ได้แล้วโดย homogenizing สต็อกและการแก้ไขปัญหาสารต้านอนุมูลอิสระ (2 wt %)ใช้เครื่องปั่นความเร็วสูง (M133/128-0, Biospec น้ำมันสาหร่าย (98 wt %)ผลิตภัณฑ์ Inc., ESGC สวิตเซอร์แลนด์) สำหรับ 2 นาทีตาม homogenization เพิ่มเติมด้วย Microfluidizer (รุ่น M-110 L Microfluidizer หน่วยประมวลผล Microfluidics นิวตัน MA) สำหรับตั๋วสามที่แรงดัน68 MPa ตัวอย่าง โดยโซลูชันของสารต้านอนุมูลอิสระ (0 wt %น้ำ) ที่เตรียม โดยวิธีการเดียวกันถูกใช้เป็นว่างเปล่า ตัวอย่างได้เก็บไว้ในถังน้ำแข็งที่ในระหว่างขั้นตอนการลดออกซิเดชันเตรียมขวดตัวอย่างสำหรับการศึกษาการเกิดออกซิเดชันของไขมันตามขั้นตอนก่อนหน้านี้ และเก็บไว้ในตู้อบห้อง 45 ° C ในมืดสำหรับค่าไป 10 วัน สำหรับเก็บข้อมูลศึกษาความมั่นคง ถ่ายโอน 10 mL ของตัวอย่างลงในหลอดทดลอง (ภายในเส้นผ่าศูนย์กลาง 15 มม. ความสูง 125 มม.), แน่นปิดผนึก ด้วยฝาพลาสติก และจากนั้น เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง มีบันทึกภาพของอิมัลชันที่หลัง 24 ชั่วโมงใช้กล้องดิจิตอลโครงสร้างจุลภาคของอิมัลชันที่เลือกรับการประเมินโดยใช้แสงกล้องจุลทรรศน์หลังจาก 24 ชั่วโมง (Nikon กล้องจุลทรรศน์ Eclipse E400 นิคอน คอร์ปอเรชั่น ประเทศญี่ปุ่น)2.3. การวัดผลิตภัณฑ์การออกซิเดชันของไขมันHydroperoxides ไขมันถูกวัดเป็นผลิตภัณฑ์หลักออกซิเดชันโดยวิธีดัดแปลงมาจาก Shanta และชั้น (Shantha และชั้น1994) รับการตรวจสอบเครื่องหมายผลิตภัณฑ์ออกซิเดชันรอง propanalใช้ chromatograph ก๊าซ Shimadzu GC 17 a มาพร้อมกับการ AOC-เกิด 5000 (Shimadzu เกียวโต ญี่ปุ่น) ตัวอย่างน้ำมัน (1 mL) ในขวดแก้ว GC 10 มล.ต่อยอดถูกอุ่นที่ 45 ° C 15 นาทีในAOC-5000 เกิดที่บล็อกเครื่องทำความร้อน 50/30 μ m Divinylbenzene /Carboxen/Polydimethylsiloxane microextraction เฟสของแข็ง (SPME)เข็มไฟเบอร์ (Supelco, Bellefonte, PA) ถูกฉีดลงในขวดที่ดูดซับ volatiles สำหรับ 2 นาที และจากนั้น โอนย้ายไปยังพอร์ตหัวฉีด(250 ° C) สำหรับ 3 นาที แยกโหมดเลือกที่อัตราส่วน 1:5 สำหรับท่าฉีด Volatiles ถูกระบุบน Supelco เป็น30 m × 0.32 มม.ส่วน DB-1 คอลัมน์ 1 μ m ฟิล์มหนาที่คง 65 ° C 10 นาที ผู้ขนส่งก๊าซฮีเลียม และอัตราการไหล15.0 mL (นาที) ตั้งค่าอุณหภูมิที่ตรวจจับไอออไนซ์เปลวไฟ (FID)250 ° c ความเข้มข้นของ propanal คำนวณจากจุดสูงสุดพื้นที่โดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานจากมาตรฐานแท้จริงมีกำหนดขั้นตอนความล่าช้าเป็นเวลาการสังเกตการเพิ่มขึ้นอย่างฉับพลันก่อตัว propanal2.4. การกำหนดความเข้มข้นของ tocopherol ในฐานสาหร่ายน้ำมันความเข้มข้นของ tocopherol ในสาหร่ายฐานน้ำมันในช่วงเวลาการเก็บรักษาแก้ไขตามขั้นตอนปกติ HPLC สำหรับการวิเคราะห์ HPLC ถ่วงน้ำหนักน้ำมันตัวอย่าง (ประมาณ 0.1 กรัม) ที่ละลายในเฮกเซน 5 มล. การแก้ปัญหาถูกส่งผ่านผ่านตัวกรอง 0.45 ไมครอนหลังจาก vortexing ส่วนลงตัว 20 μLการแก้ปัญหาเป็นแยกโดยใช้ Shimadzu (10A บริษัท Shimadzuเกียวโต ญี่ปุ่น) ระบบ HPLC ที่ มีประชาชนเป็น 250 มม. × 4.6 มม. 5 μ mZORBAX Rx-ภาษาศาสตร์วิเคราะห์คอลัมน์ ขั้นตอนการเคลื่อนของระบบ HPLCเฮกเซน: isopropyl แอลกอฮอล์ (99:1 v/v) ใช้ isocratic ไล่ระดับสีที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร/นาทีอุณหภูมิกรุงคอลัมน์ที่ประกอบด้วยที่ 40 องศาเซลเซียส ดำเนินการตรวจสอบของ tocopherol Shimadzu ทั้งสองใช้ไดโอดอาร์เรย์จับ (พ่อ) ที่ 295 nm และ 474 น้ำที่ตรวจจับการเรืองแสงที่ความยาวคลื่นกระตุ้นที่ 290 nm และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 เตรียมความพร้อมของน้ำและน้ำมันในสาหร่าย (w / O) อิมัลชันกับ hydrophilic
สารต้านอนุมูลอิสระ
สารต้านอนุมูลอิสระและ / หรือโลหะ chelators ละลายโดยตรงลงใน
น้ำกลั่นสองครั้งก่อนที่จะผสมกับน้ำมันสาหร่าย การแก้ปัญหานี้
ก็จะเรียกว่าวิธีการแก้ปัญหาสต็อกสารต้านอนุมูลอิสระ.
แก้ปัญหาลดแรงตึงผิว (30% โดยน้ำหนัก) ถูกจัดทำขึ้นโดยใช้ความร้อนส่วนผสมของทั้ง
6 กรัมลดแรงตึงผิว (PGPR, PC75, PC50, lyso-PC และ MAG-DAG) และ 14 กรัม triacylglycerides ห่วงโซ่กลาง ( MCT) ที่ 65 องศาเซลเซียสเพื่อให้แน่ใจว่าการกระจายตัวที่สมบูรณ์ น้ำมันสาหร่าย Stock ได้รับการจัดทำขึ้นโดยการกระจายการแก้ปัญหาลดแรงตึงผิว
(0.5% โดยน้ำหนัก) เป็นน้ำมันสาหร่าย 2% โดยน้ำหนักน้ำในสาหร่ายอิมัลชันน้ำมันจากนั้นก็
จัดทำขึ้นโดยการผสมยางแก้ปัญหาสารต้านอนุมูลอิสระ (2% โดยน้ำหนัก) และสต็อก
น้ำมันสาหร่าย (98% โดยน้ำหนัก) โดยใช้เครื่องปั่นความเร็วสูง (M133 / 128-0, ไบโอสเป
Products, Inc , ESGC วิตเซอร์แลนด์) เป็นเวลา 2 นาทีตามด้วยการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันอีกด้วย Microfluidizer (รุ่น M-110 L Microfluidizer Processor, microfluidics, นิวตัน, แมสซาชูเซต) สำหรับสามผ่านที่ความดันของ
68 เมกะปาสคาล ตัวอย่างการแก้ปัญหาโดยไม่ต้องสารต้านอนุมูลอิสระ (น้ำ WT 0%) จัดทำโดยขั้นตอนเดียวกันถูกใช้เป็นที่ว่างเปล่า กลุ่มตัวอย่างที่ถูก
เก็บไว้ในภาชนะบรรจุน้ำแข็งในระหว่างขั้นตอนทั้งหมดเพื่อลด
การเกิดออกซิเดชัน.
