The strain for this study,C. cellul

The strain for this study,C. cellulans was isolated from
decaying wood. A sample of Ulmus nigrasaw- dust was
collected under aseptic conditions and 1 g was suspended in
sterile water and stirred for 30 min. From this suspension,
100 mL was spread on the plate consisted of M9 with 1% carboxymethyl cellulose and 2% agar, and the plates were incubated at 30


C for 1e5 days. M9 contain (L
1
) 3.0 g KH2PO4, 6.0 g
Na2HPO4,1gNH4Cl, 0.5 g NaCl, 0.003 g CaCl2. The colony that
showed a solubilization of substrates and a corresponding
distinct halo that exceeded the colony diameter, was considered as a polysaccharide degrader and was consequently
selected. The cells were stained according to the classical
Gram procedure described by Doetsch[10]. As exhaustion of
the medium, the mycelium transform rods into shorter rods
or even spherical cells. DNA extraction and PCR amplification
of 16S rDNA were carried out as described previously[11]. The
16S rDNA sequence of strain showed 99% similarity with that
ofC. cellulans(data not shown).
Cultures ofC.cellulanswere grown at in 250 ml Erlenmeyer
flasks containing 50 mL M9 medium and 0.5 g bagasse. Each
flask was autoclaved for 20 min at 121


