Bacillus thuringiensis (Bt) Cry1A t

Bacillus thuringiensis (Bt) Cry1A toxin-binding sites in the Douglas fir tussock moth (DFTM) larval gut were localized using immunofluorescence microscopy. Cry1Aa, Cry1Ab and Cry1Ac all bound strongly to the DFTM peritrophic membrane (PM); weaker binding of the Cry1A toxins was observed along the apical brush border of the midgut epithelium. Comparative analysis of the Cry1A toxin-binding molecules in the PM and brush border membrane vesicles (BBMVs) showed that a similar toxin-binding complex was present in both. The Cry1A toxin-binding substance, a broad band with an apparent size of 180 kDa, consisted of a closely spaced doublet. The doublet was present in peritrophins, proteins tightly bound to the PM. Lectin binding studies of the PM and BBMV toxin-binding components revealed that they are glyconjugates with terminal α-GalNAc residues comprised exclusively of O-linked oligosaccharides in their glycan structures. Mild periodate oxidation, release of O-linked glycans by β-elimination, and enzymatic removal of terminal α-linked GalNAc residues with N-acetyl-α-d-galactosaminidase digestion abolished Cry1A toxin-binding to the PM and BBMV components. These data provide strong evidence that O-linked glycans are the target structures on the toxin-binding glycoconjugates for the Cry1A class of insecticidal proteins in DFTM larvae.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อเมริกาพิษผูก Cry1A บาซิลลัส (Bt) ในลำไส้ larval เม่า (DFTM) ดักลาสเฟอร์มีภาษาท้องถิ่นใช้ immunofluorescence microscopy Cry1Aa, Cry1Ab และ Cry1Ac กับขอ DFTM peritrophic เมมเบรน (PM), รวมสารพิษ Cry1A แกร่งถูกสังเกตตามขอบแปรงปลายยอด midgut epithelium โมเลกุลของสารพิษรวม Cry1A ใน PM วิเคราะห์เปรียบเทียบ และแปรงขอบเยื่ออสุจิ (BBMVs) แสดงให้เห็นว่า พิษผูกซับซ้อนคล้ายมีทั้งนั้น ของสารพิษรวม Cry1A วงกว้าง ด้วยขนาดปรากฏของ 180 kDa ประกอบด้วยมีคำซ้อนในภาษาลที่อย่างใกล้ชิด คำซ้อนในภาษามีใน peritrophins โปรตีนกับศึกษารวมศึกษาน.น.แน่น และส่วนประกอบของสารพิษรวม BBMV เปิดเผยว่า พวกเขาเป็น glyconjugates กับเทอร์มินัลด้วยกองทัพ-GalNAc ตกประกอบด้วยเฉพาะ oligosaccharides O เชื่อมโยงในโครงสร้างของ glycan ไมลด์ periodate ออกซิเดชัน รุ่น glycans O เชื่อมโยงโดยβ-ตัด และเทอร์มินัลเชื่อมโยงด้วยกองทัพ GalNAc ตกกับ N-acetyl-ด้วยกองทัพ-d-galactosaminidase ย่อยอาหารเอนไซม์ในระบบกำจัดพิษ Cry1A-ผูกกับ PM ที่ยุติ และคอมโพเนนต์ BBMV ข้อมูลเหล่านี้มีฐานเชื่อมโยง O glycans ที่ใช้โครงสร้างเป้าหมายบน glycoconjugates พิษผูกสำหรับคลา Cry1A ของโปรตีน insecticidal ในตัวอ่อน DFTM

