A liquid chromatography-tandem mass

A liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC–MS/MS) method was developed and validated
for the quantitation of the antimalarial drug, lumefantrine (LF), in mouse whole blood and plasma. The
analyte was extracted using a protein precipitation method followed by chromatographic separation
on a Phenomenex Luna, PFP (50 mm × 2.0 mm, 5 m) analytical column with a mobile phase consisting
of acetonitrile and 0.1% formic acid (formic acid:water, 1:1000, v/v) at a ratio of 3:7 (v/v), delivered at
a constant flow rate of 0.5 ml/min. Stable isotope labeled lumefantrine (D9-LF) was used as the internal
standard. Multiple reaction monitoring was performed using the transitions m/z 530.1→m/z 347.9
and m/z 539.1→m/z 347.9 for the quantification of LF and D9-LF, respectively. Calibration curves were
constructed over the concentration range 15.6–4000 ng/ml. The mean intra- and inter-assay accuracy
values for the analysis of LF in WB was 103% (%CV= 5.5) and 99.5% (%CV= 5.5), respectively. The mean
intra- and inter-assay accuracy values for the analysis of LF in plasma was 93.7% (%CV= 3.5) and 93.9%
(%CV= 5.5), respectively. No significant matrix effect was observed during the method validation. The
validated method was applied to an absorption study in mice, to determine and compare LF concentrations
in whole blood and plasma samples. Results of the statistical analysis using a linear mixed effects
growth curve model concluded thatthere was no significant difference (p-value = 0.668) betweenWB and
plasma LF concentrations. This method utilizes a small sample volume of 20 l, facilitating low blood collection
volumes and a short chromatographic run time of 3 min which allows for high sample throughput
analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พัฒนา และตรวจสอบวิธีการคล่องตัวตามกันไป chromatography โตรเมทรี (LC – MS/MS)การวิเคราะห์หาปริมาณของยาป้องกันมาเลเรีย lumefantrine (LF), เมาส์ทั้งเลือดและพลาสม่า ที่analyte ถูกสกัดโดยใช้วิธีฝนโปรตีนตามแยก chromatographicใน Phenomenex Luna คอลัมน์วิเคราะห์ PFP (50 มม. × 2.0 มม. 5 เมตร) กับเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยacetonitrile และ 0.1% กรด (กรด formic: น้ำ 1:1000, v/v) ในอัตราส่วน 3:7 (v/v), การจัดส่งที่อัตราไหลคง 0.5 ml/นาที ไอโซโทปชื่อ lumefantrine (D9-LF) ถูกใช้เป็นการภายในมาตรฐาน ตรวจสอบปฏิกิริยาหลายทำการใช้การเปลี่ยน m/z 530.1→m / z 347.9และ 539.1→m m/z / z 347.9 สำหรับนับ LF และ D9-LF ตามลำดับ เทียบเส้นโค้งได้สร้างขึ้นเหนือความเข้มข้นช่วง 15.6 – 4000 ng/ml เฉลี่ย assay อินทรา และ inter ความถูกต้องค่าสำหรับการวิเคราะห์ของ LF ใน WB ได้ 103% (% CV = 5.5) 99.5% (% CV = 5.5), ตามลำดับ ค่าเฉลี่ยassay อินทรา และ inter ความถูกต้องค่าสำหรับการวิเคราะห์ของ LF ในพลาสมาได้ 93.7% (% CV = 3.5) 93.9%(% CV = 5.5), ตามลำดับ ไม่มีผลสำคัญเมทริกซ์ถูกตรวจสอบระหว่างการตรวจสอบวิธี ที่ใช้วิธีการตรวจเพื่อศึกษาการดูดซึมในหนู การตรวจสอบ และเปรียบเทียบความเข้มข้นของ LFในเลือดทั้งหมดและตัวอย่างพลาสม่า ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้ลักษณะพิเศษการผสมเชิงเส้นสรุปรูปแบบเส้นโค้งการเจริญเติบโต thatthere ไม่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (ค่า p = 0.668) betweenWB และความเข้มข้นของพลาสมา LF วิธีนี้ใช้ปริมาณตัวอย่างเล็ก ๆ ของ l 20 อำนวยความสะดวกการเก็บเลือดต่ำวอลุ่มและความสั้น chromatographic เวลา 3 นาทีซึ่งอัตราความเร็วสูงอย่างวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ของเหลวโคตีคู่มวลสาร (LC-MS / MS) วิธีการได้รับการพัฒนาและตรวจสอบ
หาปริมาณของยาเสพติดมาลาเรีย, lumefantrine (LF) ในเลือดทั้งเมาส์และพลาสม่า
วิเคราะห์ถูกสกัดโดยใช้วิธีการตกตะกอนโปรตีนตามด้วยการแยกสาร
ใน Phenomenex Luna, PFP (50 มิลลิเมตร× 2.0 มิลลิเมตร, 5 เมตร) คอลัมน์วิเคราะห์กับเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย
ของ acetonitrile และ 0.1% กรด (กรดฟอร์มิ: น้ำ, 1 : 1000, v / v) ในอัตราส่วน 3: 7 (v / v) ส่งที่
อัตราการไหลคงที่ของ 0.5 มล. / นาที ไอโซโทปที่มีข้อความ lumefantrine (D9-LF) ถูกใช้เป็นภายใน
มาตรฐาน ตรวจสอบปฏิกิริยาหลายได้รับการดำเนินการโดยใช้การเปลี่ยน m / Z 530.1 →เมตร / Z 347.9
เมตรและ / Z 539.1 →เมตร / Z 347.9 สำหรับปริมาณของ LF และ D9-LF ตามลำดับ เส้นโค้งการสอบเทียบที่ถูก
สร้างขึ้นในช่วงความเข้มข้น 15.6-4000 ng / ml หมายถึงความถูกต้องทั้งในและระหว่างการทดสอบ
ค่าสำหรับการวิเคราะห์ LF ใน WB ​​เป็น 103% (% CV = 5.5) และ 99.5% (CV% = 5.5) ตามลำดับ หมายถึง
ค่าความถูกต้องทั้งในและระหว่างการทดสอบการวิเคราะห์ LF ในพลาสมาเป็น 93.7% (% CV = 3.5) และ 93.9%
(CV% = 5.5) ตามลำดับ ไม่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญเมทริกซ์ถูกพบระหว่างการตรวจสอบวิธีการ
วิธีการตรวจสอบที่ถูกนำไปใช้กับการศึกษาการดูดซึมในหนูที่จะตรวจสอบและเปรียบเทียบความเข้มข้น LF
ในเลือดและตัวอย่างพลาสมา ผลการวิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้ผลกระทบเชิงเส้นผสม
รูปแบบอัตราการเจริญเติบโตสรุป thatthere ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ (p-value = 0.668) betweenWB และ
พลาสม่าเข้มข้นของ LF วิธีการนี้จะใช้ปริมาณตัวอย่างเล็ก ๆ ของ 20 ลิตรอำนวยความสะดวกในการเก็บรวบรวมเลือดต่ำ
ปริมาณและเวลาที่ใช้โครมาสั้น 3 นาทีซึ่งจะช่วยให้สามารถวิเคราะห์สารตัวอย่างสูง
ในการวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็นวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวตีคู่มวลสาร ( LC MS / MS ( ) วิธีการพัฒนาและตรวจสอบ
สำหรับเซลล์ของยาต้านมาลาเรียลูมิแฟนทรีน ( LF ) , เมาส์ทั้งในเลือดและพลาสมา
ครูโดยใช้วิธีการสกัดโปรตีนตกตะกอนตาม
แยกโครมบน phenomenex ลูน่า , PFP ( 50 มม. × 2.0 มม. , 5 M ) วิเคราะห์คอลัมน์กับเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย
ของไนและ 0.1% กรด ( กรด : น้ำ , 000 V / V ) ในอัตราส่วน 3 : 7 ( v / v ) ส่ง
มีอัตราการไหลคงที่ของ 0.5 มิลลิลิตร / นาที ไอโซโทปเสถียร ป้ายลูมิแฟนทรีน ( d9-lf ) มาใช้เป็นมาตรฐานภายใน

