Membrane-bound polyphenoloxidase (m

Membrane-bound polyphenoloxidase (mPPO) an oxidative enzyme which is responsible for the undesirable browning reaction in Snake fruit (Salacca zalacca (Gaertn.) Voss) was investigated. The enzyme was extracted using a non-ionic detergent (Triton X-114), followed by temperature-induced phase partitioning technique which resulted in two separate layers (detergent-poor phase at the upper layer and detergent-rich phase at the lower layer). The upper detergent-poor phase extract was subsequently fractionated by 40-80% ammonium sulfate and chromatographed on HiTrap Phenyl Sepharose and Superdex 200 HR 10/30. The mPPO was purified to 14.1 folds with a recovery of 12.35%. A single prominent protein band appeared on native-PAGE and SDS-PAGE implying that the mPPO is a monomeric protein with estimated molecular weight of 38kDa. Characterization study showed that mPPO from Snake fruit was optimally active at pH 6.5, temperature 30°C and active towards diphenols as substrates. The K(m) and V(max) values were calculated to be 5.46 mM and 0.98 U/ml/min, respectively, when catechol was used as substrate. Among the chemical inhibitors tested, l-cysteine showed the best inhibitory effect, with an IC(50) of 1.3 ± 0.002 mM followed by ascorbic acid (1.5 ± 0.06 mM), glutathione (1.5 ± 0.07 mM), EDTA (100 ± 0.02 mM) and citric acid (186 ± 0.16 mM).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เมมเบรนแบบผูก polyphenoloxidase (mPPO) เป็นเอนไซม์ oxidative ซึ่งรับผิดชอบพึงประสงค์ browning ปฏิกิริยาในผลไม้งู (Salacca zalacca (Gaertn) Voss) ถูกตรวจสอบ เอนไซม์นี้ถูกสกัดโดยใช้ฟอกไม่ ionic (ไตรตั้น X-114), ตาม ด้วยเกิดอุณหภูมิระยะแบ่งพาร์ทิชันเทคนิคซึ่งผลในสองชั้นที่แยกต่างหาก (คนจนผงซักฟอกระยะที่ชั้นบนและอุดมไปด้วยผงซักฟอกระยะที่ชั้นล่าง) แยกระยะยากฟอกบนต่อมาถูกแบ่ง โดย 40-80% แอมโมเนียซัลเฟต และ chromatographed HiTrap Phenyl Sepharose และ Superdex 200 ชั่วโมง 10/30 MPPO ไม่บริสุทธิ์จะพับ 14.1 กับ 12.35% ฟื้นตัว วงโปรตีนเดียวโดดเด่นปรากฏบนพื้นหน้าและองค์กรหน้าหน้าที่ว่าการ mPPO โปรตีน monomeric มีน้ำหนักโมเลกุลโดยประมาณของ 38kDa การศึกษาจำแนกพบว่า mPPO จากงู ผลไม้ถูกใช้งานอย่างเหมาะสมที่ pH 6.5 อุณหภูมิ 30° C และใช้งานต่อ diphenols เป็นพื้นผิว มีคำนวณค่า K(m) และ V(max) เป็น 5.46 mM และ 0.98 U/ml/min ตามลำดับ เมื่อ catechol ใช้เป็นพื้นผิว ระหว่าง inhibitors เคมีที่ทดสอบ l-cysteine แสดงผลส่วนลิปกลอสไข กับการ IC(50) 1.3 ± 0.002 มม.