CGTase was produced by inoculating

CGTase was produced by inoculating Bacillus sp. C26 in 1 L of
Horikoshi II medium and incubating at 37 ◦C and 200 rpm for 48 h.
Cells and insoluble materials were removed by centrifugation at
4000 × g and 4 ◦C for 15 min. The cell-free supernatant was added
with ammonium sulfate (80% saturation) and left at 4 ◦C overnight
to precipitate the enzyme. The precipitated enzyme was dissolved
in 50 mM phosphate buffer, pH 7.0 and further purified using dialysis
bag with molecular weight cut-off 8000 Dalton. The activity of
the partially purified enzyme was determined by phenolphthalein
colorimetric method [18]. The protein concentration ofthe enzyme
was determined by Folin Ciocaltue method [19]. This partially puri-
fied CGTase was used in the further step. The total activity and
specific activity of crude enzyme were 1064 U and 15.59 U/mg,
respectively. After partial purification, a 27.9-fold purification was
achieved. The specific activity was increased up to 434.2 U/mg.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

CGTase ผลิต โดย inoculating Bacillus sp. C26 ใน 1 ลิตรของHorikoshi II กลาง และ incubating ที่ 37 ◦C และ 200 rpm สำหรับ 48 ชั่วโมงเซลล์และวัสดุที่ไม่ละลายน้ำถูกเอาออก โดยการหมุนเหวี่ยงที่4000 × g และ 4 ◦C 15 นาที เพิ่ม supernatant เซลล์ฟรีแอมโมเนียซัลเฟต (ความเข้ม 80%) และซ้าย 4 ◦C ค้างคืนตกตะกอนเอนไซม์นี้ เอนไซม์ precipitated ที่ละลายในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 50 มม. pH 7.0 และเพิ่มบริสุทธิ์ใช้ฟอกเลือดถุงกับน้ำหนักโมเลกุลวิ่ง 8000 ดาลตัน กิจกรรมของกำหนด โดย phenolphthalein เอนไซม์บริสุทธิ์บางส่วนวิธีเทียบเคียง [18] ความเข้มข้นของโปรตีนของเอนไซม์ดโดยวิธีท่อง Ciocaltue [19] นี้บางส่วนปูริ-กระแสไฟ CGTase ถูกใช้ในขั้นตอนต่อไป กิจกรรมทั้งหมด และเฉพาะกิจกรรมของเอนไซม์ดิบถูกคุณ 1064 และ U/มก., 15.59ตามลาดับ หลังจากทำให้บริสุทธิ์บางส่วน แก้ไขการฟอก 27.9-foldประสบความสำเร็จ กิจกรรมเพิ่มขึ้นถึง 434.2 U/mg

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

CGTase ถูกผลิตโดยการฉีดวัคซีนเชื้อ Bacillus SP C26 ใน 1 ลิตรของ
กลาง Horikoshi ครั้งที่สองและการบ่มที่อุณหภูมิ 37 ◦Cและ 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 48 ชั่วโมง.
เซลล์และวัสดุที่ไม่ละลายน้ำถูกถอดออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่
4000 × G และ 4 ◦Cนาน 15 นาที ใสปราศจากเซลล์ถูกเพิ่มเข้ามา
ด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต (80% อิ่มตัว) และทิ้งไว้ที่ 4 ◦Cค้างคืน
ที่จะเกิดการตกตะกอนเอนไซม์ เอนไซม์ตกตะกอนก็เลือนหายไป
ในขนาด 50 มมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.0 และบริสุทธิ์เพิ่มเติมได้โดยใช้ฟอกไต
ถุงที่มีน้ำหนักโมเลกุลตัด 8000 ดาลตัน กิจกรรมของ
เอนไซม์บางส่วนถูกกำหนดโดย phenolphthalein
วิธีการสี [18] ความเข้มข้นของโปรตีนเอนไซม์ ofthe
ถูกกำหนดโดยวิธี Folin Ciocaltue [19] นี้ puri- บางส่วน
กระแสไฟ CGTase ถูกใช้ในขั้นตอนต่อไป กิจกรรมรวมและ
กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของเอนไซม์เป็น 1,064 U และ 15.59 U / มิลลิกรัม
ตามลำดับ หลังจากการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนบริสุทธิ์ 27.9 เท่าได้รับการ
ประสบความสำเร็จ กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงได้รับการเพิ่มขึ้นถึง 434.2 U / mg

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เอนไซม์ที่ผลิตโดยการฉีดวัคซีนใน Bacillus sp . c26 1 ล.เรสในปริมาณปานกลาง และ เพาะที่อุณหภูมิ 37 ◦ 2 องศาเซลเซียสและความเร็วรอบ 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 48 ชั่วโมงเซลล์และวัสดุที่ไม่ละลายน้ำปั่นที่ถูกกำจัดโดย4 × 4 ◦ G และ C เป็นเวลา 15 นาที นำเพิ่มการสังเคราะห์ด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต ( 80% อิ่มตัว ) และด้านซ้าย 4 ◦ C ค้างคืนตกตะกอนเอนไซม์ การตกตะกอนเอนไซม์ละลายในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 และ 50 มิลลิเมตร เพิ่มเติมบริสุทธิ์ใช้ฟอกเลือดถุงตัดโมเลกุล 8 , 000 ดาลตัน กิจกรรมของบางส่วนถูกกำหนดโดยเอนไซม์ฟีนอล์ฟทาลีน7.4 ) [ 18 ] ระดับโปรตีนของเอนไซม์ถูกกำหนดโดยวิธีการ folin ciocaltue [ 19 ] ปูรี - นี้บางส่วนfied CGTase ที่ใช้ในขั้นตอนต่อไป รวมกิจกรรมกิจกรรมจำเพาะของเอนไซม์ คือ 1064 u และระยะ U / mg ,ตามลำดับ หลังจากการทำให้บริสุทธิ์บางส่วน , 27.9-fold บริสุทธิ์คือลุ้นรับ กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงเพิ่มขึ้นถึง 434.2 U / mg