To screen for the best processing p

To screen for the best processing parameters, the effects of
the culture and the ferment disposal conditions on antifungal
crude extract production were investigated using single-factor
experiments. The inhibitory rate ofthe crude strain 28 extracts
against B4 served as the indicator of antifungal activity.
The base culture conditions and the crude extraction of the
metabolites were completed according to the above method.
Extract-free acetone was used as a negative control. All experiments
were performed in triplicate.
Media Optimization: Strain 28 was inoculated into eight different
liquid media (Gause No. 1 liquid medium, Czapek–Dox
broth, Sabouraud’s dextrose broth, BSE (0.5% succinate, 0.04%
K2HPO4, 0.04% KH2PO4, 0.02% MgSO4·7H2O, 0.05% yeast
extract; pH 6.5), Martin’s broth, LB broth, medium A, and PDB)
to select a suitable medium.
Initial pH test: Strain 28 was inoculated onto different PDB
basic media at different initial pH values (initial pH values of
6.0, 6.3, 6.6, 6.9, 7.2 and 7.5).
Incubation time test: Ten conical flasks (250mL), each of
which contained 150mL of the PDB basic medium, were incubated
for 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 and 12 d.
Thermal stability of antifungal activity assay: Seven
uniform-bore glass tubes with fine gradations were numbered
as control keeping (CK) and 1–6. Three milliliter of the extracting
solution was poured into the flasks, which were then
heated in a water bath for 30min at temperatures of 40 ◦C,
50 ◦C, 60 ◦C, 70 ◦C, 80 ◦C, 90 ◦C, and 100 ◦C, respectively.
Antifungal compound extraction: To investigate the effect
of the extraction solvent on the fermentation broth, 5 different
extraction solvents (petroleum ether, diethyl ether, n-butyl
alcohol, EtOAc and alcohol) were chosen to extract the antifungal
compounds.
Antifungal activity assay: We prepared enough 50-mL
Erlenmeyer flasks so that each contained precisely 30mL of
PDB medium [including 10% of the extracted solution (v/v)]
for each process parameter above. Next, this 30mL mixture
was poured into three Petri dishes per condition. A fungus
plug (4mm diameter) of mycelial inoculum was cut from the
margin of actively growing B4 colonies as an indicator fungus,
and it was placed in the center of the PDA medium of each
dish. Having been inoculated, these dishes were wrapped with
plastic wrap (which was purchased in the supermarket), and
incubated in an incubator at 28 ◦C for 7 d. Finally, the suppression
of B4 by fermented broth extract was measured in two
