The pooled sample was then loaded o

The pooled sample was then loaded onto a Mono Q
FPLC column. The RNA binding protein was eluted between
120 and 300 mM NaCl. The active fractions from the Mono Q
column were then concentrated and loaded on an Superose 12
FPLC column. Active fractions from the Superose 12 column
were then subjected to butyl C4 reverse phase (r) HPLC. To test
for the binding activity from fractions eluted from the rHPLC
column, it was necessary to remove acetonitrile by lyophilizing
the fractions and dissolving them in 10 mM Tris HCl (pH 7.4).
To obtain the RV RNA binding protein as a single polypeptide,
active fractions from the HPLC column were pooled, concentrated,
and separated by HPEC. Fractions containing a single
protein band in silver-stained SDS/PAGE gels were pooled and
concentrated.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่าง pooled ถูกโหลดแล้วลงบนโมโน q
คอลัมน์ fplc อาร์เอ็นเอเป็นโปรตีนที่มีผลผูกพันระหว่างชะ
120 และ 300 มม. nacl เศษส่วนที่ใช้งานอยู่จากโมโน q
คอลัมน์มีความเข้มข้นแล้วและโหลดใน superose 12
คอลัมน์ fplc เศษส่วนที่ใช้งานจาก superose 12 คอลัมน์
ถูกยัดเยียดแล้วบิวทิลเฟสกลับ c4 (r) hplc เพื่อทดสอบ
สำหรับกิจกรรมที่มีผลผูกพันจากเศษส่วนชะจาก rhplc
คอลัมน์มันเป็นสิ่งจำเป็นที่จะลบ acetonitrile โดย lyophilizing
เศษส่วนและละลายพวกเขาใน 10 มิลลิเมตร tris hcl (ph 7.4).
ที่จะได้รับอาร์เอ็นเอ RV ผูกพันโปรตีนเป็น polypeptide เดียว
เศษส่วนที่ใช้งานจากคอลัมน์ hplc ถูกรวบรวมเข้มข้น
และแยกจากกันโดย hpec เศษส่วนที่มีเพียงครั้งเดียว
วงโปรตีนในเจล sds / หน้าเงินเปื้อนถูกรวบรวมและ
เข้มข้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างรวมแล้วถูกโหลดลง Q ขาวดำ
FPLC คอลัมน์ อาร์เอ็นเอรวมโปรตีนที่ eluted ระหว่าง
120 และ 300 มม. NaCl ส่วนงานจากคิวโมโน
คอลัมน์แล้วเข้มข้น และโหลดที่ 12 Superose
FPLC คอลัมน์ ส่วนที่ใช้งานอยู่จากคอลัมน์ Superose 12
ถูกต้องแล้วระยะย้อนด... C4 (r) HPLC การทดสอบ
สำหรับกิจกรรมผูกจากเศษ eluted จาก rHPLC
คอลัมน์ ก็จำเป็นต้องเอา acetonitrile โดย lyophilizing
เศษและยุบไปใน 10 มม.ทริสเรทติ้ง HCl (pH 7.4) .
รับโปรตีนรวม RV อาร์เอ็นเอเป็น polypeptide เดียว,
ทางถูกแยกส่วนที่ใช้งานอยู่จากคอลัมน์ HPLC มีพู เข้มข้น,
และคั่น ด้วย HPEC เศษส่วนที่ประกอบด้วยตัวเดียว
โปรตีนวงในเจ SDS/หน้า สีเงินถูกทางถูกพู และ
เข้มข้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กลุ่มตัวอย่างที่จะถูกโหลดเข้ากับโมโน Q คอลัมน์
fplc แล้ว โปรตีนมีผลผูกพัน rna ได้ eluted ระหว่าง
120 และ 300 NaCl มม. เพียงเศษเสี้ยววินาทีใช้งานออกจากคอลัมน์ Q
โมโนที่กระจุกตัวและโหลดใน superose fplc คอลัมน์ 12
แล้ว เพียงเศษเสี้ยววินาทีใช้งานจาก 12 คอลัมน์ superose
ซึ่งจะช่วยให้มีการเปลี่ยนแปลง hplc. butyl C 4 ย้อนกลับขั้นตอน( R )แล้ว ในการทดสอบ
ตามมาตรฐานสำหรับที่มีผลผูกพันทางการทำงานจากเพียงเศษเสี้ยววินาที eluted จาก rhplc
คอลัมน์,มันมีความจำเป็นที่จะต้องถอด acetonitrile โดย lyophilizing
ซึ่งจะช่วยได้เพียงเศษเสี้ยววินาทีและบรรจุไว้ใน 10 มม.ผลิตไฟฟ้าราชบุรีโฮลดิ้งจำกัด HCL ( PH 7.4 )..
เพื่อขอรับที่รถ RV rna มีผลผูกพันโปรตีนเป็นที่เดียว polypeptide ,
ใช้งานเพียงเศษเสี้ยววินาทีจากที่ hplc คอลัมน์ก็จะให้กระจุกตัวอยู่,
และแยกออกจากกันโดย hpec . มีเพียงเศษเสี้ยววินาทีเดียว
ตามมาตรฐานย่านความถี่ใน ผลิตภัณฑ์ ประเภท แวกซ์,เจลโปรตีนหน้าเซิร์ฟเวอร์ SDS /สีเงิน - สีก็จะกระจุกตัวอยู่และ