เตรียมขวดตัวอย่างสำหรับการศึกษาการเกิดออกซิเดชันของไขมันตามขั้นตอนก่อนหน้านี้และเก็บไว้ในที่อุณหภูมิ 45 ° C Room ศูนย์บ่มเพาะในที่มืดได้นาน
ถึง 10 วัน สำหรับการศึกษาการเก็บรักษา 10 มิลลิลิตรของกลุ่มตัวอย่างมีการถ่ายโอน
ลงในหลอดทดสอบ (ภายในเส้นผ่าศูนย์กลาง 15 มิลลิเมตรความสูง 125 มิลลิเมตร) แน่น
ปิดผนึกด้วยฝาพลาสติกและเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องแล้ว รูปถ่ายของอิมัลชันถูกบันทึกไว้หลังจาก 24 ชั่วโมงที่ใช้กล้องดิจิตอล.
จุลภาคของอิมัลชันที่เลือกจะถูกประเมินโดยใช้แสง
กล้องจุลทรรศน์หลังจาก 24 ชั่วโมง (Nikon กล้องจุลทรรศน์ Eclipse E400, นิคอน, ญี่ปุ่น).
2.3 การวัดไขมันผลิตภัณฑ์ออกซิเดชัน
hydroperoxides ไขมันถูกวัดเป็นผลิตภัณฑ์หลักของการเกิดออกซิเดชันโดยใช้วิธีการที่ดัดแปลงมาจาก Shanta และฉูดฉาด (Shantha & Decker,
1994) ออกซิเดชันรองเครื่องหมายสินค้า propanal คือการตรวจสอบ
การใช้ก๊าซ Chromatograph GC-17A Shimadzu พร้อมกับ AOC-
5000 autosampler (Shimadzu เกียวโตญี่ปุ่น) ตัวอย่างน้ำมัน (1 มิลลิลิตร) ใน
10 มิลลิลิตรขวดแก้วปกคลุม GC ถูกอุ่นที่ 45 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาทีใน
AOC-5000 autosampler ร้อนบล็อก 50/30 ไมครอน divinylbenzene /
Carboxen / polydimethylsiloxane เฟสของแข็ง microextraction (SPME)
เส้นใยเข็ม (Supelco, เบลลาฟอน, PA) คือการฉีดเข้าไปในขวดดูดซับสารระเหยเป็นเวลา 2 นาทีและจากนั้นก็ย้ายไปยังพอร์ตหัวฉีด
(250 ° C) เป็นเวลา 3 นาที โหมดการแบ่งได้รับเลือกในอัตราส่วนที่ 1: 5 สำหรับ
พอร์ตการฉีด สารระเหยที่ถูกระบุใน Supelco
30 เมตร× 0.32 มมทุน DB-1 คอลัมน์ที่มีความหนา 1 ไมครอนฟิล์มที่คงที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที ก๊าซฮีเลียมเป็นผู้ให้บริการและอัตราการไหลเป็น
15.0 มิลลิลิตร / นาที เครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออนไนซ์ (FID) ถูกกำหนดไว้ที่อุณหภูมิ
250 องศาเซลเซียส ความเข้มข้นของ propanal ที่คำนวณได้จากจุดสูงสุดของ
พื้นที่โดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานที่เตรียมจากมาตรฐานของแท้.
ขั้นตอนล่าช้าถูกกำหนดให้เป็นเวลาที่ต้องใช้ในการสังเกตการเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วของการก่อ propanal.