perpendicular directions using a growth rate method.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ที่หน้าจอสำหรับพารามิเตอร์การประมวลผลที่ดีที่สุด ผลกระทบของวัฒนธรรมและเงื่อนไขการกำจัดหมักจากเชื้อราการผลิตสารสกัดจากน้ำมันดิบถูกตรวจสอบโดยใช้ปัจจัยเดียวการทดลอง สารสกัดยับยั้งสายพันธุ์ดิบ 28 อัตรากับ B4 เป็นตัวบ่งชี้ของกิจกรรมต้านเชื้อราเงื่อนไขพื้นฐานวัฒนธรรมและการสกัดน้ำมันดิบสารเสร็จตามวิธีการข้างต้นอะซีโตนสารสกัดฟรีถูกใช้เป็นตัวควบคุมค่าลบ การทดลองทั้งหมดดำเนินการลข้อเพิ่มประสิทธิภาพสื่อ: inoculated สายพันธุ์ 28 เป็นแปดแตกต่างกันสื่อของเหลว (Gause หมายเลข 1 ของเหลวปานกลาง Czapek – Doxน้ำซุป น้ำซุปของ Sabouraud เดกซ์โทรส BSE (0.5% succinate, 0.04%K2HPO4, 0.04% KH2PO4, 0.02% MgSO4·7H2O ยีสต์ 0.05%แยก ค่า pH 6.5), มาร์ตินส์ซุป น้ำซุปปอนด์ กลาง A และ PDB)เลือกกลางที่เหมาะสมทดสอบค่า pH เริ่มต้น: สายพันธุ์ 28 ถูก inoculated ไปยัง PDB ที่แตกต่างกันค่า pH เริ่มต้นที่แตกต่างกัน (ค่า pH เริ่มต้นของสื่อพื้นฐาน6.0, 6.3, 6.6, 6.9, 7.2 และ 7.5)การทดสอบระยะเวลากกไข่: สิบกรวยขวด (250 มล), แต่ละที่อยู่ 150 มิลลิลิตรของสื่อพื้นฐาน PDB ได้รับการกกสำหรับ 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 และ 12 dการทดสอบฤทธิ์ต้านความร้อนเสถียรภาพ: เจ็ดหลอดแก้วรูเหมือนกับไล่ระดับที่ดีได้เลขเป็นการควบคุมรักษา (CK) และ 1 – 6 สามมิลลิเมตรของการแยกโซลูชันที่ถูกเทลงในเบ้า ซึ่งเป็นแล้วอุ่นในอ่างน้ำสำหรับ 40 ◦C, 30 นาทีที่อุณหภูมิ50 ◦C, 60 ◦C, 70 ◦C, 80 ◦C, 90 ◦C และ 100 ◦C ตามลำดับสกัดสารที่เชื้อรา: การตรวจสอบผลของตัวทำละลายสกัดจากน้ำซุปหมัก 5 แตกต่างกันตัวทำละลายสกัด (อีเธอร์ปิโตรเลียมอีเธอร์ diethyl เอ็นบิวทิลแอลกอฮอล์ EtOAc และแอลกอฮอล์) เลือกที่แยกการต้านเชื้อราสารประกอบทดสอบฤทธิ์ต้าน: เราเตรียม 50 mL เพียงพอขวด Erlenmeyer ดังนั้นแต่ละที่มีอยู่แม่นยำ 30 มล.PDB ปานกลาง [รวม 10% (v/v) โซลูชันแยก]สำหรับแต่ละพารามิเตอร์กระบวนการข้างต้น ถัดไป นี้ส่วนผสม 30 มล.ถูกเทลงในจานเพาะสามต่อสภาพ เชื้อราปลั๊ก (4 มม.) ของ mycelial inoculum ถูกตัดออกจากการขอบของแข็งขันเติบโตอาณานิคม B4 เป็นเชื้อราเป็นตัวบ่งชี้และมันถูกวางในตำแหน่งกลางของกลาง PDA ของแต่ละจานนี้ มีการ inoculated อาหารเหล่านี้ถูกห่อด้วยห่อพลาสติก (ซึ่งซื้อในซุปเปอร์มาร์เก็ต), และรับการกกในตู้อบเป็นเวลา 28 ◦C สำหรับ 7 d ในที่สุด การปราบปรามของ B4 โดยน้ำซุปหมัก แยกวัดสองทิศทางตั้งฉากโดยใช้วิธีอัตราการเจริญเติบโต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไปยังหน้าจอสำหรับพารามิเตอร์การประมวลผลที่ดีที่สุด, ผลกระทบของ
วัฒนธรรมและสภาพการกำจัดเชื้อราหมักใน
การผลิตสารสกัดถูกตรวจสอบโดยใช้ปัจจัยเดียวที่
ทดลอง อัตราการยับยั้ง ofthe สายพันธุ์ดิบ 28 สารสกัด
กับ B4 ทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้ของกิจกรรมต้านเชื้อราได้.
เงื่อนไขวัฒนธรรมพื้นฐานและการสกัดน้ำมันดิบของ
สารเสร็จสมบูรณ์ตามวิธีการข้างต้น.
อะซีโตนสารสกัดจากฟรีได้ถูกใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบ การทดสอบทั้งหมด
ได้ดำเนินการในการเพิ่มขึ้นสามเท่า.
