2.3. Ultrastructural studyThe nodul

2.3. Ultrastructural study
The nodules were cut into 2 × 2-mm thick pieces and fixed with 2.5%
glutaraldehyde in phosphate-buffered saline (PBS) overnight in order to
determine whether viral particles existed in the wart-like lesions.
Subsequently, glutaraldehyde-fixed tissues were washed with PBS and
further fixed in 1% osmium tetroxide and 1% ferricyanide in PBS at
4 °C for 1 h. The specimens were dehydrated in graded series of ethanol
and embedded in Epon epoxy resin. Finally, epoxy-embedded sections
were stained with uranyl acetate and examined with a transmission
electron microscope (JEM-1200EX, JEOL, Japan).
2.4. Experimental infection
LCDV-ss-free black rockfish individuals (n = 30, three of them were
sacrificed to confirm the absence of LCDV-ss by PCR), with a mean
weight of 400 ± 20 g, were used to evaluate experimental infection.
The fish were obtained from an aquarium farm in Qingdao, Shangdong
Province, and kept in a tank with a flow-through, filtered and virus-free
water system. The tank was maintained at approximately 18–22 °C, and
its water quality was daily monitored. Fish of each group (n = 10) were
challenged with 0.1 mL purified virus or PBS (control) and then maintained
for 50 days. Clinical signs of infection were daily monitored,
and the incidence was determined at 50 days post-challenge (p.c.). At
the end of the experiment, the nodules were dissected and prepared
as described in Section of 2.3 and examined by TEM.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. ศึกษาลักษณะชนิดการศึกษาก้อนถูกตัดเป็น 2 × 2 มม.หนา และแก้ไขกับ 2.5%glutaraldehyde ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟตเกลือ (PBS) ค้างคืนเพื่อให้ตรวจสอบว่า อนุภาคไวรัสอยู่ในแผลเหมือนหูดต่อมา เนื้อเยื่อถาวร glutaraldehyde ถูกล้าง ด้วย PBS และแก้ไขเพิ่มเติม ในเทโตรไซด์ออสเมียม 1% และ 1% ferricyanide ใน PBS ที่4 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ตัวอย่างที่อบแห้งในชุดจัดระดับของเอทานอลและฝังตัวในการถ่ายโอนอิพ็อกซีเรซิน ในที่สุด ส่วนที่ฝังอิพ็อกซีถูกย้อม ด้วย uranyl อะซิเตท และตรวจสอบกับการส่งผ่านกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (1200EX JEM, JEOL ญี่ปุ่น)2.4. ทดลองเชื้อฟรี LCDV ss สีดำบุคคลบ้านริมผา (n = 30 สามของพวกเขาได้เสียสละเพื่อยืนยันตัวตนของ LCDV ss โดย PCR), มีค่าเฉลี่ยน้ำหนัก 400 ± 20 กรัม ถูกใช้เพื่อประเมินการติดเชื้อที่ทดลองรับปลาจากฟาร์มปลาใน Qingdao, Shangdongจังหวัด และเก็บไว้ในถังด้วยการไหลผ่าน กรอง และไวรัสระบบประปา รถถังถูกเก็บรักษาไว้ที่ประมาณ 18-22 ° C และทุกวันมีติดตามคุณภาพน้ำ ปลาของแต่ละกลุ่ม (n = 10) ได้ท้าทายกับ 0.1 มล.บริสุทธิ์ไวรัสหรือ PBS (ควบคุม) และเก็บรักษาไว้แล้ว50 วัน มีอาการทางคลินิกของการติดเชื้อ การตรวจสอบทุกวันและอุบัติการณ์กำหนดที่ 50 วันหลังท้าทาย (สาร) ที่สิ้นสุดการทดลอง การกระเปาะ dissected และเตรียมตามที่อธิบายไว้ในส่วนของการตรวจสอบ โดย TEM และ 2.3

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 ultrastructural ศึกษา
ก้อนกลมถูกตัดออกเป็น 2 ชิ้น× 2 มิลลิเมตรหนาและคงที่ 2.5%
glutaraldehyde ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS) ในชั่วข้ามคืนเพื่อ
ตรวจสอบว่าอนุภาคไวรัสที่อยู่ในรอยโรคหูดเหมือน.
ต่อจากนั้นเนื้อเยื่อ glutaraldehyde คงที่ ถูกล้างด้วยพีบีเอสและ
ถาวรต่อไปใน 1% ออสเมียม tetroxide และ 1% ferricyanide ในพีบีเอสที่
4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ตัวอย่างที่ได้รับการอบแห้งอย่างช้า ๆ ในซีรีส์ของเอทานอล
และฝังตัวอยู่ในเพ่อีพอกซีเรซิน สุดท้ายส่วนอีพ็อกซี่ฝังตัว
ถูกย้อมด้วยสี uranyl acetate และตรวจสอบกับเกียร์
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (JEM-1200EX, JEOL ญี่ปุ่น).
2.4 การทดลองการติดเชื้อ
LCDV-SS-ฟรีบุคคลกระแด่วสีดำ (n = 30 สามของพวกเขาได้รับการ
เสียสละเพื่อยืนยันตัวตนของ LCDV-SS โดยวิธี PCR) โดยมีค่าเฉลี่ย
น้ำหนักของ 400 ± 20 กรัมถูกนำมาใช้ในการประเมินการติดเชื้อ.
ปลาที่ได้รับจากฟาร์มพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำในชิงเต่า, Shangdong
จังหวัดและเก็บไว้ในถังที่มีการไหลผ่านการกรองและไวรัสฟรี
ระบบน้ำ รถถังที่ได้รับการเก็บรักษาไว้ที่ประมาณ 18-22 องศาเซลเซียสและ
คุณภาพน้ำของมันคือการตรวจสอบทุกวัน ปลาของแต่ละกลุ่ม (n = 10) ได้รับการ
ท้าทายกับ 0.1 มลไวรัสบริสุทธิ์หรือพีบีเอส (Control) และการรักษาแล้ว
50 วัน อาการทางคลินิกของการติดเชื้อได้รับการตรวจสอบทุกวัน
และอุบัติการณ์ถูกกำหนดที่ 50 วันที่โพสต์ความท้าทาย (PC) ใน
ตอนท้ายของการทดลองก้อนที่ถูกชำแหละและเตรียมความพร้อม
ตามที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.3 และตรวจสอบด้วย TEM