2.4 ความมุ่งมั่นของความเข้มข้นของโทโคฟีรอในน้ำมันสาหร่ายฐาน
ความเข้มข้นของโทโคฟีรอในน้ำมันสาหร่ายฐานในช่วงเวลาการจัดเก็บ
ถูกกำหนดโดยวิธี HPLC เฟสปกติ สำหรับการวิเคราะห์ HPLC น้ำมันถ่วงน้ำหนัก
ตัวอย่าง (โดยประมาณ 0.1 กรัม) ถูกละลายในขนาด 5 ml เฮกเซน การแก้ปัญหาก็ผ่านไปผ่าน 0.45 ไมครอนกรองหลังจาก vortexing หาร 20 ไมโครลิตร
ของการแก้ปัญหาที่ถูกแยกออกจากกันโดยใช้ Shimadzu (10A, Shimadzu Co. ,
เกียวโตญี่ปุ่น) ระบบ HPLC กับ 250 มม× 4.6 มม id, 5 ไมครอน
ZORBAX RX-SIL คอลัมน์วิเคราะห์ เฟสเคลื่อนที่ของระบบ HPLC
ประกอบด้วยเฮกเซน: เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ isopropyl (99: 1 v / V) โดยใช้การไล่ระดับสี isocratic ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที อุณหภูมิคอลัมน์ถูกเก็บรักษาไว้
ที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียส การตรวจสอบของโทโคฟีรอได้ดำเนินการโดยใช้ทั้ง Shimadzu
ตรวจจับไดโอดอาร์เรย์ (DAD) ที่ 295 นาโนเมตรและมีน้ำทะเล 474 สแกนตรวจจับการเรืองแสงที่มีความยาวคลื่นกระตุ้น 290 นาโนเมตรและ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . การเตรียมน้ำสาหร่ายน้ํามัน ( W / O ) ผสมกับน้ำสารต้านอนุมูลอิสระสารต้านอนุมูลอิสระและ / หรือโลหะจับถูกละลายโดยตรงคู่น้ำก่อนที่จะผสมกับสาหร่ายน้ำมัน โซลูชั่นนี้ถูกเรียกว่าหุ้นสารต้านอนุมูลอิสระ โซลูชั่นสารลดแรงตึงผิว โซลูชั่น ( 30 เปอร์เซ็นต์ ) ได้เตรียมการโดยร้อนผสม6 g ( มีแนวโน้ม pc75 pc50 , สารลดแรงตึงผิว , PC และ lyso mag-dag ) และ 14 กรัม triacylglycerides ห่วงโซ่ขนาดกลาง ( บริษัท ) ที่ 65 ° C เพื่อให้กระจายสมบูรณ์ สาหร่ายน้ำมันกระจายหุ้นถูกเตรียมโดยสารลดแรงตึงผิว โซลูชั่น( 0.5 % ) เป็นสาหร่ายน้ำมัน น้ำ 2 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนักน้ำมันในสาหร่ายแล้วเตรียมได้จากการเติมสารต้านอนุมูลอิสระ โซลูชั่น ( 2 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนัก ) และหุ้นสาหร่ายน้ำมัน ( 98 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนัก ) ใช้เครื่องปั่นความเร็วสูง ( m133 / 128-0 biospec ,ผลิตภัณฑ์ ( esgc , สวิตเซอร์แลนด์ ) 2 นาที ตามด้วยการต่อด้วยไมโครฟล ไดซเซอร์ ( แบบ m-110 ผมไมโครฟล ไดซเซอร์ระบบไมโครฟลูอิดิก นิวตัน , MA ) สามผ่านไปที่ความดันของ68 เมกกะปาสคาล ตัวอย่างไม่มีสารต้านอนุมูลอิสระสารละลาย ( น้ำร้อยละ 0 โดยน้ำหนัก ) ที่เตรียมโดยกระบวนการเดียวกันถูกใช้เป็นช่องว่าง กลุ่มตัวอย่างเก็บในภาชนะบรรจุน้ำแข็งในระหว่างขั้นตอนทั้งหมดเพื่อลดออกซิเดชันขวดตัวอย่างการเตรียมการออกซิเดชันของไขมัน การศึกษาตามขั้นตอนก่อนหน้า และเก็บไว้ใน 45 ° C ห้องฟักไข่ในที่มืดขึ้น10 วัน