Extract preparation and cleanup were carried out according to
Bicchi, Pinello, Pellegrino, and Vanni (1995). The compounds were
analyzed by HPLC following the method described by Farah et al.
(2005), with some modifications. HPLC analysis was achieved with
an analytical HPLC unit model 1100 (Agilent Technologies, Palo Alto,
CA, USA) equipped with a binary pump and an automated sample
injector. A reversed-phase Hypersil-ODS (5 μm particle size,
250×4.6 mm) column was used at 25 °C. The sample injection volume
was 100 μL. The chromatographic separation was performed
using a gradient of methanol (solvent A) and Milli-Q water acidulated
with phosphoric acid (pH 3.0, solvent B) at a constant flow of 0.8 mL/
min starting with 20% solvent A. Then solvent A was increased to 50%
within 15 min to be maintained at 50% for 9 min and, finally, to return
to initial conditions (20% solvent A) in 3 min. Detection was accomplished
with a diode-array detector, and chromatograms were
recorded at 325 nm for CGA and 276 nm for Caffeine. Identification
of CGA and caffeine was performed by comparing the retention
time and the photodiode array spectra with those of their reference
compounds. Quantification of 5-caffeoilquinic (5-CQA) and caffeine
was made by comparing the peak areas with those of the standards.
Quantification of the other chlorogenic acids (CGA) was performed
using the area of 5-CQA standard combined with molar extinction
coefficients of the respective CGA as reported by Trugo and Macrae
(1984) and Farah et al. (2005).
การเตรียมสารสกัดจากการทำความสะอาดและได้ดำเนินการตาม
Bicchi, Pinello, Pellegrino และ Vanni (1995) สารประกอบที่ได้รับการ
วิเคราะห์โดยวิธี HPLC ต่อไปนี้วิธีการที่อธิบายโดยเราะห์ et al.
(2005) ด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่าง การวิเคราะห์ HPLC ก็ประสบความสำเร็จกับ
หน่วย HPLC วิเคราะห์รูปแบบ 1100 (Agilent Technologies, พาโลอัลโต,
CA, USA) พร้อมกับปั๊มไบนารีและตัวอย่างอัตโนมัติ
หัวฉีด ย้อนกลับเฟส Hypersil-ODS (5 ขนาดอนุภาคไมโครเมตร
250 × 4.6 มม) ถูกนำมาใช้คอลัมน์ที่ 25 ° C ปริมาณการฉีดตัวอย่าง
100 ไมโครลิตร การแยกสารได้ดำเนินการ
โดยใช้การไล่ระดับสีของเมทานอล (ตัวทำละลาย) และน้ำพัน-Q acidulated
กับกรดฟอสฟ (pH 3.0, ตัวทำละลาย B) ที่ไหลคงที่ของ 0.8 มิลลิลิตร /
นาทีเริ่มต้นด้วย 20% ตัวทำละลายเอแล้วตัวทำละลายเป็น เพิ่มขึ้นถึง 50%
ภายใน 15 นาทีจะได้รับการเก็บรักษาไว้ที่ 50% 9 นาทีและในที่สุดจะกลับ
ไปที่เงื่อนไขเริ่มต้น (20% ตัวทำละลาย) ใน 3 นาที การตรวจสอบก็ประสบความสำเร็จ
ด้วยการตรวจจับไดโอดอาร์เรย์และโครมาโตได้รับการ
บันทึกไว้ที่ 325 นาโนเมตรสำหรับ CGA และ 276 นาโนเมตรสำหรับคาเฟอีน บัตรประจำตัว
ของ CGA และคาเฟอีนที่ได้ดำเนินการโดยการเปรียบเทียบการเก็บรักษา
เวลาและสเปกตรัมอาร์เรย์โฟโตไดโอดกับบรรดาของการอ้างอิงของพวกเขา
สารประกอบ ปริมาณ 5- caffeoilquinic (5-CQA) และคาเฟอีน
ที่ถูกสร้างขึ้นโดยการเปรียบเทียบพื้นที่สูงสุดกับผู้ที่มาตรฐาน.
ปริมาณของกรด chlorogenic อื่น ๆ (CGA) ได้ดำเนินการ
โดยใช้พื้นที่ของมาตรฐาน 5-CQA รวมกับการสูญเสียฟันกราม
ค่าสัมประสิทธิ์ของ แต่ละ CGA รายงานโดย Trugo และ Macrae
(1984) และเราะห์และคณะ (2005)
การแปล กรุณารอสักครู่..

สารสกัดจากการทำความสะอาด และ ได้ดำเนินการตาม bicchi pinello pellegrino
, , , และแวนนี่ ( 1995 ) สารประกอบที่ถูกวิเคราะห์โดย HPLC
ตามวิธีที่อธิบายไว้โดย Farah et al .
( 2005 ) มีการปรับเปลี่ยน การวิเคราะห์ HPLC สําเร็จด้วย
หน่วย HPLC วิเคราะห์รุ่น 1100 ( Agilent Technologies , Palo Alto ,
CA , USA ) พร้อมปั๊มและหัวฉีดแบบอัตโนมัติตัวอย่าง
.เป็น reversed-phase ขน ODS ( 5 μ M ขนาดอนุภาค
250 × 4.6 มม. ) คอลัมน์ที่ใช้ อุณหภูมิ 25 องศา ตัวอย่างการฉีดปริมาณ
100 μล. ดิ้นรนแสดง
ใช้ไล่สีของเมทานอลและน้ำ ( ละลาย ) milli-q acidulated
กับกรดฟอสฟอริก ( pH 3.0 , ตัวทำละลาย B ) การไหลคงที่ของ 0.8 มิลลิลิตร /
มินเริ่มละลายแล้วละลายอีก 20 % A . เพิ่มขึ้นเป็น 50 %
ภายใน 15 นาที จะถูกเก็บรักษาไว้ที่ 50% เป็นเวลา 9 นาที และในที่สุดก็กลับไป
เงื่อนไขเริ่มต้น ( 20% ละลาย ) ใน 3 นาที ตรวจจับได้
กับไดโอดเรย์ตรวจจับ และกลิ่นถูก
บันทึกที่ 325 nm สำหรับ CGA แล้ว 276 nm สำหรับคาเฟอีน รหัส
ของ CGA และคาเฟอีนโดยการสมมติเปรียบเทียบความคงทน
เวลาและโฟโตไดโอดเรย์ให้กับพวกของตนอ้างอิง
สารประกอบ ปริมาณของ 5-caffeoilquinic ( 5-cqa ) และคาเฟอีน
ทำโดยเปรียบเทียบกับพื้นที่สูงสุดของมาตรฐาน ปริมาณของกรดคลอโรจีนิกอื่น
( CGA ) คือการใช้พื้นที่ของ 5-cqa มาตรฐานรวมกับฟันกรามการสูญพันธุ์
ค่าสัมประสิทธิ์ของ CGA ที่เกี่ยวข้องและรายงานโดย trugo MacRae
( 1984 ) และฟาร่าและ อัล ( 2005 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