Optimization Media: สายพันธุ์ 28 เชื้อเป็นแปดที่แตกต่างกัน
สื่อเหลว (Gause ฉบับที่ 1 กลางเหลว Czapek-Dox
น้ำซุป Sabouraud ของน้ำซุปเดกซ์โทรส BSE (0.5% succinate 0.04%
K2HPO4 0.04% KH2PO4, 0.02% MgSO4 · 7H2O, 0.05% ยีสต์
สารสกัด; ค่า pH 6.5), มาร์ตินน้ำซุป LB น้ำซุป, กลางและ PDB)
. เพื่อเลือกสื่อที่เหมาะสม
ทดสอบค่า pH เริ่มต้น: สายพันธุ์ 28 ถูกเชื้อเข้าสู่ที่แตกต่างกัน PDB
สื่อพื้นฐานที่ pH เริ่มต้นที่แตกต่างกัน ค่า (ค่า pH เริ่มต้นของ
6.0, 6.3, 6.6, 6.9, 7.2 และ 7.5).
เวลาบ่มเพาะการทดสอบ: สิบขวดรูปกรวย (250mL) แต่ละแห่ง
ที่มี 150 มลของกลางขั้นพื้นฐาน PDB, ถูกบ่ม
สำหรับ 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 และ 12 d.
เสถียรภาพทางความร้อนของการทดสอบกิจกรรมต้านเชื้อรา: เจ็ด
หลอดแก้วเครื่องแบบเจาะที่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างค่อยเป็นค่อยไปดีถูกเลข
การรักษาการควบคุม (CK) และ 1-6 สามมิลลิลิตรของการแยก
ทางออกที่ถูกเทลงในขวดซึ่งถูกแล้ว
อุ่นในอ่างน้ำสำหรับ 30 นาทีที่อุณหภูมิ 40 ◦C,
50 ◦C 60 ◦C 70 ◦C 80 ◦C 90 ◦Cและ 100 ◦Cตามลำดับ.
เชื้อราสกัดสารประกอบ: เพื่อศึกษาผลกระทบ
ของการสกัดด้วยตัวทำละลายในน้ำหมัก 5 ที่แตกต่างกัน
ตัวทำละลายสกัด (อีเทอร์ปิโตรเลียมอีเทอร์, n-butyl
แอลกอฮอล์ EtOAc และเครื่องดื่มแอลกอฮอล์) ได้รับเลือกให้สารสกัดจากเชื้อรา
สาร .
กิจกรรมการทดสอบเชื้อรา: เราเตรียมพอ 50 มิลลิลิตร
ขวด Erlenmeyer เพื่อให้แต่ละที่มีอยู่ได้อย่างแม่นยำ 30mL ของ
PDB กลาง [รวมถึง 10% ของสารสกัด (v / v)]
สำหรับกระบวนการแต่ละพารามิเตอร์ดังกล่าวข้างต้น ถัดไปผสม 30mL นี้
ถูกเทลงในสามจานเลี้ยงเชื้อต่อสภาพ เชื้อรา
ปลั๊ก (เส้นผ่าศูนย์กลาง 4mm) ของเชื้อเส้นใยถูกตัดจาก
อัตรากำไรขั้นต้นของการเจริญเติบโตอย่างแข็งขัน B4 อาณานิคมเป็นเชื้อราตัวบ่งชี้
และมันถูกวางอยู่ในใจกลางของกลาง PDA ของแต่ละ
จาน ได้รับเชื้ออาหารเหล่านี้ถูกห่อด้วย
พลาสติกห่อ (ซึ่งถูกซื้อในซูเปอร์มาร์เก็ต) และ
บ่มในตู้อบที่ 28 ◦Cสำหรับ 7 วัน สุดท้ายการปราบปราม
ของ B4 โดยสารสกัดจากน้ำซุปหมักวัดในสอง