การศึกษาเสถียรภาพกระเป๋า 10 มิลลิลิตร จำนวนโอนในหลอดทดลอง ( ขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางภายใน 15 มิลลิเมตร ความสูง 125 มม. ) , แน่นปิดผนึกด้วยฝาพลาสติก แล้วเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง ภาพถ่ายของอิมัลชันที่ถูกบันทึกไว้หลังจาก 24 ชั่วโมงที่ใช้กล้องดิจิตอลโครงสร้างของการเลือกใช้แสงเป็นแบบอิมัลชันหลังจาก 24 ชั่วโมง ( Nikon กล้องจุลทรรศน์กล้องจุลทรรศน์คราส e400 , Nikon Corporation , Japan )2.3 การวัดปฏิกิริยาออกซิเดชันไขมันผลิตภัณฑ์วัดระดับไขมัน hydroperoxides ออกซิเดชันผลิตภัณฑ์โดยใช้วิธีที่ดัดแปลงจาก shanta และ Decker ( shantha & Decker1994 ) เครื่องหมายผลิตภัณฑ์รองการออกซิเดชัน Nameโดยใช้แก๊สโครมาโตกราฟ gc-17a Shimadzu รวมกับ AOC -5 , 000 autosampler ( Shimadzu , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) ตัวอย่างน้ำมัน ( 1 มล. ) ใน10 ml ขวดแก้วที่ถูกปกคลุม GC ตั้ง 45 ° C เป็นเวลา 15 นาที ในaoc-5000 autosampler ความร้อนบล็อก 50 / 30 M / μไดไวนิลเบนซีนcarboxen / O ส่วน microextraction ( spme )เข็มไฟเบอร์ ( supelco bellefonte , PA ) ถูกฉีดเข้าไปในขวด ดูดซับสารระเหย 2 มิน แล้วย้ายไปหัวฉีดพอร์ต( 250 ° C ) เป็นเวลา 3 นาที โหมดแยกได้รับเลือกในอัตราส่วนที่เหมาะสมสำหรับพอร์ตฉีด สารระเหยที่ถูกระบุใน supelco30 m × db-1 หุ้น 0.32 มม. คอลัมน์ด้วย 1 μ M ฟิล์มความหนาคงที่ที่ 65 องศา C นาน 10 นาที บริษัทขนส่งแก๊สฮีเลี่ยมและอัตราการไหล คือเป็นมิลลิลิตร / นาที แบบเฟลมไอออไนเซชันตรวจจับ ( FID ) ตั้งไว้ที่อุณหภูมิ250 ° C ความเข้มข้นของ Name คำนวณจากจุดสูงสุดของพื้นที่การใช้มาตรฐานเส้นโค้งที่เตรียมจากมาตรฐานของแท้ความล่าช้าเฟส หมายถึง เวลาที่ใช้ในการสังเกตการเพิ่มขึ้นอย่างฉับพลันของ Name ก่อตัว2.4 . การหาความเข้มข้นของวิตามินอีในน้ำมันพื้นฐาน สาหร่ายความเข้มข้นของวิตามินอีในน้ำมันพื้นฐานการเก็บสาหร่ายถูกกำหนดโดย HPLC ระยะปกติ สำหรับการวิเคราะห์ HPLC , น้ํามันถัวตัวอย่าง ( ประมาณ 0.1 กรัม ) ละลายในเฮกเซน 5 ml . สารละลายที่ผ่าน 0.45 μ M กรองหลัง vortexing . 20 μ L ส่วนลงตัวของสารละลายที่แยกจากกันโดยใช้ Shimadzu ( 10A Shimadzu Co . ,เกียวโต , ญี่ปุ่น ) ระบบ HPLC ด้วย 250 มม. × 4.6 มม. บัตร 5 μ Mzorbax RX ซิลวิเคราะห์คอลัมน์ ระยะเคลื่อนที่ของระบบ HPLCได้แก่ เฮกเซน : isopropyl แอลกอฮอล์ ( 99:1 v / v ) โดยใช้ Isocratic ลาดที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที อุณหภูมิของคอลัมน์ถูกรักษาที่ 40 องศา การตรวจหาจำนวนทั้ง Shimadzu โทโคเฟอรอลเครื่องตรวจจับเรย์ไดโอด ( พ่อ ) ที่ 295 nm และน้ำและการสแกนตรวจจับที่ความยาวคลื่น 290 nm และกระตุ้น