Samples extracted using the BOE and

Samples extracted using the BOE and Pelatrice techniques were closely grouped, while samples extracted using Sfumatrice and FMC constituted a second cluster. This result was consistent with the different principles of each process. BOE and Pelatrice processes involve rasping or puncturing the peel before extracting the juice while, in FMC and Sfumatrice, the oil is extracted from the lemon peel simultaneous with, or after, the extraction of the juice.

Characteristic compounds of the FMC extraction process were citronellyl propanoate, hexanol, and cis-piperitol. Nonanoic acid, decanol, 1,4-p-menthadien-7-al, perillyl acetate, β-copaene, nerolidol, caryophyllene, and tetradecanal were related to the BOE process. The Pelatrice process was characterized by hexanal, trans-2-hexenal, geraniol, nootkatone, valencene, trans-β-ocimene, γ-terpinene, and geranyl acetate. Finally, lemon oils extracted by Sfumatrice contained mainly heptanal, myrcene, phellandrene, iso-citral, 4-terpineol, citroptene, neral, and geranial. The concentrations of characteristic compounds were higher in one oil, but they could also be present in other oils. Previously, the influence of the extraction technologies on lemon oil chemical composition has scarcely been reported (Verzera, Dugo, Mondello, Trozzi, & Cotroneo, 1999). According to Verzera et al., (1999) the Pelatrice process produces lemon oils with richer oxygenated compound content, an observation that is consistent with our results. Additionally, they reported a poorer oxygenated compound content in oils obtained by the Sfumatrice process and more pleasant odour notes. Again, these considerations are consistent with our results because the Sfumatrice samples contained key odour components, such as neral and geranial.

3.4.3. UHPLC-TOF-MS

3.4.3.1. General

In metabolomics studies, access to fast chromatography methods that provide high separation resolution and high repeatability is a key to generating valuable datasets. In this respect, the introduction of ultra-high pressure liquid chromatography (UHPLC) systems, operating at very high pressures and using sub-2 μm packing columns, has allowed a remarkable decrease in analysis time and increase in peak capacity, sensitivity and reproducibility compared with conventional HPLC. This technology has rapidly been widely accepted by the analytical community and is being gradually applied to various fields of plant analysis (Eugster et al., 2011), especially in metabolomics. Oxygen heterocyclic components of lemon oil have been mainly studied using HPLC-UV and HPLC-MS for oxygen heterocyclic components characterization and quantification (Desmortreux et al., 2009 and Dugo et al., 2010; Frérot and Decorzant, 2004 and Tranchida et al., 2012). To our knowledge, there are no published studies on the non-volatile fraction of lemon oil analyzed by UHPLC-TOF-MS, which could potentially be a method of choice to characterize the non-volatile fraction of the CPLO, as it can detect even low abundant components.

3.4.3.2. Differentiation according to geographic origin

Unsupervised multivariate analysis (PCA and HCA with Pareto scaling) was performed on the UHPLC-TOF-MS (positive mode) data, which consisted of a 64 × 1393 data matrix. No clear clustering of the samples could be observed according to their origin. Both ionization modes were assessed; however, the positive ionization mode was found to be more informative than the negative ionization mode; ten times more features were detected than in the negative mode. Due to the high sensitivity and resolution of UHPLC-TOF-MS, several features were detected. This large number of features could also be explained by the presence of sodium adducts and complex ions ([2M+Na]+, [2M+H]+). To study the most significant and relevant features, the data were Pareto-scaled. A supervised multivariate analysis was then carried out, and a significant OPLS-DA model was obtained (R2Y(cum)= 0.939, Q2(cum)= 0.750).