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Bacillus thuringiensis (บาท) Cry1A สารพิษที่มีผลผูกพันเว็บไซต์ในเม่าดักลาสเฟอร์ (DFTM) ไส้ตัวอ่อนได้รับการแปลเป็​​นภาษาท้องถิ่นโดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิมมูโน Cry1Aa, Cry1Ab และ Cry1Ac ผูกพันทุกอย่างยิ่งที่จะเมมเบรน DFTM peritrophic (PM); ปรับตัวลดลงมีผลผูกพันของสารพิษ Cry1A ถูกพบตามแนวชายแดนแปรงปลายของเยื่อบุผิวกระเพาะ การวิเคราะห์เปรียบเทียบของโมเลกุลของสารพิษที่มีผลผูกพัน Cry1A ใน PM และถุงเยื่อชายแดนแปรง (BBMVs) แสดงให้เห็นว่ามีความซับซ้อนสารพิษที่มีผลผูกพันที่คล้ายกันอยู่ในปัจจุบันทั้งใน Cry1A สารพิษที่มีผลผูกพัน, วงกว้างที่มีขนาดปรากฏของ 180 กิโลดาลตันประกอบด้วยคู่ระยะใกล้ คู่ที่ถูกนำเสนอใน peritrophins โปรตีนที่ถูกผูกไว้อย่างแน่นหนากับนายกฯ เลคตินการศึกษาที่มีผลผูกพันของนายกรัฐมนตรีและ BBMV ส่วนประกอบสารพิษที่มีผลผูกพันเปิดเผยว่าพวกเขาจะ glyconjugates กับขั้วตกค้างα-GalNAc ประกอบด้วยเฉพาะของ oligosaccharides O-เชื่อมโยงในโครงสร้าง glycan ของพวกเขา การเกิดออกซิเดชันอ่อน periodate ปล่อย glycans O-เชื่อมโยงโดยβ-การกำจัดและการกำจัดของเอนไซม์αของอาคารที่เชื่อมโยงกับสารตกค้าง GalNAc N-acetyl-α-D-galactosaminidase ยกเลิกการย่อยอาหาร Cry1A สารพิษที่มีผลผูกพันไปยังนายกรัฐมนตรีและ BBMV ส่วนประกอบ ข้อมูลเหล่านี้ให้หลักฐานที่ glycans O-เชื่อมโยงโครงสร้างเป้าหมายใน glycoconjugates สารพิษที่มีผลผูกพันสำหรับการเรียน Cry1A ของโปรตีนฆ่าแมลงในตัวอ่อน DFTM

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Bacillus thuringiensis ( Bt ) cry1a พิษเต็มเปี่ยมในดักลาสเฟอร์ผีเสื้อราตรี ( dftm ) หนอนไส้เป็นถิ่นใช้กล้องจุลทรรศน์ D . cry1aa cry1ab cry1ac , และทั้งหมดผูกพันอย่างยิ่งให้ dftm peritrophic เมมเบรน ( PM ) ; แข็งแกร่งผูกพันของ cry1a สารพิษที่พบตามปลายแปรงชายแดนของเยื่อบุผิวของประสิทธิภาพและเหมาะสม .การวิเคราะห์เปรียบเทียบ cry1a ผูกสารพิษโมเลกุลใน pm และแปรงชายแดนแผ่นเล็ก ( bbmvs ) พบว่าสารพิษที่คล้ายกันรวมอยู่ในทั้ง การ cry1a ผูกสารพิษสารในวงกว้างกับการปรากฏขนาด 180 กิโลดาลตันประกอบด้วยเว้นระยะอย่างใกล้ชิดดับเลต . ที่ดับเลตที่ถูกนำเสนอใน peritrophins โปรตีนให้แน่นผูก PMตินผูกการศึกษาน. และ bbmv ส่วนประกอบของสารพิษ เปิดเผยว่า พวกเขาจะ glyconjugates ผูกกับปลายแอลฟา galnac ตกค้างประกอบด้วยเฉพาะของ o-linked โอลิโกแซคคาไรด์โครงสร้างไกลแคน . อ่อนมากกว่าปฏิกิริยาโดยการปล่อย o-linked glycans บีตา - ,เอนไซม์แอลฟาและการกำจัดของอาคารที่เชื่อมโยง galnac ตกค้างกับ n-acetyl - แอลฟา d-galactosaminidase การย่อยอาหารยกเลิก cry1a สารพิษผูกกับ PM และส่วนประกอบ bbmv . ข้อมูลเหล่านี้ให้หลักฐานที่ o-linked glycans เป็นเป้าหมายโครงสร้างในการจับสารพิษไกลโคค จูเกตสำหรับห้อง cry1a ) ของโปรตีนใน dftm ตัวอ่อน