C. After cooling each
flask was inoculated with 1% inoculum. The flasks were
incubated under 3.3 Hz at 30


C during 4 days and samples in
triplicate were withdrawn at different time intervals (0 h, 11 h,
17 h, 22 h, 24 h, 48 h, 72 h, 96 h, 120 h).
The broth containing extracellular proteins was centrifuged for 10 min at 10,000g to remove the residual bagasse,
mycelium and extracellular glucan. The supernatant was
concentrated 5 times in 10,000-molecular-weight-cutoff dialysis bags and assayed for enzymatic activities.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สายพันธุ์สำหรับการศึกษานี้ C. cellulans ถูกแยกจากสลายไม้ เป็นตัวอย่างของ Ulmus nigrasaw-ฝุ่นเก็บรวบรวมภายใต้เงื่อนไขที่ปลอดเชื้อ และถูกระงับ 1 กรัมในน้ำหมัน และกวน 30 นาที จากระงับแพร่กระจายไปใน 100 มิลลิลิตรประกอบด้วยแผ่นของ M9 เซลลูโลส carboxymethyl 1% และ 2% วุ้น และแผ่นได้รับการกกน.
C 1e5 วัน ประกอบด้วย M9 (L1) g 3.0 6.0 g, KH2PO4Na2HPO4, 1gNH4Cl, 0.5 กรัม NaCl, CaCl2 0.003 กรัม อาณานิคมที่แสดงให้เห็นว่า solubilization ของพื้นผิวและสอดคล้องกันhalo ที่แตกต่างที่เกินเส้นผ่าศูนย์กลางโคโลนี ขณะที่การ degrader polysaccharide และแก้ไขดังนั้นเลือก ภาพเซลล์ตามที่คลาสสิกกรัมตอนที่อธิบายไว้ โดย Doetsch [10] เป็นโอกาสของปานกลาง กระบอกแปลงยังเป็นแท่งสั้นหรือแม้แต่ทรงกลมเซลล์ สกัดดีเอ็นเอและกระบือของ 16S rDNA ถูกดำเนินตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [11] การ16S rDNA ลำดับของสายพันธุ์พบว่า 99% คล้ายคลึงกับที่โอเอฟซี cellulans (ไม่ได้แสดงข้อมูล)ปลูกที่ 250 ml Erlenmeyer ofC.cellulanswere วัฒนธรรมขวดที่ประกอบด้วยขนาดกลาง 50 mL M9 และอ้อย 0.5 กรัม แต่ละขวดแก้วถูกนึ่ง 20 นาทีที่ 121
ค.หลังจากที่ระบายความร้อนแต่ละขวดแก้วถูก inoculated กับ inoculum 1% มีเบ้ารับการกกต่ำกว่า 3.3 Hz ที่ 30
C ในระหว่างวันที่ 4 และตัวอย่างในลข้อถูกถอนในช่วงเวลาที่แตกต่างกัน (0 h, 11 h17 h, 22 h, 24 ชั่วโมง 48 ชั่วโมง 72 h, 96 h, 120 ชม.)น้ำซุปที่ประกอบด้วยสารโปรตีนได้จาก 10 นาทีที่ 10,000 g เพื่อเอากากอ้อยที่เหลือเส้นใยของมันและสารกลูแคน Supernatant ถูกเข้มข้น 5 เท่าในกระเป๋า 10,000-โมเลกุลน้ำหนักตัดไต และ assayed สำหรับกิจกรรมเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สายพันธุ์สำหรับการศึกษานี้, C cellulans แยกได้จาก
ไม้ผุ ตัวอย่างของฝุ่นมัส nigrasaw- ถูก
เก็บรวบรวมไว้ภายใต้สภาวะปลอดเชื้อและ 1 กรัมถูกระงับใน
น้ำหมันและขยับเป็นเวลา 30 นาที จากการระงับนี้
100 มลกระจายบนจานประกอบด้วย M9 กับคาร์บอกซีเซลลูโลส 1% และวุ้น 2%, และแผ่นที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 30
?
C สำหรับวัน 1e5 M9 ประกอบด้วย (L
? 1
) 3.0 กรัม KH2PO4 6.0 กรัม
Na2HPO4,1gNH4Cl, 0.5 กรัมโซเดียมคลอไรด์, 0.003 กรัม CaCl2 อาณานิคมที่
แสดงให้เห็นว่าการละลายของพื้นผิวและสอดคล้องกัน
รัศมีที่แตกต่างที่เกินขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางอาณานิคมได้รับการพิจารณาเป็น degrader polysaccharide และถูกจึง
เลือก เซลล์มีการย้อมตามที่คลาสสิก
ขั้นตอนแกรมอธิบายโดย Doetsch [10] ในฐานะที่เป็นความเหนื่อยล้าของ
กลางที่เส้นใยเปลี่ยนแท่งลงในแท่งสั้น
หรือแม้กระทั่งเซลล์ทรงกลม สกัดดีเอ็นเอและขยาย PCR
ของ 16S rDNA ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [11]
ลำดับ 16S rDNA ของสายพันธุ์ที่พบว่ามีความคล้ายคลึงกันกับ 99% ที่
OFC cellulans (ไม่ได้แสดงข้อมูล).
วัฒนธรรม ofC.cellulanswere เติบโตที่ใน 250 มล Erlenmeyer
ขวดมี 50 มล M9 กลางและ 0.5 กรัมกากอ้อย แต่ละ
ขวดได้รับการนึ่งฆ่าเชื้อเป็นเวลา 20 นาทีที่ 121
?
C. หลังจากที่เย็นแต่ละ
ขวดได้รับเชื้อด้วย 1% หัวเชื้อ ขวดถูก
บ่มภายใต้ 3.3 เฮิรตซ์วันที่ 30
?
C ในช่วง 4 วันและตัวอย่างใน
เพิ่มขึ้นสามเท่าถูกถอนออกในช่วงเวลาที่แตกต่างกัน (0 ชั่วโมง 11 ชั่วโมง
17 ชั่วโมง 22 ชั่วโมง 24 ชั่วโมง 48 ชั่วโมง 72 ชั่วโมง 96 ชั่วโมง 120 เอช).
น้ำซุปที่มีคุณสมบัติโปรตีนถูกปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่ 10,000? g เพื่อเอาชานอ้อยที่เหลือ
เส้นใยและสารกลูแคน ใสถูก
เข้มข้น 5 ครั้งใน 10,000 โมเลกุลน้ำหนักตัดถุงฟอกไตและ assayed สำหรับกิจกรรมของเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สายพันธุ์เพื่อ cellulans ถูกแยกจาก . . .ของเนื้อไม้ ตัวอย่างของ ulmus nigrasaw - ฝุ่นคือเก็บภายใต้สภาพปลอดเชื้อและ 1 กรัมถูกระงับในฆ่าเชื้อน้ำและคนเป็นเวลา 30 นาทีจากการระงับนี้100 ml พบแพร่กระจายในจานมี M9 กับคาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลสร้อยละ 1 และ 2 % Agar และอุณหภูมิ 30 แผ่นC 1e5 วัน M9 ประกอบด้วย ( ล.1) kh2po4 3.0 G , 6.0 กรัมna2hpo4,1gnh4cl NaCl 0.5 กรัม , CaCl2 0.003 กรัม อาณานิคมที่แสดงการสกัดของพื้นผิวและสอดคล้องกันรัศมีที่แตกต่างกันเกินอาณานิคมเส้นผ่าศูนย์กลาง ถือเป็น degrader โพลีแซคคาไรด์ และจากนั้นที่เลือก เซลล์ก็เปื้อนตามการคลาสสิกกรัมขั้นตอนที่อธิบายโดยโดช [ 10 ] เป็นจุดของอาหารเพาะเลี้ยงเปลี่ยนแท่งเป็นแท่งสั้นทรงกลมหรือแม้แต่เซลล์ การสกัดดีเอ็นเอและดีเอ็นเอ เพิ่มจำนวนของ 16S rDNA ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 11 ] ที่ลำดับของ 16S rDNA พบความเหมือนกับสายพันธุ์ 99%แจก . cellulans ( ข้อมูลไม่แสดง )วัฒนธรรม ofc.cellulanswere ปลูกอยู่ในเออร์เลนเมเยอร์ 250 ml .ขวดบรรจุ 50 ml M9 ขนาดกลางและชานอ้อย 0.5 กรัม แต่ละขวดเป็นสังเคราะห์สำหรับ 20 นาทีที่อุณหภูมิ 121หลังจากเย็นแต่ละ .ขวดเป็นเชื้อ 1 % 3 . ขวดคือบ่มได้ที่ 3.3 Hz ที่ 30C ในช่วง 4 วันและตัวอย่างทำสำเนาสามฉบับถูกถอนออกในช่วงเวลาที่ต่างกัน ( 0 H , 11 ชั่วโมง17 ชั่วโมง , 22 ชั่วโมง , 24 ชั่วโมง , 48 ชั่วโมง , 72 ชั่วโมง , 96 H 120 H )น้ำซุปที่มีโปรตีนและเป็นระดับ 10 นาทีที่ 10000g เอาชานอ้อยที่ตกค้างเส้นใย extracellular และกลูแคน . และน่าน คือเข้มข้น 5 ครั้ง 10 , 000 โมเลกุลตัดไตถุง และปริมาณกิจกรรมเอนไซม์ .