Three binary OPLS-DA models (Pareto scaling) were then built to determine which variables were discriminant for each class, namely, Argentina vs. Italy, Italy vs. Spain and Spain vs. Argentina. Italian lemon oil samples were considered a common reference, and a SUS-plot was built, using the two models that involved Italy (Italy vs. Argentina and Italy vs. Spain) for discriminant variable detection ( Fig. 4). Most discriminant features could be attributed to furocoumarin derivatives, based on high resolution mass spectra and retention time relative to reference compounds provided by Firmenich SA. Italian samples were characterized by their high bergamottin content, while imperatorin and byakangelicol were found in the highest quantities in Spanish and Argentinian oils, respectively. These results are consistent with the chemical information obtained from the analysis of CPLOR by FT-MIR and NMR. A study is underway to clearly identify these discriminant compounds from Italian and Argentina samples by 1H

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างที่สกัดโดยใช้เทคนิค Pelatrice และตั๋วแลกเงินได้ถูกอย่างใกล้ชิด จัด ขณะที่ตัวอย่างที่สกัดโดยใช้ Sfumatrice และ FMC ทะลักคลัสเตอร์ที่สอง ผลนี้สอดคล้องกับหลักการต่าง ๆ ของแต่ละกระบวนการได้ กระบวนการ Pelatrice และตั๋วแลกเงินได้ที่เกี่ยวข้องกับ rasping หรือ puncturing เปลือกก่อนที่จะแยกน้ำในขณะที่ ใน FMC และ Sfumatrice น้ำมันที่สกัดจากเปลือกมะนาวพร้อมด้วย หรือ หลัง สกัดน้ำสารลักษณะของกระบวนการสกัด FMC ถูก citronellyl propanoate, hexanol และ cis piperitol กรด nonanoic, decanol, 1,4-p-menthadien-7-อัล perillyl acetate β-copaene, nerolidol, caryophyllene และ tetradecanal เกี่ยวข้องกับกระบวนการของตั๋วแลกเงินได้ กระบวนการ Pelatrice ถูกลักษณะ โดย hexanal ทรานส์-2-hexenal, geraniol, nootkatone, valencene, ocimene ทรานส์-β γ-terpinene และ geranyl acetate ในที่สุด น้ำมันมะนาวที่สกัด ด้วย Sfumatrice อยู่ส่วนใหญ่ heptanal, myrcene, phellandrene, iso citral, 4 terpineol, citroptene, neral และ geranial ความเข้มข้นของสารในลักษณะสูงในน้ำมันหนึ่ง แต่พวกเขายังอาจจะมีอยู่ในน้ำมันอื่น ๆ ก่อนหน้านี้ อิทธิพลของเทคโนโลยีสกัดน้ำมันมะนาวแทบมีองค์ประกอบทางเคมีบนรายงาน (Verzera, Dugo, Mondello, Trozzi, & Cotroneo, 1999) ตาม Verzera et al., (1999) Pelatrice กระบวนการผลิตน้ำมันมะนาวขึ้น oxygenated ผสมเนื้อหา การสังเกตที่สอดคล้องกับผลของเรา นอกจากนี้ พวกเขารายงานตัวเนื้อหา oxygenated ผสมย่อมในน้ำมันที่ได้จากกระบวนการ Sfumatrice และบันทึกกลิ่นสบายมากขึ้น อีกครั้ง การพิจารณาเหล่านี้จะสอดคล้องกับผลของเราเนื่องจากตัวอย่าง Sfumatrice ประกอบด้วยส่วนประกอบที่สำคัญกลิ่น neral และ geranial3.4.3 การ UHPLC-TOF-MS3.4.3.1 การทั่วไปในการศึกษา metabolomics ถึงวิธี chromatography รวดเร็วที่ให้ความละเอียดสูงแยกและทำซ้ำในที่สูงเป็นสิ่งสำคัญเพื่อสร้างคุณค่า datasets ประการนี้ แนะนำของระบบของเหลว chromatography (UHPLC) ความดันสูง ทำงานที่ความดันสูงมาก และใช้ μm 2 ย่อยบรรจุคอลัมน์ มีได้ลดโดดเด่นในการวิเคราะห์เวลาและเพิ่มกำลังการผลิตสูงสุด ความไว และ reproducibility เทียบกับ HPLC ธรรมดา เทคโนโลยีนี้ได้อย่างรวดเร็วแพร่หลายรับวิเคราะห์ชุมชน และค่อย ๆ กำหนดเขตข้อมูลต่าง ๆ วิเคราะห์พืช (Eugster et al., 2011), โดยเฉพาะอย่างยิ่งใน metabolomics คอมโพเนนต์ ๔๒๓ ออกซิเจนของน้ำมันมะนาวได้รับส่วนใหญ่ศึกษาใช้ HPLC UV และ HPLC MS การจำแนกส่วนประกอบ ๔๒๓ ออกซิเจนนับ (Desmortreux et al., 2009 และ Dugo et al., 2010 Frérot และ Decorzant, 2004 และ Tranchida et al., 2012) ความรู้ของเรา มีไม่การศึกษาเผยแพร่ในเศษระเหยไม่ใช่น้ำมันมะนาววิเคราะห์ โดย UHPLC-TOF-MS ซึ่งอาจเป็นวิธีการที่เลือกลักษณะของตัวเศษไม่ระเหย CPLO มันสามารถป้องกันส่วนประกอบมากมายแม้แต่น้อย3.4.3.2 การสร้างความแตกต่างตามแหล่งกำเนิดทางภูมิศาสตร์วิเคราะห์ตัวแปรพหุ unsupervised (PCA และ HCA ด้วย Pareto ขนาด) ที่ดำเนินการบนข้อมูล UHPLC-TOF-MS (โหมดบวก) ซึ่งประกอบด้วยเมทริกซ์ข้อมูล 1393 64 × คลัสเตอร์ไม่ชัดเจนอย่างไม่สามารถจะสังเกตตามจุดกำเนิดของ มีประเมินทั้งสองโหมด ionization อย่างไรก็ตาม มีโหมด ionization บวกพบมีข้อมูลมากขึ้นกว่าโหมด ionization ลบ คุณลักษณะเพิ่มเติมครั้งที่ 10 พบกว่าในโหมดการลบ ความไวสูงและความละเอียดของ UHPLC TOF MS หลายคุณลักษณะตรวจพบ ยังอธิบายคุณลักษณะนี้จำนวนมาก โดยสถานะของโซเดียม adducts และซับซ้อนกัน ([2M + นา] +, [2M + H] +) ได้ การศึกษาคุณลักษณะที่สำคัญ และเกี่ยวข้องมากที่สุด ข้อมูลถูกปรับ Pareto จากนั้นได้ทำการวิเคราะห์ตัวแปรพหุมี และแบบ OPLS ดาสำคัญกล่าว (R2Y(cum) = 0.939, Q2(cum) = 0.750)มีสร้างสามนารีรุ่น OPLS-ดา (Pareto ขนาด) ขึ้นแล้วเพื่อกำหนดตัวแปรที่ถูก discriminant สำหรับแต่ละคลาส ได้แก่ อาร์เจนติน่ากับอิตาลี อิตาลีกับสเปน และสเปนกับอาร์เจนตินา ตัวอย่างน้ำมันมะนาวอิตาเลียนได้ถืออ้างอิงทั่วไป และ SUS-แผน สร้าง ใช้สองรุ่นอิตาลีที่เกี่ยวข้อง (เทียบกับอิตาลีอาร์เจนตินาและอิตาลีกับสเปน) สำหรับตรวจสอบตัวแปร discriminant (Fig. 4) คุณลักษณะ discriminant ส่วนใหญ่อาจเกิดจาก furocoumarin อนุพันธ์ รักษาเวลาเมื่อเทียบกับสารอ้างอิงโดย Firmenich SA และแรมสเป็คตราขนาดใหญ่ความละเอียดสูง ตัวอย่างอิตาลีมีลักษณะ โดยความสูง bergamottin ที่เนื้อหา ในขณะที่ imperatorin และ byakangelicol พบในปริมาณสูงที่สุดในสเปน และติเนียนน้ำมัน ตามลำดับ ผลลัพธ์เหล่านี้จะสอดคล้องกับข้อมูลสารเคมีที่ได้จากการวิเคราะห์ของ CPLOR FT-มีร์และ NMR การศึกษาคือระหว่างดำเนินการ อย่างชัดเจนระบุ discriminant สารประกอบจากอิตาลีเหล่านี้และตัวอย่างอาร์เจนติน่า โดย 1H

