Phytase assayPhytase assay was perf

Phytase assay

Phytase assay was performed according to the protocol of Heinonen and Lathi [14]. Enzyme assay was done in 40 μl volume at 37 °C for 30 min in 100 mM sodium acetate buffer containing 1 mM sodium phytate. The reaction was interrupted by adding 160 μl of freshly prepared acetone/5 N H2SO4/10 mM ammonium molybdate (2:1:1, v/v). Released inorganic phosphate was quantified spectrophotometrically by measuring the absorbance at 355 nm. Phytase activity unit is defined as the amount of enzyme that catalyzes the release of 1 μM of inorganic phosphorus from sodium phytate per minute. Concentration of protein was estimated by Lowry's method [15].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบโอสเตบิลโอสเตบิลวิเคราะห์ได้ดำเนินการตามโพรโทคอล Heinonen และ Lathi [14] ทำทดสอบเอนไซม์ 40 μl ปริมาณที่ 37 ° C นาน 30 นาทีใน 100 mM โซเดียมอะซิเตบัฟเฟอร์ประกอบด้วย phytate โซเดียม 1 mM ปฏิกิริยาถูกขัดจังหวะ โดยการเพิ่ม μl 160 แสนอร่อยอะซี โตน/5 N H2SO4/10 มม. molybdate แอมโมเนีย (2:1:1, v/v) ฟอสเฟตอนินทรีย์ที่ออกมาถูกวัด spectrophotometrically โดยการวัดค่าที่ 355 nm โอสเตบิลกิจกรรมหน่วยจะกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ catalyzes รุ่น 1 Μm ของอนินทรีย์ฟอสฟอรัสจากโซเดียม phytate ต่อนาที ความเข้มข้นของโปรตีนประมาณ โดยวิธีของ Lowry [15]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

phytase ทดสอบ

phytase ทดสอบได้ดำเนินการตามโปรโตคอลของ Heinonen และ Lathi ม [14] การทดสอบการทำงานของเอนไซม์ที่ทำในปริมาณไมโครลิตร 40 ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีใน 100 มิลลิเมตรบัฟเฟอร์โซเดียมอะซิเตทมี 1 มิลลิโซเดียมไฟเตท ปฏิกิริยาถูกขัดจังหวะโดยการเพิ่ม 160 ไมโครลิตรของปรุงสดใหม่อะซีโตน / 5 N H2SO4 / 10 มิลลิแอมโมเนียมโมลิบ (2: 1: 1, v / v) ปล่อยตัวฟอสเฟตนินทรีย์ได้รับการวัด spectrophotometrically โดยการวัดการดูดกลืนแสงที่ 355 นาโนเมตร หน่วยกิจกรรม phytase ถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่กระตุ้นการปล่อยของ 1 ไมครอนของฟอสฟอรัสนินทรีย์จากโซเดียมไฟเตทต่อนาที ความเข้มข้นของโปรตีนที่ถูกประเมินโดยวิธีโลว์รีย์ [15]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

และการทดสอบใช้วิธีแสดงตามขั้นตอนของ heinonen และ L ā thi [ 14 ] วิธีทำเอนไซม์ 40 μ L เล่ม 37 ° C เป็นเวลา 30 นาทีใน 100 mM โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ที่มีไฟเตทโซเดียม 1 มิลลิเมตร ปฏิกิริยาที่ถูกขัดจังหวะโดยการเพิ่ม 160 μล. เตรียมสด ) / 5 N กรดซัลฟิวริก / 10 มม. แอมโมเนียมโมลิบเดต ( 2:1:1 , V / V ) ปล่อยฟอสเฟตอนินทรีย์คือวัดนี้วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 355 nm . หน่วยกิจกรรมกลุ่ม หมายถึง ปริมาณของเอนไซม์ที่กระตุ้นการปล่อย 1 μ M ของฟอสฟอรัสอนินทรีย์จากไฟเตทโซเดียมต่อนาที ความเข้มข้นของโปรตีนโดยวิธีประมาณของโลว์รีย์ [ 15 ]