ตาม ด้วยกรดแอสคอร์บิค (1.5 ± 0.06 มม.), กลูตาไธโอน (1.5 ± 0.07 มม.), EDTA (100 ±มม. 0.02) และกรดซิตริก (186 ± 0.16 mM)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ที่ถูกผูกไว้พอลีฟีนเมมเบรน (mPPO) เอนไซม์ออกซิเดชันซึ่งเป็นผู้รับผิดชอบในการเกิดสีน้ำตาลที่ไม่พึงประสงค์ในผลไม้งู (สละ zalacca (Gaertn.) โว) ถูกตรวจสอบ เอนไซม์ถูกสกัดโดยใช้ผงซักฟอกที่ไม่ใช่ไอออนิก (Triton X-114) ตามด้วยขั้นตอนอุณหภูมิที่เกิดจากเทคนิคการแบ่งพาร์ทิชันซึ่งมีผลในสองชั้นที่แยกต่างหาก (เฟสผงซักฟอกยากจนที่ชั้นบนและเฟสผงซักฟอกที่อุดมไปด้วยที่ชั้นล่าง) . สารสกัดเฟสผงซักฟอกยากจนบนถูก fractionated ภายหลังจาก 40-80% แอมโมเนียมซัลเฟตและ chromatographed ใน HiTrap Phenyl Sepharose และ Superdex 200 HR 10/30 mPPO บริสุทธิ์ 14.1 เท่ากับการฟื้นตัวของ 12.35% โดย วงดนตรีที่โดดเด่นโปรตีนเดียวที่ปรากฏบนหน้าพื้นเมืองและระบบ SDS-PAGE หมายความว่า mPPO เป็นโปรตีน monomeric มีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 38kDa การศึกษาแสดงให้เห็นว่าลักษณะ mPPO จากผลไม้งูที่ใช้งานได้อย่างดีที่สุดคือที่ pH 6.5 อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสและการใช้งานที่มีต่อ diphenols เป็นสารตั้งต้น เค (เมตร) และ V (สูงสุด) ค่านี้จะถูกคำนวณจะเป็น 5.46 มิลลิและ 0.98 U / ml / นาทีตามลำดับเมื่อ catechol ถูกใช้เป็นสารตั้งต้น ในบรรดาสารยับยั้งสารเคมีทดสอบ l-cysteine​​ แสดงให้เห็นผลยับยั้งที่ดีที่สุดกับไอซี (50) 1.3 ± 0.002 มิลลิตามด้วยวิตามินซี (1.5 ± 0.06 มิลลิ), กลูตาไธโอน (1.5 ± 0.07 มิลลิ) EDTA (100 ± 0.02 มิลลิ) และกรดซิตริก (186 ± 0.16 มิลลิ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เมมเบรนจำกัดโพลีฟีนอลอ ซิเดส ( mppo ) เป็นปฏิกิริยาเอนไซม์ซึ่งเป็นผู้รับผิดชอบไม่พึงประสงค์ปฏิกิริยาการเกิดสีน้ำตาลในงูผลไม้ ( ต้นสละ ( ต่อหัวใจ ) Voss ) ถูกตรวจสอบ เอนไซม์สกัดการใช้ผงซักฟอก non-ionic ( Triton x-114 )ตามด้วยอุณหภูมิและระยะการเทคนิคซึ่งส่งผลให้เกิดสองชั้นแยก ( ผงซักฟอกจนระยะที่ชั้นบน และผงซักฟอกที่อุดมไปด้วย ( ชั้นล่าง ) ผงซักฟอกไม่ดีบนเฟสแยกต่อมาได้พบด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต 40-80 % และ chromatographed บนเกี่ยวข้องและฟีนิล hitrap superdex 200 ชม. 10 / 30 การ mppo บริสุทธิ์ถึง 141 เท่ากับการฟื้นตัวของ 12.25 เปอร์เซ็นต์ แถบโปรตีนเด่นเดี่ยวปรากฏบนหน้าพื้นเมืองและถูกอ้างว่าที่ mppo เป็นโมเลกุลของโปรตีนเกิดประมาณ 38kda . การศึกษาพบว่า mppo จากงูผลไม้ ตามปกติใช้งานที่ pH 6.5 อุณหภูมิ 30 องศา C และใช้งานต่อ diphenols เป็นท K ( M ) และ V ( max ) ค่าที่คำนวณได้ 5 .46 มม. และ 0.98 U / ml / min ตามลำดับ เมื่อแคติคอลที่ใช้เป็นวัตถุดิบ ในทางเคมีและการทดสอบ L-Cysteine แสดงผลยับยั้งที่ดีที่สุดกับ IC ( 50 ) 1.3 ± 0.002 มิลลิเมตร รองลงมา คือ กรดแอสคอร์บิค ( 1.5 ± 0.06 มม. ) , กลูต้าไธโอน ( 1.5 ± 0.07 มม. ) , EDTA ( 100 ± 0.02 มิลลิเมตร ) และกรดซิตริก ( 186 ± 0.16 มิลลิเมตร )