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างที่สกัดโดยใช้ BOE และเทคนิค Pelatrice ถูกแบ่งอย่างใกล้ชิดในขณะที่กลุ่มตัวอย่างที่สกัดโดยใช้ Sfumatrice และเอฟเอ็มประกอบด้วยกลุ่มที่สอง ผลที่ได้นี้มีความสอดคล้องกับหลักการที่แตกต่างกันของแต่ละขั้นตอน BOE และกระบวนการ Pelatrice เกี่ยวข้องกับการที่ทำให้ระคายเคืองหรือเจาะเปลือกก่อนที่จะสกัดในขณะที่น้ำในเอฟเอ็มและ Sfumatrice น้ำมันที่สกัดจากเปลือกมะนาวพร้อมกันกับหรือหลังจากการสกัดน้ำผลไม้ที่. สารประกอบลักษณะของกระบวนการสกัดเอฟเอ็มเป็น citronellyl propanoate, hexanol และถูกต้อง-piperitol กรด Nonanoic, decanol, 1,4-P-menthadien-7-อัลอะซิเตท perillyl, β-copaene, nerolidol, caryophyllene และ tetradecanal ที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการ BOE กระบวนการ Pelatrice ก็มีลักษณะ hexanal, ทรานส์ 2 hexenal, geraniol, nootkatone, valencene, ทรานส์β-ocimene, γ-terpinene และอะซิเตท geranyl สุดท้ายมะนาวน้ำมันสกัดโดย Sfumatrice มี heptanal ส่วนใหญ่ myrcene, phellandrene, ISO-Citral 4 terpineol, citroptene, neral และ geranial ความเข้มข้นของสารที่มีลักษณะสูงในน้ำมัน แต่พวกเขายังอาจจะอยู่ในน้ำมันอื่น ๆ ก่อนหน้านี้อิทธิพลของเทคโนโลยีการสกัดน้ำมันมะนาวองค์ประกอบทางเคมีที่ได้รับแทบรายงาน (Verzera, Dugo, Mondello, Trozzi และ Cotroneo, 1999) ตามที่ Verzera et al. (1999) ขั้นตอนการผลิตน้ำมัน Pelatrice มะนาวที่มีเนื้อหาสารออกซิเจนยิ่งขึ้นสังเกตว่ามีความสอดคล้องกับผลของเรา นอกจากนี้พวกเขารายงานปริมาณสารประกอบออกซิเจนยากจนในน้ำมันที่ได้จากกระบวนการ Sfumatrice และบันทึกกลิ่นสบายมากขึ้น อีกครั้งการพิจารณาเหล่านี้มีความสอดคล้องกับผลของเราเพราะตัวอย่าง Sfumatrice มีกลิ่นส่วนประกอบที่สำคัญเช่น neral และ geranial. 3.4.3 UHPLC-TOF-MS 3.4.3.1 ทั่วไปในการศึกษา metabolomics การเข้าถึงวิธีโครมาอย่างรวดเร็วที่ให้ความละเอียดสูงและการแยกทำซ้ำสูงเป็นกุญแจสำคัญในการสร้างชุดข้อมูลที่มีคุณค่า ในแง่นี้การเปิดตัวของของเหลว chromatography ความดันสูงพิเศษ (UHPLC) ระบบปฏิบัติการที่ความดันสูงมากและการใช้ย่อย 2 ไมโครเมตรคอลัมน์บรรจุได้รับอนุญาตให้ลดลงที่โดดเด่นในการวิเคราะห์และการเพิ่มขึ้นของความจุสูงสุดความไวและการทำสำเนาเมื่อเทียบ ด้วย HPLC ธรรมดา เทคโนโลยีนี้ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางอย่างรวดเร็วโดยชุมชนการวิเคราะห์และจะถูกนำไปใช้ค่อยๆด้านต่างๆของการวิเคราะห์พืช (Eugster et al., 