การใช้ปฏิกิริยาหลายการเปลี่ยน M / Z 530.1 → keyboard - key - name M / Z 347.9
M / Z 539.1 → keyboard - key - name M / Z 347.9 สำหรับปริมาณของ LF และ d9-lf ตามลำดับเส้นโค้งสอบเทียบได้
สร้างมากกว่าสมาธิช่วง 15.6 – 4 , 000 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร ซึ่งหมายความว่าภายในและระหว่างการทดสอบความถูกต้อง
ค่าการวิเคราะห์ถ้าใน WB เป็น 103 เปอร์เซ็นต์ ( % CV = 5.5 ) และ 99.5% ( % CV = 5.5 ) , ตามลำดับ ค่าเฉลี่ยและการทดสอบความถูกต้อง
ภายในระหว่างค่าการวิเคราะห์ถ้าในพลาสมาร้อยละ 93.7 % CV = 3.5 ) และ 93.9 %
% CV = 5.5 ) , ตามลำดับไม่พบเมทริกซ์ผลพบว่าในระหว่างวิธีการตรวจสอบ .
ตรวจสอบวิธีการประยุกต์ใช้เป็นการศึกษาในหนู เพื่อศึกษาและเปรียบเทียบ ถ้าความเข้มข้น
ในเลือดและตัวอย่างพลาสมา ผลของการวิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้โมเดลโค้งพัฒนาการที่มี
ผสมเชิงเส้น พบว่าไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( p-value = โดย betweenwb
) และพลาสมา ถ้าเข้มข้น วิธีนี้ใช้ปริมาณตัวอย่างเล็ก ๆของ 20 ลิตร ให้ปริมาณเลือดต่ำคอลเลกชัน
และสั้น และใช้เวลา 3 นาทีซึ่งจะช่วยให้สามารถวิเคราะห์

ตัวอย่างสูง