ทิศทางตั้งฉากโดยใช้วิธีอัตราการเจริญเติบโต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หน้าจอสำหรับการประมวลผลที่ดีที่สุดของผลของวัฒนธรรมและเงื่อนไขในการกำจัดเชื้อราหมักการผลิตสารสกัดทำการศึกษาโดยใช้ปัจจัยเดียวการทดลอง อัตราการเจริญของเชื้อ 28 สารสกัดหยาบกับ B4 ทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้ของกิจกรรมฆ่าวัฒนธรรมและฐานเงื่อนไขการสกัดน้ำมันดิบของสารเสร็จตามวิธีการข้างต้นสารสกัดอะซิโตนฟรีใช้เป็นชุดควบคุมลบ ทุกการทดลองมีการปฏิบัติทั้งสามใบสื่อการเพิ่มประสิทธิภาพ : 28 เป็นเชื้อคนละสายพันธุ์ แปดอาหารเหลว ( กอส 1 อาหาร Czapek Dox ของเหลว–กลางน้ำซุป เป็นซุป sabouraud เดกซ์โทรส BSE ( 0.5% Succinate 0.04 %k2hpo4 0.04 % kh2po4 0.02 % MgSO4 ใด้วย 7h2o 0.05 เปอร์เซ็นต์ ยีสต์แยก ; pH 6.5 ) , มาร์ติน น้ำซุป , LB broth ( PDB ) , และการเลือกสื่อที่เหมาะสมทดสอบ pH เริ่มต้น : สายพันธุ์ 28 เป็นเชื้อลงบนเส้นใยที่แตกต่างกันสื่อพื้นฐานที่ pH เริ่มต้นที่แตกต่างกัน ( pH เริ่มต้นเท่ากับค่า6.0 , 5.5 , 6.6 , 6.9 , 7.2 และ 7.5 )ทดสอบเวลาในการบ่ม : สิบขวดรูปกรวย ( 250ml ) แต่ละซึ่งบรรจุ 150ml ของ PDB พื้นฐานปานกลาง คือ บ่ม3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 และ 12 .เสถียรภาพทางความร้อนของเชื้อรา 3 : 7 กิจกรรมชุดเจาะท่อแก้ว ด้วยการปรับเกรนนับการควบคุม ( CK ) และ 1 – 6 สามมิลลิลิตรของการสกัดโซลูชั่นถูกเทลงในขวด ซึ่งจากนั้นอุ่นในอ่างน้ำ 30 นาที ที่อุณหภูมิ 40 ◦ C50 ◦ C 60 ◦ C 70 ◦ C 80 ◦ C 90 ◦ C , และ 100 ◦องศาเซลเซียส ตามลำดับการสกัดสารป้องกันเชื้อรา เพื่อศึกษาผลกระทบของตัวทำละลายการสกัดในน้ำหมัก 5 แตกต่างกันตัวทำละลายการสกัด ( ปิโตรเลียมอีเทอร์อีเทอร์นอร์แมลบิวทิล ,แอลกอฮอล์ etoac และแอลกอฮอล์ ) ถูกเลือกเพื่อสกัดสารต้านเชื้อราสารประกอบในกิจกรรมการทดสอบ : เราเตรียมไว้เพียงพอ 50 มล.เออร์เลนเมเยอร์ ขวด เพื่อให้แต่ละบรรจุ 30ml ของอย่างแน่นอน[ อาหาร PDB รวมถึง 10% ของสารสกัด ( v / v ) ]พารามิเตอร์สำหรับแต่ละกระบวนการข้างต้น ต่อไป ซึ่งจากส่วนผสมถูกเทลงในจานเลี้ยงเชื้อต่อสามเงื่อนไข เชื้อราปลั๊ก ( 4 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางของเส้นใยเชื้อถูกตัดจากขอบของงานเติบโต B4 โคโลนีเป็นตัวบ่งชี้เห็ดราและมันก็อยู่ในศูนย์กลางของ PDA ของแต่ละจาน ได้รับเชื้ออาหารเหล่านี้ถูกห่อด้วยห่อพลาสติก ( ซึ่งซื้อในซุปเปอร์มาร์เก็ต ) และเลี้ยงในตู้อบที่ 28 ◦ C 7 D . ในที่สุด , การปราบปรามสารสกัดจากน้ำหมักของ B4 โดยวัดใน สองทิศทางตั้งฉากใช้วิธีอัตราการเจริญเติบโต