2011) โดยเฉพาะอย่างยิ่งใน metabolomics ส่วนประกอบออกซิเจนเฮน้ำมันมะนาวได้รับการศึกษาส่วนใหญ่ใช้วิธี HPLC-UV และ HPLC-MS ออกซิเจนลักษณะส่วนประกอบ heterocyclic และการหาปริมาณ (Desmortreux, et al, 2009 และ Dugo et al, 2010;.. Frérotและ Decorzant 2004 และ Tranchida et al, 2012) ความรู้ของเราไม่มีการศึกษาที่ตีพิมพ์ในส่วนที่ไม่ระเหยของน้ำมันมะนาววิเคราะห์โดย UHPLC-TOF-MS ซึ่งอาจจะเป็นวิธีการเลือกที่จะอธิบายลักษณะส่วนที่ไม่ระเหยของ CPLO ตามที่มันสามารถตรวจจับได้แม้ ส่วนประกอบที่อุดมสมบูรณ์ต่ำ. 3.4.3.2 ความแตกต่างทางภูมิศาสตร์ตามแหล่งที่มาการวิเคราะห์หลายตัวแปร Unsupervised (PCA และ HCA มีการปรับ Pareto) ได้ดำเนินการใน UHPLC-TOF-MS (โหมดบวก) ข้อมูลซึ่งประกอบไปด้วย 64 × 1393 เมทริกซ์ข้อมูล ไม่มีการจัดกลุ่มตัวอย่างที่ชัดเจนของการที่อาจจะตั้งข้อสังเกตตามที่กำเนิดของพวกเขา ทั้งสองโหมดไอออนไนซ์ได้รับการประเมิน; แต่โหมดบวกไอออนไนซ์พบว่ามีข้อมูลมากกว่าโหมดไอออนไนซ์ลบ สิบครั้งคุณสมบัติอื่น ๆ ที่ตรวจพบกว่าในโหมดลบ เนื่องจากความไวสูงและความละเอียดของ UHPLC-TOF-MS, คุณสมบัติหลายประการที่ตรวจพบ นี้จำนวนมากของคุณสมบัติที่อาจจะอธิบายได้ด้วยการปรากฏตัวของ adducts โซเดียมและไอออนที่ซับซ้อน ([2M + นา] + [2M + H] +) เพื่อศึกษาคุณลักษณะที่สำคัญที่สุดและมีความเกี่ยวข้องข้อมูลที่ถูก Pareto ปรับ การวิเคราะห์หลายตัวแปรภายใต้การดูแลจากนั้นก็ดำเนินการและที่สำคัญรูปแบบ OPLS-DA ที่ได้รับ (R2Y (ลบ.ม. ) = 0.939, ไตรมาสที่ 2 (ลบ.ม. ) = 0.750). สามไบนารีรุ่น OPLS-DA (ปรับ Pareto) ถูกสร้างขึ้นแล้วเพื่อตรวจสอบว่า เป็นตัวแปรจำแนกแต่ละระดับคืออาร์เจนตินากับ Italy, อิตาลีกับสเปนและสเปนกับอาร์เจนตินา มะนาวอิตาลีตัวอย่างน้ำมันที่ได้รับการพิจารณาการอ้างอิงที่พบบ่อยและ SUS พล็อตที่ถูกสร้างขึ้นโดยใช้สองรูปแบบที่เกี่ยวข้องกับอิตาลี (อิตาลีกับอาร์เจนตินาและอิตาลีกับสเปน) สำหรับการตรวจสอบตัวแปรจำแนก (รูปที่. 4) คุณสมบัติจำแนกส่วนใหญ่อาจจะประกอบไป furocoumarin อนุพันธ์บนพื้นฐานของสเปกตรัมมวลความละเอียดสูงและการเก็บรักษาเวลาเมื่อเทียบกับสารอ้างอิงให้โดย Firmenich SA ตัวอย่างอิตาลีโดดเด่นด้วย bergamottin เนื้อหาสูงของพวกเขาในขณะที่ imperatorin และ byakangelicol พบในปริมาณที่สูงที่สุดในน้ำมันสเปนและอาร์เจนติตามลำดับ ผลลัพธ์เหล่านี้มีความสอดคล้องกับข้อมูลที่ได้รับสารเคมีจากการวิเคราะห์ของ CPLOR โดย FT-MIR และ NMR การศึกษาเป็นชิ้นเพื่อระบุชัดเจนจำแนกสารเหล่านี้จากตัวอย่างของอิตาลีและอาร์เจนตินาโดย 1H